氨基酸与特异的tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。

参与氨基酸的活化的酶：氨基酰-tRNA合成酶。

一、氨基酰-tRNA合成酶识别特定氨基酸和tRNA

第一步反应

氨基酸＋ATP-E →  氨基酰-AMP-E＋ PPi

第二步反应

氨基酰-AMP-E ＋tRNA→ 氨基酰-tRNA＋AMP ＋E

氨基酰-tRNA的表示方法

各种氨基酸和对应的tRNA结合后形成的氨基酰-tRNA表示为：

氨基酸的三字母缩写-tRNA氨基酸的三字母缩写

丙氨酰-tRNA：Ala-tRNAAla

精氨酰-tRNA：Arg-tRNAArg

甲硫氨酰-tRNA：Met-tRNAMet

二、肽链合成的起始需要特殊的起始氨基酰-tRNA

真核生物

起始氨基酰-tRNA:  Met-tRNAiMet

tRNAiMet与甲硫氨酸结合后形成Met-tRNAiMet，可以在mRNA的起始密码子AUG处就位，参与形成翻译起始复合物。起始密码子只能辨认Met-tRNAiMet。

参与肽链延长的甲硫氨酰-tRNA：Met-tRNAMet

tRNAMet和甲硫氨酸结合后生成Met-tRNAMet，必要时进入核蛋白体，为延长中的肽链添加甲硫氨酸。 

原核生物

起始氨基酰-tRNA:fMet-tRNAfMet

具有起始功能的tRNAfMet与甲硫氨酸结合后，甲硫氨酸很快被甲酰化为N-甲酰甲硫氨酸(N-formyl methionine, fMet)，于是形成N-甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAfMet)，可以在mRNA的起始密码子AUG处就位，参与形成翻译起始复合物。起始密码子只能辨认fMet-tRNAfMet。 

fMet-tRNAfMet的生成是一碳化合物转移和利用的过程之一，反应由转甲酰基酶催化，甲酰基从N10-甲酰四氢叶酸转移到甲硫氨酸的α-氨基上。