一、材料与器材
1、材料:正常人染色体标本片(非显带)
2、器材:普通光学显微镜、香柏油、镜头清洗液、擦镜纸
二、内容与方法
染色体制片是经过了许多复杂的步骤才完成的,尤其是使用药物使分裂期的细胞停留在中期;并通过低渗处理使细胞膨胀,染色体分散;固定使生物膜溶解,染色体形状固定。因此,在标本上可见到细胞核及分散的中期染色体(人体染色体标本的制备虚拟实验:http://210.36.48.189/virlab/console/?urlto=%2e%2e%2fcourse%2fcourse%5flearning%2ejsp%3fcourse%5fid%3d89,登录帐号密码都是学号)。
取染色体片置于低倍镜下观察,可见染成紫红色的圆形细胞核,其附近还能见到紫色的染色体群(中期分裂相)。分裂相中,染色体可呈棒状、粒状或点状,它们几十条相互接近地分布在比细胞核大些的区域中。选择分散好、染色体较长的分裂相进行观察。
1、观察人染色体的形态
将选好的分裂相移到视野中央,转高倍镜,调整好后转油镜观察。
在分裂相中,染色体的大小、形态不同,但染色体一般已纵裂为两条姐妹染色单体,二者只通过着丝粒相连,呈X和Y形。片中也可见染色体未纵裂的情况,其上有一处较明显的缢缩。这种缢缩称主缢痕。
根据染色体的着丝粒的位置,将人的染色体分成三类:
⑴中央着丝粒染色体(metacentric chromosome):着丝粒位于染色体中间,将染色体分成大致相等的两臂;
⑵亚中央着丝粒染色体(submetacentric chromosome):着丝粒偏离染色体的中间部位,可明显地分出长臂(q)和短臂(p)。
⑶近端着丝粒染色体(acrocentric chromosome):着丝粒靠近染色体的一端,短臂极短。在分裂相中此种染色体呈Y形,两姐妹染色单体的短臂部分的纵裂情况较难看到;未发生纵裂的近端着丝粒染色体(尤其是最小的)近似三角形。多数这种类型的染色体的短臂端连有一球形小体称为随体,一般难以看到。
(注:其它生物的细胞中还存在有端着丝粒染色体,例如小白鼠)
2、人体细胞中染色体的数目
选择分散良好的分裂相进行染色体计数时,为避免重复和遗漏,应按染色体的自然分布,将染色体分成若干群进行统计。将5个分裂相的计数结果列表统计于报告纸上,然后选择一个2n=46,染色体分散好及染色体形态清晰的分裂相进行绘图,注意染色体的大小比例。
3、同源染色体的初步判定
人体细胞中的46条染色体配成23对,每对中的两条染色体形态、大小相同,其中一条来自父方,另一条来自母方,合称为同源染色体,试在所绘的分裂相中标出一对最大的中央着丝粒染色体[标注为(1)]和一对最大的亚中央着丝粒染色体[标注为(2)]。
4、判定性别
正常人的46条染色体中,22对与性别无关,为常染色体;与性别有关的一对染色体为性染色体,女性为XX,男性为XY。
核性别:从染色体分裂相来判断分裂相来源个体的性别称之为核性别。
在常规染色的分裂相中,无法鉴别出X和Y染色体,但可通过G组染色体的数目判断性别:G组染色体属于最小的近端着丝粒染色体,包括21号、22号及Y染色体。男性细胞中有5条最小的近端着丝粒染色体;而女性细胞中有4条。

