【实验过程】

1．破坏神经系统  以左手握住蟾蜍，食指压住其头部并略下弯，将探针自枕骨大孔插入，左右横断脊髓，再向前搅毁脑，然后将探针撤回伸人脊椎管中搅毁脊髓。如果蟾蜍中枢神经破坏完全，其全身肌肉则完全松弛(图1)。

           图1．用探针损毁蟾蜍脑和脊髓  

  

    2．剪断脊柱并去除前肢及内脏  用骨剪自胸段剪断脊柱。沿脊柱的断口至耻骨处，将两侧腹壁的皮肤及肌肉剪开，再将直肠剪断，剔除前肢及内脏。注意勿伤两侧下行的坐骨神经丛。剪去肛门周围的皮肤和尾骨，并剥去两后肢的皮肤(图2)。将去皮的两后肢标本放在任氏液浸湿的白磁砖上，将手和手术器件洗净。   

    3．分离左右后肢  用粗剪沿标本的脊柱中线将标本分为左右两半。注意勿伤及神经。

    4．剥离神经  用玻璃分针将坐骨神经丛分离清楚，再从大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。用粗剪刀将和坐骨神经连接的下部脊柱多余部分剔去。以镊子夹着与神经相连的脊柱骨、提起神经，并用跟科剪将坐骨神经向大腿及其它部位发出的神经分支剪断，一直将坐骨神经分离至膝关节为止(图3)。

    5．分离腓肠肌  先分离腓肠肌的跟腱，用线结紧，自跟腱的附着点剪断。此时，提起结扎线便可将腓肠肌剥离出来。将小腿其余部分剪去，保留约重1．125px的股骨。剔除附着于骨上的其它肌肉后即完成蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本的制备(图3)。

图2 蟾蜍坐骨神经标本制作过程

（1） 剪断脊柱 （2）剪除前肢和内脏 （3）剥皮

图3蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本

    6．标本的验查：用锌铜弓轻轻地与坐骨神经接触，如果标本制作完好，肌肉立即收缩，表明标本的兴奋性良好。将标本放在盛有任氏液的玻璃皿中，以备实验之用。

    【注意事项】

    1．制备标本过程中，注意用任氏液浸湿标本，以免标本干燥。

    2．尽量避免用手或金属器件直接接触所需要的神经和肌肉，特别要留心不使蟾蜍皮肤毒腺分泌的蟾蜍素粘到神经肌肉标本上，以免标本受损。

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虚拟仿真实验操作指南：