实验二、质壁分离与洋葱表皮细胞装片的制作

    一、实验仪器与材料

    显微镜；紫色的洋葱5个；刀片，镊子，滴管，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜。质量浓度为30%的蔗糖溶液，清水。I₂－KI染液

    二、洋葱内表皮细胞装片的制作

（一）装片制作

  取洋葱（或大葱）肉质鳞片叶一块，用镊子从其内表面（凹的一面）撕下一块薄膜状的内表皮，再用剪刀剪取3一5平方毫米的一小块，迅速将其置于载玻片上已预备好的水滴中，如果发生卷曲，应细心地用解剖针将它展开，并盖上盖玻片。复盖盖玻片时，用镊子夹起盖玻片，使其一边先接触到水，然后再轻轻放平，如果有气泡，可用镊子轻压盖玻片，将气泡赶出（或重新做一次）。如果水分过多，可用吸水纸吸除，至此临时水装片制成。这种临时装片的制作，是生物实验中常用的基本技术。

（二）洋葱表皮细胞结构的观察

  将装好的临时装片，置显微镜下，先用低倍镜观察洋葱表皮细胞的形态和排列情况：细胞呈长方形，排列整齐，紧密。然后从盖玻片的一边加上一滴I₂－KI染液，同时用吸水纸从盖玻片的另一侧将多余的染液吸除（另一种方法是把盖玻片取下，用吸水纸把材料周围的水分吸除，然后滴上一滴染料，经2一3分钟，加上盖玻片即可）。细胞染色后，在低倍镜下，选择一个比较清楚的区域，把它移至视野中央，再转换高倍镜仔细观察。

三、质壁分离

  1.实验原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。

  2.方法步骤

  （1）临时装片制作

  ①选材：选用紫色特别深的洋葱外表皮。

  说明：Ⅰ在实验之前,最好将洋葱放在水中浸泡一下,可以使洋葱吸水多一些,而且代谢也比较旺盛,实验效果明显。Ⅱ将洋葱的外层剥去两层,因为处于最外的可能已经死亡。

  ②取表皮：在洋葱的外表皮上,用刀片划“井”字,用镊子轻轻撕取一小块。关键：最好撕取单层细胞,如果撕的太厚,则会使细胞重叠,严重影响实验效果。

  ③制片：在载玻片中央滴上一滴清水,然后将取下的洋葱表皮放在水中,平展开来，再盖上盖玻片。注意：Ⅰ洋葱表皮不能卷曲起来；Ⅱ不能带有气泡;Ⅲ加盖玻片时,要从一侧大约45°角放下,在载玻片和盖玻片之间充满了清水,以便挤出空气。

  （2）质壁分离实验

  ①处理：在临时装片一侧滴入清水,另一侧再用吸水纸重复几次吸引,以确保洋葱表皮细胞完全浸在几乎是清水中。

  ②观察：先在低倍镜找到一个现象质壁分离比较明显的细胞,然后换用高倍镜观察，观察到紫色的中央大液泡，原生质层津贴紧贴细胞壁。

  ③质壁分离：侧滴入蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引，重复几次。

  ④高倍镜观察：中央大液泡逐渐缩小，颜色加深，原生质层逐渐与细胞壁分离。