授课题目 （主题/章名） | 实践项目一 野外大型真菌识别、标本采集和室内分离 | 授课 教师 | 李婷/姜立春/赵秋月 | ||
授课周次 | 第9周 周二第1-4节 | 授课 时间 | 180分钟 | 授课 地点 | 园包山 |
教学目的 与要求 | 知识目标：掌握野外标本采集、分离的方法和注意事项。 能力目标：认识和掌握地域常见大型真菌的形态结构特征，初步具备鉴定其分类的能力。 素质养成：培养学生科学的学习态度、吃苦耐劳的精神、严明的纪律和团队协作的精神。 | ||||
教学重点 | 辨别食用菌分类的基本方法和食用菌生态环境的掌握。 | ||||
教学难点 | 辨别食用菌分类的基本方法 | ||||
教学方法及教学手段
| 教学方法：野外采集法、体验法、操作法、讨论法、查询鉴定法等方法相互结合运用的方式； | ||||
教学手段：利用野生菌资源、手机、木棍、互联网、解剖刀辅助教学。 | |||||
过程设计 | 准备阶段 10分钟 野生菌采集 90分钟 组织分离 30分钟 鉴定 30分钟 实践活动小结 20分钟 | ||||
授课类型 |
1.理论课£ 实践课R 2.新授课R 综合课□ 复习课□ 考核课□ 其他□ | ||||
实践 过程 |
教学内容 |
教学组织及要求 | ||||||||
准 备
| 1.采集实践、地点选择。 2.准备采集工具：平底背筐/纸盒若干个、采集刀、相机、GPS、刻度尺、钢卷尺，湿度计，温度计，记录表、记号笔、号牌、线或细绳、皮筋、空平培养皿、卫生纸（包裹部分标本用）。 4.采集具体安排，及采集注意事项。 5.准备好组织分离的培养基。 | 教学组织： 教师主导,学生主体 1.发布采集任务，学生自主购买保险。 2.组织学生提前制定采集注意事项。 3.学生以小组为单位，指定地点准时集合、乘车。 要求：注意采集期间的安全。 | ||||||||
野 生 菌 采 集 | 1.采集、形态观察与记录：野外采集时要特别注意保持子实体各部分的完整，保护容易脱落的菌环、菌托和鳞片等附属物。为了采得完整标本，要用小铲挖掘，不得用手拔，以免损坏基部。 2.采集地上生的伞菌类和盘菌类时，可用手轻轻拔出或用掘根器采集，注意一定要保持标本的完整性；对于树干和腐朽树木上的菌类，可用采集刀连带一部分树皮剥下，有时可用手锯或枝剪截取一段树枝。腐生于树干、树枝、树桩上大型真菌采集方法也一样，采到的标本应标好号，根据标本大小放入适合的蜡纸袋中，表面粘滑的种类要用蜡纸袋，随后再放入硬纸质采集盒内。对于大型木栓质标本如灵芝，可用白纸包好，直接放入标本篮中带回室内处理。标本较多时，应采集不同发育期的个体，特别注意采集幼蕾作为分类材料。 3.对于采集的标本，要按照标本的不同质地分别包装，以免损坏和丢失。肉质、胶质、蜡质和软骨质的标本需用光滑而洁白的纸制作成漏斗形的纸袋包装，把菌柄向下，菌盖在上，保持子实体的各部分完整，然后，再分别将包好的标本放入塑料桶或筐内。木质、木栓质、革质和膜质的标本，采集后用旧报纸分别包好。 4.采集时要求立即进行纪录，肉质菌类干后其色泽、气味、大小、形态等都有变化，若新鲜时不记录将会影响鉴定的准确性，甚至无法鉴定，必须把标本的形态大小、颜色、附属物、着生位置等作详细的记录。子实体采集时形态要完整。最好用照相机将菌类的生态环境，子实体发育的不同阶段一起拍摄。某些菌类的菌盖或菌柄受伤后易变色（如牛肝菌的某些种），有的菌类有乳汁流出，乳汁颜色有些还会变化（如乳菇属中某些种），有的菌类还具有特殊气味，这些均应详细记录。 5.向当地村民了解地域范围内野生菌生长、种类的情况，填好记录表。 | 教学组织： 1.学生以小组为单位，团队进行找寻、拍照、记录、采集。 2.采访当地村民，地域内野生菌资源情况调查。 3.做好采集，采访记录。
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组织分离 | 分离方法：根据不同的菌类、标本的情况，采用不同的分离方法。 1.小型薄伞菌的分离：如鬼伞类、花褶伞、小皮伞、微皮伞等小型伞菌，柄细长，菌肉层薄采用常用的组织分离法不易成功，一般采用菌褶贴附法：首先，选择较合适的子实体（刚成熟为好），在无菌操作台上取下一片菌褶（部分菌褶也行），贴附于平板上盖下方中央，正对培养基，然后将培养平板正放，于培养箱中静止放置2小时到一天，再倒扣放置培养，一发现培养基上有菌丝生长，立即转管培养，原理是：孢子通过弹射后很容易掉入培养基中，而杂菌因粘着力不能脱离菌褶上。这种方法要求子实体新鲜，采集到分离最好不超过2小时，一方面可保证菌褶能黏附于菌盖上，另一方面可保证其上杂菌不易脱离。 2.菌肉厚实的菌类的分离：这些菌类一般较易分离，分离一般采用组织分离法。 3.耳类等胶质菌分离法：要注意几个方面：1）对于菌肉厚实的菌类可直接取子实体内部的菌肉组织，但要多部位挑取菌肉组织，每个部位多做几个培养，以提高菌种成活率。2）很多的菌类菌肉薄，菌柄中空或易遭虫害，则采用与胶质菌类相同的实验方法进行组织分离，尽可能挑取子实体的干净部位，用0.2%的升汞作表面消毒，消毒时间视组织块的厚薄而定，一般30秒到2分钟即可，消毒后用灭菌的蒸馏水多洗几次，当然次数越多越好（一般3-5次〕，目的是把残留的升汞溶液洗干净，或稀释掉；细菌是不可能去的太干净，只有通过在培养基内加入相应的抗生素抑制其生长，根据实验经验，加入的抗生素的量要比推荐剂量稍微大一点才行。3）培养过程中要随时观察，对于产生附有霉菌的组织块要随时剔出，尽可能在没有产生孢子前去除，以免影响其他菌块的生长。并注意随时进行转接生长的菌种，防止在后期被污染。 4.平伏型菌类的分离：主要是一些非褶菌类，一般紧贴与基质上生长，难以采用组织分离法分离，孢子产生于表面，少且杂菌含量多，对于这类菌的分离采用基质分离法合适。具体方法是：先将要材料表面消毒，分离器具消好毒，用镊子和解剖刀将材料表面的平伏子实体除去，在子实体生长部位（子实体去除处）取黄豆大小的基质，接入合适培养基中，放入培养箱中培养既可，这种方法鉴定很重要，获得杂菌的可能性较大。 | 教学组织： 1.返回实践基地，清理采集样品、消毒处理。 2.超净工作台上进行分离在提前准备好的培养基上。 要求：无菌、快、准。
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鉴定 | 分离菌种的初步鉴定：判定生长的菌落是否就是分离菌株的菌种需要丰富的真菌知识，一般来讲，大型真菌的菌落一般很少产生无性孢子（极少数种类除外）；丝状，毛绒状，有的形成菌丝束，爬行于菌落表面和管壁；胶质菌类菌落有些特殊，有的菌丝不发达，气生菌丝少或没有。表面呈现粉末状，菌落带各种鲜艳的颜色的一般为霉菌，细菌菌落多脓状；大型真菌生长一般较慢，而霉菌生长快，这也是一个判定依据；肯定不是的要及早清除，对于实在不能判定的则通过分子方法进行鉴定。 | 教学组织：接种后25℃适时培养。观测结果。
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课程小结 | 1.指导学生以小组单位进行，对于野外采集调查进行总结、分享。 2.以个人为单位撰写社会实践报告，撰写心得体会。 3.以本次班级调查结果，撰写调查报告一份。
| 教学组织： 小组为单位讨论、总结、分享。 收集： 1.小组汇报资料 2.个人社会实践报告 3.区域野生菌资源调查报告。
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预期效果 |
实践项目野外大型真菌识别、标本采集和室内分离是培养学生第一次接触食用菌野外情况采集，通过野生菌资源采集活动的组织，采集过程中小组互助合作、沟通协调。培养学生具备初步鉴定大型野生菌能力，活动组织能力、严谨的科学态度，让同学们深切的感受到大型真菌资源物种丰富，以及对于生长环境的要求，根据调查结果指导当地食用菌种质资源的保护和培育工作。
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