破译遗传的密码——DNA
DNA简介
DNA(Deoxyribo Nucleic Acid),又称脱氧核糖核酸,是染色体的主要化学成分,同时也是基因组成的,有时被称为“遗传微粒”。DNA是一种分子,可组成遗传指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其他的化合物,如蛋白质与RNA所需。带有遗传讯息的DNA片段称为基因,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用,有些则参与调控遗传讯息的表现。
DNA的发展历程
孟德尔的发现与遗传基因

孟德尔
1865年孟德尔根据前人的工作和他自己进行8年的豌豆杂交试验,发现了自然界中遗传与变异的奥秘,提出了遗传因子分离和重组的假设,为遗传学作为一门独立学科的出现揭开了序幕。
孟德尔被科学界发现后,遗传学迅速成为生物学家们的研究热点。科学界认为“遗传因子”概念使用不方便,“基因”这一名称更能反映出事物的本质,意思是最基本的因子。1909年丹麦植物学家和遗传学家威尔海姆·约翰森提出术语“基因”,将“gangenes”简化为“gene(基因)”。
1874年瑞士化学家米歇尔发现核酸,揭示了基因的本质,首次分离出DNA,现在,人们称米歇尔发现的物质为脱氧核糖核酸(DNA),它作为染色体的一个组成部分而存在于细胞核内,是生物的遗传物质,携带着遗传信息。
弗莱明观察到细胞有丝分裂
弗莱明是世界上首位观察并系统描述正常的细胞分裂(有丝分裂)中细胞核内染色体行为的科学家,被誉为细胞遗传学的奠基人。19世纪70年代,细胞学家掌握了给细胞染色的技术,弗莱明就是这方面的先导者,他把不同阶段杀死的细胞用这些染料着色来制成一系列的切片,再用显微镜观察,就能清楚地看到细胞分裂时核内连续发生的变化。他证明了丝状物(后称染色体)有丝分裂为生长、更新提供新的细胞,因此对生命有着重要意义。

弗莱明

加罗德
英国医生加罗德观察到遗传性疾病,发现酶对基因有影响,然而,加罗德关于遗传物质控制体内特殊蛋白质的直接作用的研究直到20世纪50年代才被人们理解。鉴于他对科学的贡献,人们将加罗德尊为“化学遗传性之父”。
1911年美国生物学家摩尔根阐明关于基因的学说

摩尔根
摩尔根发现生物遗传基因的确在生殖细胞的染色体上,而且发现基因在每条染色体内是直线排列的。染色体可以自由组合,而排在一条染色体上的基因是不能自由组合的。染色体好比是链条,基因好比构成链条的链环,链环总跟着链条跑,也就是说,基因总是随着染色体走的。摩尔根把这种特点称为基因的“连锁”。由于同源染色体的断离与结合,而产生了基因的“交换”。连锁和交换定律,是摩尔根发现的遗传学第三定律,他因此创立了著名的基因学说,揭示了基因是组成染色体的遗传单位,它能控制遗传性状的发育,也是突变、重组、交换的基本单位。染色体好比传递基因的接力棒,它永不停息地从上一代传往下一代。
摩尔根是现代遗传学的奠基者,他通过著名的果蝇实验,证明并发展了孟德尔遗传学理论。他认为染色体是遗传性状传递机制的物质基础,而基因是组成染色体的遗传单位,基因的突变会导致生物体遗传特性发生变化。
1941年美国生物学家比德尔和塔特姆证明酶有控制基因的作用,认为一个基因的功能相当于一个特定的蛋白质(酶),基因和酶的特性是同一序列的,每一基因突变都影响着酶的活性,于是在1946年提出了“一个基因一个酶”的假说,奠定了基因和酶之间控制关系的概念,开创了现代生物化学遗传学。建立DNA双螺旋结构模型,克里克和沃森完成了一个划时代的创举。
20世纪40年代末,关于核酸的结构和功能的研究日益引起学术界的重视,有多种学科的科学家投入到对DNA结构和功能的探索之中,形成了生化学派、信息学派和结构学派等不同研究方向。
比德尔和塔特姆的“一个基因一个酶”的假说,50年代初,英国科学家威尔金斯等用X射线衍射技术研究DNA结构,意识到DNA是一种螺旋结构;女物理学家富兰克林在1951年底拍到了一张十分清晰的DNA的X射线衍射照片。

沃森和克里克
1952年英国剑桥卡文迪什实验室的生物化学家克里克,与美国青年生物学家詹姆斯·沃森,合作研究DNA结构,试图揭示和阐明遗传信息的结构基础。1953年他们宣布研究发现:DNA是由两条核苷酸链组成的双螺旋结构。他们在实验室中搭建了一个DNA双螺旋模型,正确地反应出DNA的分子结构。从此,遗传学的历史和生物学的历史都从细胞阶段进入了分子阶段。DNA双螺旋结构完美地说明了遗传物质的遗传、生化和结构的主要特征。
科学家详细描述了DNA的复制过程,生命的遗传之谜已经被破解。
生命是一个不断复制和进化的过程,这个过程起始于DNA的复制,它已被科学家所掌握。DNA在复制时,首先双螺旋逐渐解开,借助特殊的酶,以每条母链为模板,合成一条与它互补的子链。这就如同仿造楼梯一样,先把两扶手拆开作模板,用原料按模板原样各造一条扶手,然后配成两条双扶手螺旋形楼梯。DNA就是按照这种方式一份一份地复制,从而保证了父辈的密码像拷贝一样准确无误地传给子孙。至此,千百年来一直困扰人们的遗传之谜被解开了。
DNA的简易提取法
人体DNA的简易提取法
★所需的材料:①一茶匙盐,放进一杯水(自来水即可,绝对不能有杂质)里完全溶解;②一个干净的小玻璃杯;③一些洗涤液(去超市买正规的);④一根滴管(可在化学品试剂店买);⑤酒精度在50°以上的冰镇烈性酒。
★制取方法:在干净的小玻璃杯里放入一茶匙洗涤液并用三茶匙水稀释。用盐水在嘴里用力漱洗30秒钟左右,然后吐进稀释的洗涤液之中。用力搅拌混合物几分钟,然后非常小心地把两茶匙冰镇烈酒顺着玻璃杯的侧壁倒进去。如果你的手不能拿稳,可以使用滴管,把杯子稍微倾斜一下会对此有所帮助。这个步骤要求注意力非常集中,而且是非常关键的一步,必须要形成一个泾渭分明的水和酒之间的界限。如果你做到了细心谨慎,就将在盐和漱口水混合液的顶部形成单独的一层;等几分钟之后,你就会看到在酒之中开始形成纺锤形、白色、线状的团块样物质。这就是你的DNA。接下来如果有条件的话,可用1280倍的显微镜观察。
★注意事项:在开始提取之前,一定要保证你的口腔是干净的。如果刚吃完东西,要等4个多小时后才能提取,以确保提取的精度。
动物DNA的简易提取法
★所需的材料:①鸡血细胞液5~10毫升(后面有鸡血细胞液的制作方法);②铁架台;③铁环;④镊子;⑤三角架;⑥酒精灯;⑦石棉网;⑧载玻片(可在化学品试剂店买);⑨玻璃棒;⑩滤纸;〇11滴管(化学品试剂店买);〇12量筒(100ml一个);〇13烧杯(100ml一个,50ml和500ml各2个);〇14试管(20ml2个);〇15漏斗(建议买3个);〇16试管夹(建议买4个);〇17纱布(建议买4个);〇18体积分数为95%的酒精溶液(就是浓度为95%的酒精,实验前置于冰箱内冷却24小时,建议冷藏室的温度调节在4℃~6℃之间最好);〇19蒸馏水(不少于500毫升);〇20质量浓度为0.1%克/ml(毫升)的柠檬酸钠溶液;〇21物质的量浓度为2mol(摩尔)/L(升)和0.015mol/L的氯化钠溶液;〇22二苯胺试剂(本试剂是成瓶的)。
★制取方法:①制备鸡血细胞→取刚杀过的鸡血(要干净,不能有杂质)50毫升左右,加入柠檬酸钠防止凝血;除去上面的清液,因为DNA主要存在于细胞核中。②提取核物质→加蒸馏水(一般是鸡血细胞的2倍半)并用玻璃棒搅拌不少于5分钟,使血细胞破裂,释放出的DNA往往和蛋白质结合在一起。③溶解核内DNA→DNA在高浓度的氯化钠溶液中溶解度很高,用2mol/L的氯化钠溶液可以加速核蛋白解聚,游离出DNA。④析出含DNA的黏稠物→加蒸馏水降低氯化钠溶液的浓度至0.14mol/L,此时DNA的溶解度下降,蛋白质的溶解度增高,从而使DNA和蛋白质分离,析出DNA(注意:此步骤要精确浓度)。⑤滤出含DNA的黏稠物→用纱布过滤得到丝状DNA的黏稠物。⑥DNA黏稠物再溶解→加入2mol/L的氯化钠溶液后,充分搅拌,使DNA溶解。⑦过滤含DNA的氯化钠溶液→用新纱布过滤。⑧提取较纯净的DNA→加入冷却的浓度为95%的酒精,使DNA沉淀、浓缩、形成含杂质较少的白色丝状物。⑨DNA的鉴定→DNA的鉴定可用二苯胺法,DNA遇到二苯胺变为蓝色;还可以用“甲基绿”法,“甲基绿”使DNA变为蓝绿色。
★注意事项:①盛放鸡血细胞的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎后,DNA容易被玻璃容器吸附。因此,实验中最好使用塑料的烧杯和试管,可以减少提取过程中DNA的损失。②实验中搅拌含有悬浮物的溶液时,玻璃棒不要直插烧杯底部,同时搅拌要轻慢。③用“甲基绿”法鉴别DNA时,可将“甲基绿”直接滴到玻璃棒的丝状物上后,要用水充分冲洗掉浮色后再观察。
植物DNA的简易提取法
(提取时千万要注意里面的步骤!!!)
★所需的材料:①新鲜菜花(或蒜黄、菠菜);②塑料烧杯一个;③量筒(规格和数量同上);④玻璃棒一个;⑤尼龙纱布(数量同上);⑥陶瓷研钵一个(最好用陶瓷的);⑦试管(数量同上,没标明数量的要同时准备两个,以备用);⑧试管架(数量同上);⑨试管夹(数量同上);⑩漏斗(数量同上);〇11酒精灯一个;〇12石棉网(数量同上);〇13三角架;〇14火柴一把(小火柴);〇15刀片一把(小刀即可);〇16天平;〇17研磨液(可在化学品试剂店买);〇18体积为95%的酒精溶液(体积就是浓度);〇19二苯胺试剂一瓶;〇20蒸馏水(不少于500毫升);〇21塑料离心机一台(也可用食品加工机代替)。
★制取方法:①准备材料→将新鲜菜花和浓度为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室内,至少24个小时,建议48个小时,冷冻室的温度要调成-18°以下。②取材→称取30克菜花,去梗取花,切碎。③研磨→将碎菜花放入研钵内,倒入10毫升研磨液,充分研磨10分钟,建议15分钟。④过滤→在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中在4°的冷藏室中放置5~6分钟后,再取上面的清澈液体。⑤加冷酒精→将一倍体积的清澈液体倒入两倍体积浓度为95%的冷酒精中,并用玻璃棒缓缓地轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要插入烧杯底部)。沉淀3~5分钟后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。⑥配制二苯胺试剂→取0.1毫升B液,滴入到10毫升A液中,混匀。⑦鉴定→取4毫升DNA提取液放入试管中,加入4毫升二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
★注意事项:①一定的冷冻时间是绝对要掌握好的,因为植物的DNA提取不易。②研磨的时间也要掌握好,理由同前。③要想好一切步骤,一气呵成,就是要抓紧时间,理由同前。