《阿尔诺芬尼夫妇像》是画家的一幅著名绘画作品。画中的主人公阿尔诺芬尼，相传是当时有名的卢卡商人兼银行家，也是意大利美第奇家族在布鲁日的代言人。这幅绘制于木板上的油画，记录的是他和妻子成婚时的情景。画家用极其细腻、严密的手法，生动形象地刻画出了一对上层社会男女新婚燕尔的精彩瞬间。画面上夫妻二人都面向前方，阿尔诺芬尼头戴礼帽，身穿考究的氅式礼服，右手举至胸前，仿佛在宣誓对爱情的忠贞不渝。他的左手优雅地托着新娘的右手。穿着绿纱裙的新娘，微微低着头，左手轻轻地抚在自己鼓起的肚子上，好象在默默祈祷要做个贤妻良母。画面人物典雅从容，彬彬有礼，把婚礼仪式演绎得天衣无缝。和人物相映成趣的是他们左右极富象征意味的各种物件。新娘脚下有一只长毛小狗，被画得栩栩如生，活灵活现，很自然地让人想到是在象征着爱情的忠诚。他们的身后精致豪华的吊灯熠熠生辉，红色的床被一尘不染，仿佛在暗示以后生活的美满和幸福。在背景中央的墙壁上，有一面富于装饰性的凸镜，象征着爱情的纯洁和永恒。
这幅画表现出了极高的油画绘制技巧和水平。首先对事物的描绘极为细致、准确，可谓“于细微处见精神”，比如从那面凸镜里，不仅看得见这对新婚者的背影，还能看见站在他们对面的另一个人。小镜框的四周还镶刻着十幅耶稣受难图，图像细小得几乎辨认不清。
小凸镜左侧挂着一挂念珠，每一颗都描绘得极为逼真、形象，绝不含糊。画家精微的观察力和细密的绘画手法确实令人叹服。
其次，画家对光影的处理也极为传神。画面左侧窗户透射进来光线后，在阿尔诺芬尼夫妇的身前身后都形成了背影，画家准确地把握住了这一点。并且整个图画光线的明暗、强弱处理得恰到好处。画家还运用了多种色彩。在色彩的厚度、饱和度、浓淡度等方面都表现出了极高的水平。比如新娘：白青色的头巾、浓绿色的长裙、深蓝色的内衣、黄色的袖子，色彩搭配得鲜艳、醒目，浓淡相宜。而整个画面上各种颜色互相衬托，相得益彰，达到了极好的视觉效果。
整体上说，这幅画在光线、空间、质感的塑造上，色彩的饱和度、鲜艳度的把握上以及刻画事物的精确度、深入程度上都超越了同时代的画家，这幅画也是后来发展起来的风俗画和室内画最早的先例。
据说，凡·爱克也是油画材料和绘画技巧的革新者和改进者，他最先尝试用松脂或乳剂作为调色剂的颜料，从而能使画面在一昼夜间就可干燥而且不怕潮湿。这种方法后来被意大利画家纷纷效仿。而《阿尔诺芬尼夫妇像》，是扬·凡·爱克运用新型油画材料深入进行绘画探索的成功尝试，他通过自己大胆的艺术表现手法的探索和绘画材料的改进，为油画的发展开创了更为广阔的发展道路。