三、蛋白质的沉淀

蛋白质从溶液中析出的现象称为沉淀。破坏蛋白质颗粒表面的水化膜和同种电荷这两个稳定因素，就可使蛋白质沉淀。图2－11表示破坏两个稳定因素使带正电荷的蛋白质沉淀的过程。

图2－11　蛋白质沉淀示意图

蛋白质沉淀的常用方法有以下几种：

（一）盐析法

向蛋白质溶液中加入大量中性盐如硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等，使蛋白质从溶液中析出。中性盐可夺取蛋白质分子的水化膜并中和其表面电荷，使蛋白质沉淀。调节溶液的pH值至该蛋白质的等电点效果更佳。常用于天然蛋白质的分离。

（二）有机溶剂沉淀法

有机溶剂（甲醇、乙醇、丙酮）能破坏蛋白质分子表面的水化膜，使蛋白质沉淀析出。若将溶液pH值调至该蛋白质的等电点，沉淀更完全。在常温下用有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性，但在低温下进行可避免变性的发生。

（三）重金属盐沉淀法

重金属离子Cu^2＋、Hg^2＋、Pb^2＋、Ag^＋等，能与蛋白质负离子结合，生成不溶性盐而沉淀。反应需在溶液pH值大于该蛋白质等电点的条件下进行。临床上抢救重金属盐中毒的病人，常先口服牛奶、蛋清等，再洗胃或催吐，把不溶性蛋白质盐排出体外。

（四）生物碱试剂沉淀法

生物碱试剂（苦味酸、钨酸、三氯醋酸等）能与蛋白质正离子结合成不溶性盐而沉淀。临床检验工作中常用此类试剂检查尿蛋白，制备无蛋白血滤液。

以上四种方法的原理及特点见表2－2。

表2－2　蛋白质沉淀的原理及特点