附录A 组织培养常用术语
随着细胞培养日益广泛地被有关学科众多的科学工作者所采用,不可避免地会在各种术语的理解和使用上出现混乱。因此,将有关术语的含义介绍如下。
*1.Anchorage-dependent cells or cultures(停泊或贴壁依赖性细胞或培养物):细胞或培养物只有贴附于不起化学作用的物体(如玻璃或塑料等无活性物体)的表面时才能生长、生存或维持功能。该术语并不表明它们是属于正常还是属于恶性转化。与surface-dependent cells or cultures(表面依赖性细胞或培养物)以及substrate-dependent cells or cultures(基质依赖性细胞或培养物)同义。
Anchorage-dependent(贴壁依赖性):细胞需贴附于底物或支持物上才能生长的性质。
Anchorage-independent(无贴壁性):不依赖于贴附底物或支持物上生长的性质。
2.Apoptosis(细胞凋亡):细胞内死亡程序开启而导致细胞自杀(cell suicide)的过程,也常称为程序性细胞死亡(programmed cell death)。细胞凋亡与机体正常发育、形态形成、消除多余的细胞等生理过程密切相关,所以被认为是一种积极的生理性死亡。细胞凋亡的主要形态特征为细胞皱缩、染色质聚集与周边化(margination),以及凋亡小体(apoptotic body)的形成。凋亡小体是染色质碎片、细胞器、细胞质其他成分由细胞膜包裹而成的圆形或椭圆形的结构。细胞凋亡受到某些基因的控制,如ced、rpr、bcl-2等。体外培养的正常细胞(如胸腺细胞等)以及癌细胞(如HeLa细胞等)均可诱导而发生细胞凋亡。
3.ATCC(American Type Culture Collection):美国模式培养物收集中心,也称为美国菌种保藏中心,除收集细菌、病毒外,还保藏有大量的细胞株(系),有些可免费赠送作科学研究用,有些需购买得到。该中心的地址是:12301Parklawn Drive,Rockville,Maryland 20852,USA.
*4.Cell culture(细胞培养):细胞(包括单个细胞)在体外条件下的生长。在细胞培养中,细胞不再形成组织,但在实验室口语中,常将它扩展至组织培养与器官培养。
5.Cell fusion(细胞融合):在体外培养条件下,经化学试剂(常用PEG)、病毒(多用灭活仙台病毒)或物理方法(如电脉冲)诱发使两个独立的细胞融合成一个杂种细胞。
*6.Cell generation time(细胞一代时间):单个细胞两次连续分裂的时间间隔。可借助显微电影照相术(cinephotomicrography)来精确确定。
*7.Population doubling time(群体倍增时间):在对数生长期进行计算的细胞增加一倍所需的时间,如从1×106个细胞到2×106个细胞的时间间隔。平均群体倍增时间可以通过计算培养结束或收集培养物时的细胞数与接种时的细胞数的比值推算而得。
*8.Cell line(细胞系):原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。它由原先已存在于原代培养中的细胞的许多谱系(lineages)组成。如果不能继续传代或传代数有限,可称为有限细胞系(finite cell line),如可连续传代,则称为连续细胞系(continuous cell line),即“已建成的细胞系(established cell line)”。
Sub-line(亚系):由原细胞系分离出的具有与原细胞系不同性状的细胞系。
*9.Cell strain(细胞株):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物。
Sub-strain(亚株):由原细胞株分离出的具有与原株不同性状的细胞株。
10.Cell cycle(细胞周期):细胞从前一次分裂结束开始至本次分裂结束所经历的过程,常分为4个时期,即DNA合成期(S期)、有丝分裂期(M期)、有丝分裂完成至DNA合成开始的间隙期(G1期)以及DNA复制结束至有丝分裂开始的间隙期(G2期)。若因某种原因(如乏氧、血清饥饿等)细胞不再沿细胞周期运行,而进入休眠状态,则称为G0期。
*11.Clone(克隆):单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体,它们的遗传特性相同。
12.Cloning efficiency(克隆形成率):向底物接种单细胞悬液能形成细胞小群的百分数。
13.Confluent(汇合或会合):细胞相互连接成片占据所有底物面积。切勿与细胞融合相混淆。
Sub-confluent(近汇合):细胞在底物上生长而接近,但尚未完全汇合。
Super-confluent(超汇合):单层培养细胞附着在底物上生长,汇合后发展成多层状态。
14.Contact inhibition(接触抑制):当一个贴壁生长的体外正常细胞生长至与另一个细胞表面相互接触时,便停止了分裂增殖,虽然相互紧密接触,但不形成交叉重叠生长,也不再进入S期。
15.DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium):诺贝尔奖获得者Dulbecco R.改良的Eagle培养基,多用于哺乳动物与人细胞株(系)的培养。其他常用的培养基还有Eagle、MEM、RPMI1640、McCoy′3-5A、TC199等。
16.Explant(外植块):用于体外培养而切下的一小块组织或器官。
17.HeLa cell(海拉细胞):1951年从一位名叫Henrietta Lacks的黑人妇女的子宫颈癌组织所建立的最早的体外人类癌组织,它被广泛用于癌生物学各领域的研究。
18.In vitro malignant transformation(体外恶性转化):细胞在体外培养过程中获得了致瘤性,当把这种细胞接种于适当的动物时,可以产生肿瘤。
19.In vitro transformation(体外转化):细胞在体外培养过程中发生与原代细胞形态、抗原、增殖或其他特性的可遗传的变化,但不具有致瘤性。
20.Lipofectin:一种常用的细胞转染试剂,用该试剂包裹DNA可形成脂质体-DNA复合物,再通过融合可使DNA转染入哺乳动物细胞。
21.Minimal medium(最低限度培养基):大多数细胞能生长在其中的最简单的培养基。需要额外营养成分(如氨基酸类、嘌呤类、糖类或嘧啶类)的突变种不能在此种培养基中生长。
22.Mutant(突变体):由改变了的或新的基因引起的表型变异体。
23.Transfection(转染):用生物学的、化学的或是物理学的方法将另一细胞的某个基因(群)转移到培养细胞核内的一种实验手段。
*24.Primary culture(原代培养):从体内取出细胞或组织的第一次培养。
*25.Passage(传代或传代培养):不论是否稀释,将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养,也称为再培养。该词与subculture同义。
26.Plating efficiency(集落形成率、贴壁效率):细胞接种到培养器皿内所形成的集落(colony)的百分率。接种细胞的总数、培养瓶的种类以及环境条件(培养基、温度、密闭系统还是开放系统等)均需说明。如果能肯定每个集落均起源于单个细胞,则可使用另一专业术语——克隆形成率(cloning efficiency)。
27.Population density(群体密度):培养器皿内每单位面积或体积中的细胞数,多用每平方厘米的细胞数表示。
28.Quiescent(休止、静止):细胞处于不分裂状态,常处于G1期或G0期。
29.Saturation density(饱和密度):在特定条件下,培养皿内能达到的最高细胞数,当细胞达到饱和密度后细胞群体停止繁殖。在贴壁培养中以每平方厘米的细胞数表示,在悬浮培养中以每立方厘米的细胞数表示。
30.Seeding efficiency(贴壁率):在一定时间内,接种细胞贴附于培养皿表面的百分率,但应当说明在测定贴壁率时的培养条件。该术语与attachment efficiency同义。其含义不能与集落形成率(plating efficiency)相混淆。
31.Stem cell(干细胞):具有继续分化潜能的细胞,其中胚胎干细胞(embryonic stem cell)可形成机体所有各类型的组织和细胞,甚至发育成一个完整的胚胎,所以又称为全能性(totipotency)干细胞。随着细胞分化,这种分化潜能逐渐受到局限,只能分化有限细胞类型的细胞则称为多潜能(pluripotency)细胞以及多能性(multipotency)细胞,最终成为单能(monopotency)干细胞或定向干细胞(directional stem cell)。
32.Suspension culture(悬浮培养):细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中增殖的一种培养方式。淋巴细胞、血液肿瘤细胞等都呈悬浮生长方式。
33.Temperature-sensitive mutant(温度敏感突变体):只在一定温度下有功能,而在其他温度下无活性的突变体。
34.Thymidine kinase deficient(胸腺嘧啶核苷激酶缺陷):tk-突变体,不能将DNA前体胸腺嘧啶磷酸化。tk-细胞系对胸腺嘧啶类似物——溴脱氧尿苷有抗性,故常用于哺乳动物体细胞遗传学研究。
35.Karyotype(核型):一个细胞的全部染色体组成和特征。
*36.Cell hybridization(细胞杂交):在体外条件下,通过人工培养和诱导将不同种生物或同种生物不同类型的两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。续表
37.Idoogram(组型图):细胞染色体按形态特征排列的图形。
38.Diploid cell line or strain(二倍体细胞系或细胞株):具有二倍体核型的细胞系或细胞株。
*为国际组织培养协会对专业术语的统一规定。