附 录
一 生物化学实验室规则
1．学生进入实验室必须服从指导教师和实验室工作人员安排，应遵守实验室一切规章制度，自觉遵守课堂纪律。
2．实验前必须认真预习实验内容，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，了解所用仪器的正确使用方法。
3．实验过程中要严格按操作规程操作，并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上，经任课教师签字后，再详细写出实验报告。
4．实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用毕，应立即盖严放回原处，勿使试剂药品洒在实验台面和地上。实验完毕，玻璃仪器需洗净放好，将实验台面抹拭干净，经指导教师验收后才能离开实验室。
5．药品、试剂和各种物品必须注意节约使用。要注意保持药品和试剂的纯净，严防混杂污染。使用和洗涤仪器时，要小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，每次使用后应登记姓名并记录仪器使用情况，如发现故障要立即报告指导教师，不得擅自动手检修。
6．注意安全。实验室内严禁吸烟!不得将含有易燃溶剂的实验容器接近火焰。漏电设备不得使用。离开实验室前应检查水、电、门、窗。严禁用口吸取(或用皮肤接触)有毒药品和试剂。凡产生烟雾、有毒气体和不良气味的操作步骤均应在通风橱内进行。
7．废弃液体(强酸、强碱溶液必须先用水稀释)可倒入水槽内，同时放水冲走。废纸、火柴及其他固体废物和带渣滓沉淀的废物都应倒入废品缸内，不能倒入水槽或到处乱扔。
8．仪器损坏时，应如实向指导教师报告，并填写损坏仪器登记表，然后补领。
9．实验室内一切物品，未经本室负责教师批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。
10．每次实验课由班长安排轮流值日生，值日生要负责当天实验室的卫生、安全和一些服务性的工作。
二 实验误差
1．误差、准确度和精确度的概念以及计算方法
在进行定量实验的过程中，很难使测定所得的数值与客观存在的真值完全相同，真值与测定值之间的差值称为误差。测定误差的大小通常用准确度和精密度来评价。
准确度是指测定值与真值相接近的程度，通常用误差的大小来表示，误差愈小，准确度愈高。误差又分为绝对误差和相对误差。
一般应该用相对误差来表示实验的准确性。但是由于真值是不知道的，因此在实际工作中无法求出分析的准确度，而只能用精密度来评价分析的结果。精密度是指在相同条件下，进行多次测定后所得数据相近的程度。精密度一般用偏差来表示。偏差也分绝对偏差和相对偏差:绝对偏差=个别测定值－算术平均值(不计正负号)
当然和准确度的表示方法一样，用相对偏差来表示实验的精密度，比用绝对偏差更有意义。在实验中，对某一样品通常进行多次平行测定求得算术平均值，作为该样品的分析结果。对于该结果的精密度，常用平均绝对偏差和平均相对偏差来表示。
平均绝对偏差是个别测定值的绝对偏差的算术平均值。
应该指出误差和偏差具有不同的含义，误差以真值为标准，偏差以平均值为标准。我们平时所说的真值其实只是采用各种方法进行多次平行分析所得到的相对正确的平均值，用这一平均值代替真值计算误差，得到的结果仍然只是偏差。
还应指出，用精密度来评价分析的结果是有一定的局限性的。平均相对偏差很小，精密度很高，并不一定说明实验准确度也很高。因为如果分析过程中存在系统误差，可能并不影响每次测定数值之间的重合程度，即不影响精密度，但此分析结果却必然偏离真值，也即分析的准确度并不一定很高。当然，如果精密度也不高，则无准确度可言。
2．产生误差的原因和减小误差的方法
一般根据误差的性质和来源，可将误差分为系统误差和偶然误差两类。
系统误差与分析结果的准确度有关。它是由分析过程中某些经常发生的原因造成的，对分析结果的影响比较恒定，在重复测定时常重复出现，其大小与正负在同一实验中完全相同，因而可以设法减少纠正之。其来源主要有:①方法误差，由方法本身不够完善造成，如化学反应的特异性不高;②仪器误差，由仪器本身不够精密所致，如量器、比色杯不符合要求;③试剂误差，来源于试剂的不纯或变质;④操作误差，如个人对条件的控制、终点颜色的判断常有差异。为了纠正系统误差常采取下列措施:
(1)空白试验:为了消除试剂等因素引起的误差，可在测定时不加样品，按样品测定完全相同的操作手续，在完全相同的条件下进行分析所得的结果为空白值。将样品分析的结果扣除空白值，可得到比较准确的结果。
(2)回收率测定:取一已知精确含量的标准物质与待测未知样品同时做平行测定，测得的量与所取的量之比的百分率就称为回收率，可以检验表达分析过程的系统误差，也可通过下式对样品测量值进行校正:
(3)量具校正:偶然误差与分析结果的精密度有关。它来源于难以预料的因素，例如取样不均匀或由于某些外界因素的影响。其出现似乎没有一定的规律性，但如进行多次测定便可发现测定次数增加时，由于正误差和负误差出现的概率相等，此种误差可相互抵消。为了减少偶然误差，一般采取的措施是:
①平均取样，如动物组织制成匀浆后取样;全血标本取样时要摇匀等。
②多次取样，平行测定的次数愈多，其平均偶然误差就愈小。
除了以上两类误差以外，还有因操作事故引起的“过失误差”，如溶液溅出、标本搞错等，在计算算术平均数时此种数值应弃去不用。
三 实验室安全知识
在生物化学实验室工作，经常与易燃烧、具有爆炸危险和有腐蚀性甚至毒性较强的化学药品接触，使用的器皿大多是易碎的玻璃和陶瓷制品，实验中也常用煤气(天然气)、水、高温电热设备和各种高、低压仪器，因而在实验中难免有许多危险存在，每一位在生物化学实验室学习和工作的人员都必须有充分的安全意识、严格的防范措施和丰富实用的防护救治知识，教员应当经常对学生进行实验室安全观念的教育，以确保发生意外时能正确地进行处置，防止事故进一步扩大。
1．防火
实验室起火的原因有电流短路、不安全地使用电炉、煤气灯和易燃易爆药物的着火。为防患于未然，实验室必须配备一定数量的消防器材，并按消防规定保管使用。预防火灾必须严格遵守以下操作规程。
(1)严禁在开口容器和密闭体系中用明火加热有机溶剂，只能使用加热套或水浴加热。
(2)废弃有机溶剂不得倒入废物桶，只能倒入回收瓶内，再集中处理;量少时，用水稀释后排入下水道。
(3)不得在烘箱内存放、干燥、烘焙有机物。
(4)在有明火的实验台面上不允许放置盛有有机溶剂的开口容器或倾倒有机溶剂。
(5)使用可燃物，特别是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等)时，应特别小心，不要大量放在实验台上，更不应放在靠近火焰处，只有在远离火源或将火焰熄灭后，才可大量倾倒这类液体。
(6)易燃、易爆物质的残渣(如金属钠、白磷、火柴头)不得倒入污物桶或槽中，应收集在指定的容器中。
(7)严禁在实验室吸烟。
(8)如果不慎洒出了相当量的易燃液体，应按以下方法处理:立即切断室内所有的火源和电加热器的电源;关门，开启窗户;用毛巾或抹布擦拭洒出液体，并将液体回收到大的带塞的瓶内。
实验室中一旦发生了火灾，切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况积极正确地进行抢救和灭火。可燃液体燃着时，应立刻转移着火区域的一切可燃物质。关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用石棉布、湿布、铁片或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火;酒精及其他可溶于水的液体着火时，可用水灭火;汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时，应用石棉布或沙土扑灭，绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积;金属钠着火时，可用砂子倒在它的上面;衣服被烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动，以灭火;发生火灾时应注意保护现场。较大的着火事故应立即报警。
2．防爆
在生物化学实验室内防止爆炸事故的发生是极为重要的，因为一旦发生爆炸其毁坏力极大，后果将十分严重。在实验室中一定要坚决避免下述事件的发生。
(1)随意混合化学药品，并使其受热、受摩擦或撞击。加热时会发生爆炸的混合物包括有机化合物+氧化铜、浓硫酸+高锰酸钾，三氯甲烷+丙酮等。
(2)在密闭的体系中进行蒸馏、回流等加热操作。
(3)在加压或减压实验中使用了不耐压的玻璃仪器，或因反应过于激烈而失去控制。
(4)易燃易爆气体大量逸入室内。生物化学实验室内常用的易燃物蒸气在空气中的爆炸极限(体积百分数)见附表1。
附表1 易燃物蒸气在空气中的爆炸极限
(5)高压气瓶减压阀摔坏或失灵。
3．防中毒
生物化学实验室中常见的化学致癌物有石棉、砷化物、铬酸盐、溴化乙锭等，剧毒物有氰化物、砷化物、乙脂、甲醇、氯化氢、汞及其化合物等。中毒的原因主要是由于不慎吸入、误食或出皮肤渗入。为避免中毒情况的发生，在实验室中要注意以下几点:
(1)保护好眼睛最重要，使用有毒或有刺激性气味的气体时，必须戴防护眼镜，并应在通风橱内进行。
(2)取用有毒物品时必须戴橡皮手套。
(3)严禁用嘴吸吸量管，严禁在实验室内饮水、进食、吸烟，禁止赤膊和穿拖鞋。
(4)不要用乙醇等有机溶剂擦洗溅洒在皮肤上的药品。
一旦发生中毒事件，要根据具体情况进行紧急处理。下面简单列出了部分意外事件发生时的处理方法，但是切记对于严重的患者一定要立即送往医院治疗，不可以自行处理。
(1)试剂吸入口中应立即吐出，切勿咽下，并用水漱口数次。
(2)食入酸类应立即服Mg(OH)2乳液，勿服催吐剂;食入碱类应立即服乙酸溶液，亦勿服催吐剂;误食氧化物应立即给H2O2溶液，再将胃抽空，并立即送医院;误食汞化合物应先给蛋白溶液，再将胃抽空，并立即送医院;误食银化合物应先给25%盐水溶液，然后服催吐剂，再给蛋白溶液，并立即送医院。
(3)如果吸入CO及煤气，应及时将患者移至空气流通处，施以人工呼吸，并立即送医院;如果吸入Cl2或Br2等，应及时将患者移至空气流通处，施以人工呼吸，并立即送医院;如果吸入氨气，可立即吸入乙酸蒸气，必要时送医院。
(4)如果眼内着酸时，应立即用水洗净，再用1%硼砂溶液洗;眼内着碱时，亦应立即用水洗净，再用饱和H3BO3溶液洗涤;皮肤着酸碱时，亦处理如上。
4．外伤
在生物化学实验过程中，由于大量使用强酸、强碱以及煮沸等实验方法，要求学生一定要严格按照操作步骤进行实验。下面简单列举几种实验室常见外伤的紧急处理方法。
(1)化学灼伤:眼内若溅入化学药品，应立即用大量水冲洗15分钟，切记不可用稀酸或稀碱冲洗;皮肤酸灼伤时，先用吸水纸吸收酸液，注意不要扩散灼伤的面积，然后用大量水冲洗，再用稀NaHCO3溶液或稀氨水浸洗，最后再用水冲洗;皮肤碱灼伤，先用大量水冲洗，再用1%硼酸或2%乙酸溶液浸洗，最后再用水冲洗;溴灼伤比较危险，伤口不易愈合，一旦被溴水灼伤，应立即用20%的硫代硫酸钠溶液外洗，再用大量水冲洗，然后包上消毒纱布后就医。
(2)烫伤:发生烫伤后应立即用大量水冲洗和浸泡，若皮肤上起了水泡，不可挑破，包上纱布后立即就医。轻度烫伤可涂抹鱼肝油和烫伤膏等进行处理。
(3)割伤:发生严重割伤时应立即包扎止血，就医时务必检查受伤部位神经是否被切断。若有玻璃碎片进入眼内，必须十分小心谨慎，不可自取，不可转动眼球，可任其流泪，若碎片不出，则用纱布轻轻包住眼睛急送医院处置。若有木屑、尘粒等异物进入眼内，可由他人翻开眼睑，用消毒棉签轻轻取出或任其流泪，待异物排出后再滴几滴鱼肝油。
在实验室里应准备一个完备的小药箱，专供急救时使用。药箱内应备有医用酒精、红药水、紫药水、止血粉、创可贴、烫伤油膏(或万花油)、鱼肝油、1%硼酸溶液或2%乙酸溶液、1%碳酸氢钠溶液、20%硫代硫酸钠溶液、医用镊子和剪刀、纱布、药棉、棉签、绷带等。
5．预防生物危害
生物材料如微生物或动物的组织、细胞培养液、血液、分泌物都可能存在细菌和病毒感染的潜在性危险。如通过血液感染的血清性肝炎(澳大利亚抗原)就是最大的生物危害之一，感染途径除通过血液外，也能通过其他体液传播病毒，因此在处理各种生物材料时必须谨慎、小心，做完实验后必须用肥皂、洗涤剂或消毒液充分洗净双手。使用微生物作为实验材料，特别是使用和接触含病原的生物材料时，尤其要注意安全和清洁卫生。被污染的物品必须进行高压消毒或烧成灰烬，被污染的玻璃用具应在清洗和高压灭菌之前立即浸泡在适当的消毒液中。
6．警惕放射性伤害
放射性同位素在生物化学实验中应用得愈来愈普遍，放射性伤害也应引起实验者的高度警惕。放射性同位素的使用必须在指定的具有放射性标志的专用实验室中进行，切忌在普通实验室中操作和存放带有放射性同位素的材料。
四 关于有毒化学药品的知识
(一)高毒性固体
高毒性固体很少量就能使人迅速中毒甚至致死，常见高毒性固体见附表2。
附表2 高毒性固体
①TLV(Threshold Limid Value)极限安全值。即空气中含该有毒物质蒸气或粉尘的浓度，在此限度以内，一般人重复接触不致受害。
(二)毒性危险气体(附表3)
附表3 毒性危险气体
(三)毒性危险液体和刺激性物质
长期少量接触这些物质可能引起慢性中毒，其中许多物质的蒸气对眼睛和呼吸道有强刺激性(附表4)。
附表4 毒性危险液体和刺激性物质
续表
(四)其他有毒物质
(1)许多溴代烷和氯代烷，以及甲烷和乙烷的多卤衍生物(附表5)。
附表5 有毒的溴代烷和氯代烷等
(2)芳胺和脂肪族胺类:低级脂肪族胺的蒸气有毒。全部芳胺，包括它们的烷氧基、卤素、硝基取代物都有毒性(附表6)。
附表6 有毒的芳胺和脂肪族胺类
(3)酚和芳香族硝基化合物
(五)致癌物质
下面列举一些已知的危险致癌物质。
1．芳胺及其衍生物:联苯胺(及某些衍生物)、二甲氨基偶氮苯、β-萘胺、α-萘胺;
2．N-亚硝基化合物:N-甲基-N-亚硝基苯胺、N-甲基-N-亚硝基脲、N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基氢化吡啶;
3．烷基化剂:双(氯甲基)醚、氯甲基甲醚、重氮甲烷、硫酸二甲酯、碘甲烷、β-羟基丙酸内酯;
4．稠环芳烃:苯并［α］芘、二苯并［α，h］蒽、二苯并［c，g］咔唑、7，12-二甲基苯并［α］蒽;
5．含硫化合物:硫代乙酰胺(thioacetamide)、硫脲;
6．石棉粉尘。
(六)具有长期积累效应的毒物
这些物质进入人体不易排出，在人体内累积，可引起慢性中毒。这类物质主要有:苯、铅化合物，特别是有机铅化合物;汞和汞化合物，特别是二价汞盐和液态的有机汞化合物。在使用以上各类有毒化学药品时，都应采取妥善的防护措施，避免吸入其蒸气和粉尘，不要使它们接触皮肤。有毒气体和挥发性的有毒液体必须在效率良好的通风橱中操作。汞的表面应该用水掩盖，不可直接暴露在空气中。装盛汞的仪器应放在一个搪瓷盘上以防溅出的汞流失。溅洒汞的地方应迅速撒上硫磺石灰糊。
(七)溴化乙锭溶液的净化处理
溴化乙锭是强诱变剂，具有中度毒性，取用含有这一染料的溶液时务必戴手套。该溶液经使用后应按下面介绍的方法进行净化处理。
1．溴化乙锭浓溶液(即浓度大于0．5 mg/ml的溴化乙锭溶液)的净化处理:加入足量的水使溴化乙锭的浓度降低至0．5 mg/ml以下。然后加入1倍体积的0．1 mol/L高锰酸钾溶液，小心混匀后再加1倍体积的2．5 mol/L盐酸。小心混匀后，于室温放置数小时。再加入1倍体积的2．5mol/L氢氧化钠溶液，小心混匀后可丢弃该溶液。
2．溴化乙锭稀溶液(如含有0．5μg/ml溴化乙锭的电泳缓冲液)的净化处理:每100 ml溴化乙锭溶液中加入100 mg粉状活性炭。然后于室温放置1小时，不时摇动，或加入2．9 g Amberlit XAD-166吸附剂，于室温放置12小时，不时摇动。用Whatman 1号滤纸过滤溶液，丢弃滤液。用塑料袋封装滤纸和活性炭，作为有害废物予以丢弃。
(八)实验操作中对所用的特殊化学试剂应注意的安全事项
1．对浓酸和浓碱的操作应十分小心，要戴上手套和面罩。取用易挥发的浓酸应在通风橱中操作。
2．氰化甲烷极易挥发和易燃，也是一个有刺激性的化学窒息剂。皮肤的吸收会对人体产生有害作用。操作中应在通风橱中进行，并戴上手套和安全镜。
3．未聚合的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺是强的神经毒素，可通过皮肤吸收(效应具有积累作用)。在操作粉状或溶液状态的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺时，应戴上手套和面罩，尽可能在通风橱内称量。多聚合丙烯酰胺被认为是没有毒性的，但是在操作时也应引起注意，因为它可能含有没有完全聚合的丙烯酰胺。
4．放线菌素D是胎儿畸形诱发源和致癌剂，具有极强的毒性。人体吸入、吞咽或通过皮肤吸收都可能是致命的。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
5．木瓜蛋白酶抑制剂、胃蛋白酶抑制剂和抑蛋白酶肽对人体可能是有害的，不要吸入、吞咽或通过皮肤吸收。操作中戴上手套和安全镜。抑蛋白酶肽也可能会引起过敏反应。直接接触会引起胃肠不良反应，如肌肉疼痛、血压变化和支气管痉挛;
6．人的血液、血产品和组织可能含有隐藏的传染性物质，会引起实验室获得性传染。任何人的血液、血样品和组织都应被认为具有生物学危险，注意安全操作。要戴上一次性的手套和护目镜、穿上工作服，使用机械移液设备，在通风橱内或者生物学安全柜内操作，预防发生烟雾(例如离心或涡旋的实验操作)并在处理废品前进行消毒。对污染的塑料制品高压消毒后再处置，对污染的液体高压消毒或用体积分数为10%的漂白剂至少处理30分钟后再扔掉。
7．n-丁醇、2-丁酸和sec-丁醇对黏膜、上呼吸道、皮肤，特别是眼睛有刺激效应。操作时应戴上手套、安全镜和面罩。n-丁醇、2-丁醇和sec-丁醇还是极易燃产品。
8．氯仿对黏膜、上呼吸道、皮肤和眼睛有刺激效应，是致癌物，也可能损害肝和肾。操作中应戴上手套和安全镜，并在化学试剂通风橱中进行。
9．m-甲酚对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤具有极大的危害性。吸入、吞咽或通过皮肤吸收可能是致命的。接触可能会引起烧伤，也可能危害肾和眼睛。操作中应戴上手套和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。
10．DAPI是可能的致癌物，对人体会引起有害的刺激反应，避免吸入、吞咽或通过皮肤吸收。操作中应戴上手套和面罩。
11．二乙胺对呼吸道黏膜、眼睛、皮肤和上呼吸道具有极大的危害，吸入可能是致命的，吞咽或通过皮肤吸收可能是有害的。操作中应戴上手套、面罩和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。二乙胺还是极易燃物。
12．乙醚是易挥发、易燃物，对眼睛、黏膜和皮肤有刺激效应。它也是一个中枢神经抑制剂，具有麻醉效应。吸入、摄取或通过皮肤吸收都是有害的。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
13．DEPC是强的蛋白变性剂和致癌物。开瓶时要使瓶子尽可能远离你，因内部的压力可能导致飞溅。操作中应戴上手套，穿上工作服，并在通风橱中进行。
14．DMF对黏膜、眼睛和皮肤有刺激效应。吸入、摄取或通过皮肤吸收对人体都会发挥毒性作用。长期的吸入能导致肝和肾的损害。操作中应戴上手套、面罩和安全镜，穿上工作服，并在化学试剂通风橱中进行。
15．溴化乙锭(EB)是强的诱变剂和具有中度的毒性。使用溴化乙锭溶液时应戴上手套。
16．甲醛具有毒性，也是一个致癌物。它随时可被皮肤吸收产生刺激效应。操作中应戴上手套、面罩和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。
17．甲酰胺是胎儿畸形诱发源，气态对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤有刺激效应。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
18．戊二醛具有毒性，随时可被皮肤吸收，对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤会产生刺激效应。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
19．羟胺对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤具有极大的危害。吸入可能是致命的，吞咽或通过皮肤吸收可能是有害的。操作中应戴上手套和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。
20．8-羟基喹啉对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤都会产生刺激效应。吸入、摄取或通过皮肤吸收可能是有害的。操作中应戴上手套、安全镜和面罩。
21．液氮的温度是－185℃。处理冻存样品时应十分小心。使用液氮时应戴上隔热手套和面罩。
22．吸入或通过皮肤吸收β-巯基乙醇是致命的。高浓度的硫基乙醇对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤具有极大的危害。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
23．甲醇是有毒的，能引起眼睛的失明。为了限制对气体的接触，足够的通风是必要的。
24．四氧化锇(锇酸)极毒，不要吸入、吞咽或通过皮肤吸收。锇酸气体会损害眼睛角膜组织，能引起眼睛失明。操作时应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
25．酚具有强腐蚀性，能引起严重烧伤。操作中要戴上手套、面罩和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。与酚接触的皮肤应用大量的水清洗和肥皂水洗，而不要用乙醇洗。
26．吸入、吞咽或通过皮肤吸收对苯二胺可能是有害的。操作中应戴上手套和安全镜。
27．吡啶对眼睛、黏膜、上呼吸道和皮肤是极度有害的。吸入、吞咽或通过皮肤吸收可能是有害的，它可能是一个诱变剂。保持吡啶远离热源和火焰。操作中应戴上手套和安全镜，并在通风橱中进行。
28．PMSF是极毒的胆碱酯酶抑制剂，对呼吸道的黏膜、眼睛和皮肤具有极度的损害作用。吸入、吞咽或通过皮肤吸收可能是致命性的。操作中应戴上手套、面罩和安全镜、并在通风橱中进行。万一接触，应用大量的水冲洗眼睛或皮肤。扔掉被污染的工作服。
29．放射性物品的操作应戴上手套和安全镜，穿上工作服。
30．吸入SDS是有害的，称取时应戴上面罩。
31．叠氮钠极毒，能阻挠细胞色素电子传递系统。含叠氮钠的溶液应该有醒目的标志。操作时应十分小心，须戴上手套。
32．高氯酸钠对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激效应，如果吸入、吞咽可能是有害的。操作时应戴上手套和安全镜，穿上工作服，并在通风橱中进行。高氯酸钠是强氧化剂，与其他物品接触时可能引起着火。
33．三氯乙酸(TCA)的操作应十分小心，要戴上手套和面罩。
34．甲苯的气体对眼睛、皮肤、黏膜和上呼吸道具有刺激效应。吸入、摄取或通过皮肤吸收是有害的。操作时应戴上手套、安全镜和面罩，防止吸入气体。甲苯还易燃。
35．三乙胺是可燃物，而且对眼睛、皮肤、黏膜和上呼吸道具有强腐蚀性。吸入、摄取或通过皮肤吸收是有害的。应在通风橱中操作，并戴上手套及安全镜。
36．紫外辐射是危险的，特别是对眼睛更是如此。为了减少最大程度的接触，确定紫外光源有足够的遮蔽。戴上护眼罩或者整个安全面罩阻断紫外光。处理紫外光下的物品时，要戴上手套。紫外辐射也是诱变剂和致癌物。
37．二甲苯是可燃物，可能引起麻醉效应，对肺的刺激作用、胸疼和水肿。应在通风橱中操作，并戴上手套和安全镜。
五 生物化学实验室基本知识和操作
(一)玻璃仪器的洗涤、清洁与干燥
1．玻璃仪器的洗涤
生化实验常用各种玻璃仪器，其清洁程度将直接影响测量体积的可靠性和反应的准确性。因此，玻璃仪器的清洁不仅是实验前后的常规工作，而且是一项重要的基本技术。洗涤的玻璃仪器要求清洁透明，玻璃表面不含可溶解的物质，水沿内壁能自然流下，内壁均匀润湿且无水条纹，不挂水珠。玻璃仪器的清洗方法很多，需要根据实验的要求，以及污物性质选用不同的清洁方法。
新购玻璃器皿表面附着油污和灰尘，特别是附着有可游离的金属离子。因此，新购玻璃器皿需要用肥皂水刷洗，流水冲净后，浸于10%Na2CO3溶液中煮沸。用流水冲净后，再浸泡于1%～2%HCl溶液中过夜。流水洗净酸液，用蒸馏水少量多次冲洗后，干燥备用。
对于使用过的玻璃仪器进行清洗时。如果是一般非计量玻璃仪器或粗容量仪器，如试管、烧杯、量筒、三角瓶等先用肥皂水刷洗或用毛刷蘸去污粉或合成洗涤剂刷洗，再用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2～3次后，倒置于清洁处晾干。对于容量分析仪器，如吸量管、移液管、滴定管、容量瓶等，视其脏污程度，选择合适的洗涤液和洗涤方法。倒少量洗涤液于容器中，摇动几分钟后倒出，然后用自来水冲洗干净，再用蒸馏水或去离子水润洗几次，干燥备用。对于分光光度计中配套使用的比色杯，用毕立即用自来水反复冲洗，如有污物粘附于杯壁，宜用盐酸或适当溶剂清洗。然后用自来水、蒸馏水冲洗干净。切忌用刷子、粗糙的布或滤纸等擦拭。洗净后，倒置晾干备用。
2．玻璃仪器的干燥
一般的玻璃仪器洗净后可以放在电烘箱(温度控制在105℃左右)或红外灯干燥器中烘干。玻璃仪器在进烘箱前应尽量将水倒净;带有刻度计量的玻璃仪器不能用加热烘干的方法干燥，可用电吹风或气流烘干器吹1～2分钟冷风，待大部分水蒸发后吹入热风至干燥，然后再用冷风吹去残余的蒸汽;不急用的仪器可以洗净后放在通风干燥处自然晾干。
(二)清洗液的原理与配制
1．铬酸洗液
铬酸洗液广泛用于玻璃仪器的洗涤，其清洁效力来自于它的强氧化性和强酸性。由重铬酸钾(K2Cr2O7)和浓硫酸配制而成。硫酸越浓，铬酐越多，其清洁效力越强。因洗液具有强腐蚀性，所以使用时必须注意安全。当洗液由棕红色变为绿色时，不宜再用。
常用铬酸洗液，浓度为3%～5%。配制方法如下:称取重铬酸钾5 g置250 ml烧杯之中，加入热水5 ml搅拌，为使其尽量溶解，在烧杯下放一石棉网，向烧杯中缓慢注入工业用浓硫酸100 ml，边加边搅拌，注意不要溅出来。因为放热较多，H2SO4不宜加入过快，此时溶液由红黄色变为黑褐色。冷却后，装瓶备用。盖严以防吸水。
2．肥皂水和洗衣粉溶液
这是最常用的洗涤剂，主要是利用其乳化作用以除去污垢，一般玻璃仪器均可用其刷洗。
3．5%Na3PO4·12H2O水溶液
该溶液呈碱性，可用于洗涤油污。所洗仪器不可用于磷的测定。
4．乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)洗液
该溶液呈浓度为5%～10%的EDTA二钠洗液，加热煮沸，可去除玻璃器皿内部钙镁盐类的白色沉淀和不易溶解的重金属盐类。
5．尿素洗液
45%的尿素溶液是清洗血污和蛋白质的良好溶剂。
6．草酸洗液
称取5～10 g草酸，溶于100 ml水中，加入少量硫酸或浓盐酸，可洗脱高锰酸钾的痕迹。
7．盐酸-乙醇洗液
3%的盐酸-乙醇可以除去玻璃器皿上的染料附着物。
8．乙醇-硝酸混合液
该溶液用于清洗一般方法难以洗净的有机物。最适合于洗净滴定管。
(三)吸量管的种类和使用
吸量管是生化实验最常用的仪器之一，测定的准确度和吸量管的正确选择和使用有密切关系。
1．吸量管的分类
常用的吸量管可以分为三类。
(1)奥氏吸量管:供准确量取0．5 ml、1 ml、2 ml、3 ml液体所用。此种吸量管只有一个刻度。当放出所量取的液体时，管尖余留的液体必须吹入容器内。
(2)移液管:常用来量取50 ml、25 ml、10 ml、5 ml、2 ml、1 ml的液体，这种吸量管只有一个刻度。放液时，量取的液体自然流出后，管尖需在盛器内壁停留15秒钟。注意管尖残留液体不要吹出。
附图1 常用的三种吸量管
1，2—刻度吸量管;3—奥氏吸量管;4—移液管
(3)刻度吸量管:供量取10 ml以下任意体积的溶液。一般刻度包括尖端部分。将所量液体全部放出后，还需要吹出残留于管尖的溶液。此类吸量管为“吹出式”，吸量管上端标有“吹”字。未标“吹”字的吸量管，则不必吹出管尖的残留液体。
2．吸量管的使用方法
(1)选用原则:量取整数量液体，并且取量要求准确时，应选用奥氏吸量管。量取大体积时要用移液管。量取任意体积的液体时，应选用取液量最接近的吸量管。如欲取0．15 ml液体，应选用0．2 ml的刻度吸量管。
同一定量试验中，如欲加同种试剂于不同管中，并且取量不同时，应选择一支与最大取液量接近的刻度吸量管。如各试管应加的试剂量为0．3 ml、0．5 ml、0．7 ml、0．9 ml时，应选用一支1 ml刻度吸量管。
(2)吸量管的使用方法:附图2和附表7中列出了正确使用吸量管的方法。
附图2 吸量管的使用方法
附表7 正确使用吸量管的方法
续表
(四)容量瓶及量筒
容量瓶是一细长颈梨形的平底瓶，具有磨口塞，颈上有标线，表示在所示温度下(一般为20℃)当液体充满到标线时，液体体积恰好与瓶上所注明的体积相等。容量瓶有10 ml、25 ml、50 ml、100 ml、200 ml、250 ml、500 ml、1000 ml、2000 ml等规格。
使用容量瓶配制溶液时，一般是先将固体物质在烧杯中用少量溶剂溶解，然后将溶液沿玻棒定量地转移到量瓶中，烧杯用少量水冲洗2～3次，并注入容量瓶中，再加入溶剂混匀稀释。当稀释至溶液面接近标线时，应等待1～2分钟，使附在瓶颈内壁的水流下，并待液面的小气泡消失后，再用滴管逐滴加入溶剂，使之恰至刻度处。即溶液弯月面下缘的最低点和标线相切。然后将容量瓶塞塞好，将它反复倒置摇动数次混匀之。
容量瓶不能直接用火加热，水浴加热时也不宜骤热和骤冷，也不能置烘箱烘烤，以免变形而引起容量误差。
量筒为粗量器，当所量取的液体要求不十分准确时，可使用之。常用的有25 ml、50 ml、100 ml、250 ml、500 ml、1000 ml，量取时视线与量筒内液体凹面的最低点应在同一水平上，偏高或偏低都会造成较大的误差。量筒之底座及筒身是焊接在一起的，因而不能量取过热液体，更不能直接加热，以防炸裂。
(五)滴定管
滴定管是供容量分析滴定之用，按其容量大小可分为常量滴定管和微量滴定管两种。
常量滴定管:常用的有25 ml和50 ml两种规格，按其用途分为酸式滴定管和碱式滴定管两种:①酸式滴定管附有玻璃活塞，可盛酸性、中性以及氧化性(KMnO4、I2和AgNO3)等溶液，不宜盛碱性溶液，因为碱常使活塞与活塞套粘合，难以转动;②碱式滴定管，碱式滴定管下端套有一段约10 cm长的橡皮管(内装玻璃珠)接尖嘴玻璃管。可盛碱性溶液，不宜盛氧化性溶液，因为氧化性溶液易与橡皮起作用。
微量滴定管:总容积有1 ml、2 ml和5 ml，最小刻度为0．05 ml或0．01 ml，有的附有自动加液装置，微量滴定管尖的口径小。故流出的液滴细小。
使用滴定管应注意以下事项:
1．检查是否清洁干燥、是否漏水、玻璃塞是否滑润，如有漏水转动不灵，应拆下活塞重新涂抹凡士林。涂抹前要将玻璃塞擦干，用手指沾少量凡士林在活塞两头各擦一薄层，将活塞插入槽内，然后向同一方向转动活塞，直到从外面看全部透明为止。油涂好后，在活塞的小头的槽上套一橡皮圈，以防活塞滑脱。
2．使用前必须认出每一格表示多少毫升。先用少量滴定液清洗滴定管2～3次，然后方可装液。装液体后，管内如有气泡必须排出。
3．滴定前先应读取起始点。滴定时，左手控制玻璃塞，右手持瓶，边滴边摇，密切注意被滴定溶液的颜色变化。
4．装置滴定管时，管身必须与地面垂直。读数时眼睛与溶液月形面下缘同一水平线上，不要仰头或低头读数。
(六)易变质及需要特殊方法保存的试剂(附表8)
附表8 常见试剂的保存
需要密封的化学试剂，可以先用塞子塞紧，然后再用蜡封口;有的平时还要保存在干燥容器内，干燥剂可以用生石灰、无水氯化钙和硅胶，一般不宜用硫酸。需要避光保存的试剂，可置于棕色的瓶内或用黑纸包裹。
(七)溶液的配制
1．用固体试剂配制溶液
首先明确配制试剂是质量浓度(如g/L)还是物质的量浓度(如mol/L)，然后计算一定体积中溶液中所需要的固体试剂的用量，用台秤称取所需的量，放入烧杯中，再用量筒量取适量蒸馏水注入同一烧杯中并搅拌，使固体完全溶解。将溶解后的溶液用量筒定容到所需体积。将配制好的溶液倒入试剂瓶中，贴上标签，在合适条件下保存。注意有些试剂只能是现用现配;有些试剂只能在低温下保存;有些试剂配制后有一定的使用期限，有些溶液还要求避光保存。
2．用液体(或浓溶液)配制溶液
体积比溶液的配制:按体积比，用量筒量取液体(或浓溶液)和溶剂的用量，按一定方法在烧杯中将两者混合并搅拌均匀。将溶液转移到试剂瓶中，贴上标签，在合适条件下保存备用。
物质的量浓度溶液的配制:从有关的表中查出液体(或浓溶液)相应的质量浓度、相对密度，算出配制一定体积的物质的量浓度所需要的液体(或浓溶液)的量。用量筒量取所需的液体(或浓溶液)，加到装有少量水的烧杯中混匀。如果溶液发热，需冷却至室温后再将溶液转移到相应的容量瓶中，用蒸馏水定容，然后移入试剂瓶中，贴上标签，在合适条件下保存备用。
(八)溶液的混匀
生物化学实验中，为保证化学反应的充分进行，加入试剂后，一定要充分混匀，是保证实验成功的重要步骤之一。混匀方式大致有如下几种:①使试管作圆周运动;②指弹混匀;③吸量管混匀;④玻棒搅动;⑤电磁搅拌混匀;⑥振荡器混匀。混匀操作时，应防止管内液体溅出，以免造成液体损失。同时严禁用手指堵住试管口混匀液体，防止污染和标样的损失。
(九)过滤
在生物化学实验中过滤常用于收集滤液、收集沉淀或洗涤沉淀。在生化实验中如用于收集滤液应选用于滤纸，不应将滤纸先弄湿，湿滤纸将影响滤液的稀释比例。滤纸过滤一般采用平折法(即对折后，再对折)并且使滤纸上缘与漏斗壁完全吻合，不留缝隙。向漏斗内加液时，要用玻棒引导而且不应倒入过快，勿使液面超过滤纸上缘。较粗的过滤可用脱脂棉或纱布代替滤纸。有时以离心沉淀法代替过滤法可达到省时、快捷的目的。
六 生物化学实验常用仪器的使用
(一)722S型分光光度计的使用方法
1．722S型分光光度计的性能指标
波长范围:340～1000nm
波长精度:≤±2nm
波长重复性:≤1nm
光谱带宽:6nm
透射比范围:0．0～199．9%(T)
吸光度范围:－0．3～2．999(A)
浓度显示范围:0～9999(C)
透射比准确度:±0．5%(T)
透射比重复性:0．3%(T)
杂光:＜0．5%(T)(在360nm处，以NaNO2测定)
2．722S型分光光度计的结构简介(附图3和附表9)
附图3 722S型分光光度计的结构
1—液晶显示屏;2—0%T调节按钮，数字下调按钮;3—100%T调节按钮，数字上调按钮;4—模式转换按钮;5—功能按钮;6—模式显示;7—波长调节旋钮;8—波长指示窗;9—样品槽;10—样品移动拉杆
附表9 722S型分光光度计各部分机构及功能
续表
3．仪器的基本操作
(1)预热:为使仪器内部达到热平衡，开机后预热时间不少于30分钟。开机后预热时间少于30分钟时，请注意随时操作置0%(T)、100%(T)，确保测试结果有效。由于仪器检测器(光电管)有一定的使用寿命，应尽量减少对光电管的光照，所以在预热的过程中应打开样品室盖，切断光路。
(2)改变波长:通过旋转波长调节手轮可以改变仪器的波长显示值(顺时针方向旋转波长调节手轮波长显示值增大，逆时针方向旋转则显示值减少)。调节波长时，视线一定要与视窗垂直。
(3)置参比样品和待测样品:首先选择测试用的比色皿;然后把盛好参比样品和待测样品的比色皿放到四槽位样品架内;用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置。当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推拉一下以确保定位正确。
(4)置0%(T):该步骤的目的是校正读数标尺的零位，配合置100%(T)进入正确测试状态。分光光度计的检测器是其以光电效应的原理，但当没有光照射到检测器上时，也会有微弱的电流产生(暗电流)，调0%T主要用于消除这部分电流对实验结果的影响。一般在改变测试波长时或者是测试一段时间后要进行0%的调节。
具体的操作如下:首先检视透射比指示灯是否亮。若不亮则按MODE键，点亮透射比指示灯。然后打开样品室盖，切断光路(或将黑体置入四槽位样品架中，用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置，使黑体遮断光路)后，按“0%ADJ”键即能自动置0%(T)，一次未到位可加按一次。
(5)置100%(T):该步骤的目的是校正读数标尺的零位，配合置0%(T)进入正确测试状态。一般在改变测试波长时或者是测试一段时间后进行。
具体操作如下:将用作参比的样品置入样品室光路中，关闭掀盖后按“100%ADJ”键即能自动置100%(T)，一次未到位可加按一次。置100%(T)时，仪器的自动增益系统调节可能会影响0%(T)，调整后请检查0%(T)，若有变化请重复调整0%(T)。
由于溶液对光的吸收具有加和效应，溶液的溶剂及溶液中的其他成分对任何波长的光都会有或多或少的吸收，这样都会影响测试结果的可靠性，所以应设置参比样品以消除这些因素的影响。参比样品应根据测试样品的具体情况进行科学合理的设置。
(6)改变操作模式:本仪器设置有四种操作模式，开机时仪器的初始状态设定在透射比操作模式。分别为透射比，即测试透射比;吸光度，即测试吸光度;浓度因子，即设定浓度因子;浓度直读，即测试浓度和浓度直读。
4．应用操作
(1)测定溶液的透射比
①预热→②设定波长→③置参比样品和待测样品→④置0%(T)→⑤置100%(T)→⑥选择透射比操作模式→⑦拉动拉杆，使待测样品进入光路→⑧记录测试数据
(2)测定溶液的吸光度
①预热→②设定波长→③置参比样品和待测样品→④置0%(T)→⑤置100%(T)→⑥选择吸光度操作模式→⑦拉动拉杆，使待测样品进入光路→⑧记录测试数据
(3)测定样品的T-λ(透射比-波长)曲线
在要求测量的波长范围内以合适的波长间隔逐点按测定样品透射比的步骤重复执行，并将各波长对应的透射比标记在方格纸上，即呈现该材料的T-λ(透射比-波长)曲线。
(4)运用A-C(吸光度-浓度)标准曲线测定物质浓度
①按照分析规程配制不同浓度的标准样品溶液并记录→②按分析规程配制标准参比溶液→③预热，改变波长，置参比样品和待测样品，置0%(T)，置100%(T)→④选择吸光度操作模式→⑤测出不同浓度的标准溶液和待测样品对应的吸光度，并记录各数组→⑥根据不同浓度的标准溶液对应的吸光度数组手工绘制C-A曲线，或运用仪器的RS232C接口配合仪器的专用软件拟合出C-A曲线→⑦根据待测样品吸光度，在C-A曲线上找出对应的浓度。
(5)浓度直读应用
当分析对象比较稳定且其标准曲线基本过原点的情况下，用户不必采用较复杂的标准曲线法检测待测样品的浓度，而可直接采用浓度直读法做定量检测。
要求:待测溶液的浓度大概在标准样品浓度的2/3左右。操作步骤如下:
①测出待测样品和标准样品的吸光度→②选择测试浓度操作模式→③设定浓度直读为标准含量或含量值的10n倍→④浓度值=显示值×10n倍，记录测试数据
(6)浓度因子功能应用
按“浓度直读”执行前3步后、置浓度因子操作模式，在数值显示窗中将显示这一标准样品的浓度因子，记录该浓度因子数值，则在下次测试同一种样品时，开机后不必重新测量标准样品的浓度因子，而只需直接重新输入该浓度因子数值，即可直接对待测样品进行浓度直读来测定浓度。操作步骤如下:
①预热，校正波长准确度，改变波长，置参比样品和待测样品，置0%(T)，置100%(T)→②置浓度因子操作模式→③设定浓度因子为已测得的浓度因子值→④置浓度直读操作模式→⑤记录待测样品浓度
5．仪器日常维护
(1)清洁仪器外表宜用温水，切忌使用乙醇、乙醚、丙酮等有机溶液，用软布和温水轻擦表面即可擦净。必要时，可用洗洁精擦洗表面污点，但必须即刻用清水擦净。仪器不使用时，请用防尘罩保护。
(2)波长范围由定位机构限定，旋转波长调节手轮至短波端335nm和长波端1000nm时，调准为止，切勿用力过大，以免损坏限位机构(为确保仪器工作于标定波长范围，本机短波端限位在332nm附近，长波端限位在1003nm附近)。
6．比色皿的使用
(1)比色皿要配对使用，因为相同规格的比色皿仍有或多或少的差异，致使光通过比色溶液时，吸收情况将有所不同。
(2)注意保护比色皿的透光面，拿取时，手指应捏住其毛玻璃的两面，以免沾污或磨损透光面。
(3)在已配对的比色皿上，于毛玻璃面上做好记号，使其中一支专置参比溶液，另一支专置试液。同时还应注意比色皿放入比色皿槽架时应有固定朝向。
(4)如果试液是易挥发的有机溶剂，则应加盖后，放入比色皿槽架上。
(5)凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液，不得长时间盛放在比色皿中。
(6)倒入溶液前，应先用该溶液淋洗比色皿内壁三次，倒入量不可过多，以比色皿高度的4/5为宜。
(7)每次使用完毕后，应用蒸馏水仔细淋洗，并以吸水性好的软纸吸干外壁水珠，放回比色皿盒内。
(8)不能用强碱或强氧化剂浸洗比色皿，而应用稀盐酸或有机溶剂，再用水洗涤，最后用蒸馏水淋洗三次。
(9)不得在火焰或电炉上进行加热或烘烤比色皿。
(10)若发现比色皿被玷污时，可以用洗液清洗，也可用20W的玻璃仪器清洗超声波清洗半小时，一般都能解决问题。
(二)UV/VIS-5100紫外-可见分光光度计的使用
UV5100是由上海元析仪器有限公司生产的紫外-可见分光光度计，因波长范围是:200～1000nm的连续光谱，所以能在紫外、可见、近红外光谱区区域对样品物质作定性和定量分析。
1．UV/VIS-5100型分光光度计的性能指标
波长范围:200～1000nm
光谱带宽:4nm
波长精度:≤±2nm
波长重复性:≤0．5nm
光度准确度:±0．5%T
光度重复性:0．3%T
稳定性:0．003A/h
杂散光:≤0．2%T
数据输出:USB
打印输出:并行口
显示系统:128×64位液晶显示器
光源:钨灯、氘灯
透射比范围:0．0～200%(T)
吸光度范围:－0．3～3(A)
浓度显示范围:0～9999(C)
外形尺寸:430mm×300mm×160mm
2．仪器的外部结构以及功能键的使用(见附图4和附表10)
附图4 UV-5100可见/紫外分光光度计的外部结构
附表10 UV-5100可见/紫外分光光度计的外部按键及功能
3．仪器的基本操作
(1)开启和自检
①仪器开启:用电源线连接上电源，打开仪器开关(位于仪器的后右侧)，仪器开机后进入系统自检过程。
②系统自检:在自检状态，仪器会自动对滤光片、灯源切换、检测器、氘灯、钨灯、波长校正、系统参数和暗电流进行检测。如果某一项自检出错，仪器会自动鸣叫报警，同时显示错误项，用户可按任意键跳过，继续自检下一项。
③系统预热:仪器开机后，因电器件需要预热一定的时间后方可达到稳定状态;另外氘灯周围环境也需要一定时间方能达到热平衡，所以仪器需要预热约20分钟后，方可正常使用。自检结果后，仪器进入预热状态，预热时间为20分钟，预热结束后仪器会自动检测暗电流一次。预热时可以按任意键跳过。
④进入系统主菜单:仪器自检结束后进入主界面。按“MODE”键可以在T、A、C、F间自由转换，分别实验透过率测试，吸光度测试，标准曲线和系统法等功能。
(2)透过率测试
在此功能下，可进行固定波长下的透过率测试，也可以将测量结果打印输出。
①设定工作波长:在系统主界面下，系统的默认功能项为透过率测试，此时直接按“GOTOλ”键可以进入波长设定界面，用上下键来改变波长值，每按一次该键则屏幕上的波长值会相应增加或减少0.1nm，按“ENTER”键确认。可以长按此二键，则数字会快速变化，直至所需的波长值为止，按“ENTER”键确认。波长设定完成后自动返回上级界面。
②按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调100.0%T:在调100．0%T之前记得将空白样品拉(推)入光路中，否则调100．0%T的结果不是空白液的100．0%T，使得测量结果不正确。
③进行测量:当调100．0%T完成后，把待测样品拉(推)入光路中，按“ENTER”键进入测量界面(若已经在测量界面下，则无需此项操作，直接进行后面的操作即可)，按“ENTER”键即可在当前工作波长下对样品进行透过率的测量。每按下一次“ENTER”键，系统会自动将当时所显示的数值记录到数据存储区，但当查看时，液晶显示屏的每一屏只可显示5行数据，其余数据可通过按上下键进行翻页显示。
④数据打印与清除:数据存储区最多可存储200组数据。如果要打印或消除已测量数据，可在测量结果显示界面下，按“PRINT/ CLEAR”键，进入打印或删除界面，用上下键选择对应的操作即可。按“ESC”键即退出该界面。
(3)吸光度测试
①按“MODE”键切换至A模式(即吸光度测量模式)
②设定工作波长，设定方法同“透光率测试”。
③按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调0．000A。
④进行测量。当调0．000A完成后，把待测样品拉(推)入光路中，按“ENTER”键进入测量界面，并按“ENTER”键将测量的数据存入数据存储区。
(4)标准曲线法
标准曲线法是用已知浓度的标准样品，建立标准曲线，然后用所建立的标准曲线来测量未知样品浓度的一种定量测试方法。
①进入标准曲线法主界面(C模式):按“MODE”键至光标切换到“C”上即可进入标准曲线模式。在此功能下，可以利用标准样品建立标准曲线，并可用所建标准曲线对未知样品浓度进行测试。
接下来的操作按照标准曲线是否为新建分为新建标准曲线和直接打开标准曲线两种方法(附图5)。
附图5 标准曲线法功能框架图
②新建标准曲线法的操作步骤:
A．新建曲线:在标准曲线法主界面下，用上下键选定“新建曲线”，按“ENTER”键进入建立标准曲线步骤，根据仪器界面的提示逐步操作。
B．进入标准样品个数设定界面。选定“新建曲线”后，按“ENTER”键，进入标准样品个数设定界面。根据需要，按下下键选择标准样品个数，并按“ENTER”键确认。标样数的设定范围为:1～12，在此界面下进行波长设定。
C．标准样品浓度设定:当样品个数输入完成后自动进入浓度设置界面。此时首先将参比样拉入光路，然后按“ZERO”键校空白。然后根据提示将1号标样拉入光路，并输入1号标准样品的浓度，输入方法如下:光标最初停留在第一位上闪烁，此时按上下键，则该位数字会在0～9和小数点间变化，选择所需的数字并按“ENTER”键确认，则光标会自动移到第二位上，用同样的方法输入第二位及以后的各位数字。当输入完最后一位数字时按“ENTER”键，则系统会自动记录其吸光度并转入2号标样输入界面。然后将2号标样拉入光路，并参照1号标样的输入方法输入2号标样的浓度。重复上述步骤。直至最后一个标样的浓度输入完成。
D．绘制标准曲线:当最后一个标样的浓度输入完成并按“ENTER”键确认后，系统会自动显示所建立的标准曲线与曲线方程和相差系数R。
注意事项:
A)浓度的设定范围为:0～9999．9，否则视为无效，需要重新输入，标准样品一般按照浓度由低向高依次放入光路中，即1号样品往往是配制的标准样品中浓度最低的。
B)仪器在曲线建立过程中，若系统认为采入的数据有误(有可能是操作错误，也有可能是溶液配制有问题)，则会蜂鸣3声后返回主界面，且标准曲线无法正常绘出。
E．进入浓度测试界面:在标准曲线界面下，按“ENTER”键即可进入浓度测试界面。
F．未知样浓度测定:将参比溶液拉(推)入光路，调0．000A/ 100．0%T，再将未知浓度的样品拉(推)入光路中，按“ENTER”键，显示器上便可显示相应样品的浓度。重复上述步骤，可以完成多个样品的浓度测试。
G．数据的打印或删除:系统最多可以存储200组测试数据，若按“ENTER”键即可进入打印选择界面。如果仪器连接了打印机，可以选择“打印数据”，然后按“ENTER”进行数据打印;如果系统未连接打印机且用户仅想消除数据，可直接选择“删除数据”后按“ENTER”键确认。按“取消”键退出。打印数据后，系统内的存储数据将被清除。
③打开曲线直接测定法:所有建立的曲线都会被自动存储在系统里并按顺序自动编号。下次使用时可以直接调出曲线进行测试，无需重复建立。当想调出曲线时，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“打开曲线”，按“ENTER”键即可进入已建曲线选择界面。
系统共可存储50条标准曲线，进入曲线选择界面后，用上下键将光标移动到所需要的曲线上，按“ENTER”键确认，则系统会显示出曲线，再按“ENTER”键即可用选定的曲线对未知浓度样品进行测试。
④删除曲线:此功能用来删除已保存的曲线，若要删除某条曲线，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“删除曲线”，按“ENTER”键进入删除曲线选择界面。用上下键选定所要删除的曲线方程，按“ENTER”进入删除再确认界面，选择“是”并按“ENTER”键后曲线方程即被删除，同时返回上级菜单。按“ESC”返回上级菜单。
(5)系统法(F模式)
系统法是工作曲线法的简单应用，如果用户已知曲线方程，可以直接将方程的系数K和B输入仪器，并利用该方程进行未知浓度样品的测试。
①进入系统法:在定量测量主界面下，按“MODE”键即可进入系数测量主界面。
②设定系数K:用上下键将光标移动到“曲线参数K”上，按“ENTER”键确认，系统即进入K设定界面。K值的设定方法同前面建立标准曲线中浓度的输入方法相同，在此不再详述。需要指出的是在输入K值前，首先要对K值的正负进行选择。
③设定系数B:用上下键将光标移动到“曲线参数B”上，按“ENTER”键确认，系统进入参数B设定界面。方法同K值设定。
④测试:B值设定并确认后，系统自动返回到上级界面。用上下键将光标移动到“测试”上，并按“ENTER”键确认，则系统进入到预测试界面，继续按“ENTER”键进入到数据记录界面，此时将参比溶液放入光路，按“ZERO”键调100%T，然后把待测样品接入光路，按“START”键进行测试，系统将测试结果自动存储。系统共可存储200组数据。如果波长未设定，需要在预试界面或测试界面进行波长设定。
4．如何校正0%T
UV-5100型分光光度计属于全自动型仪器，在测试过程中不需要每次测量都校正0%T，仪器中校正0%T对应的操作为“暗电流校正”。如果仪器的使用环境发生改变(如温度、工作电压、环境光线发生变化)，则需要进行暗电流校正操作，在“系统应用”中选择“暗电流校正”，确认即可。
(三)酸度计的使用
酸度计(pHmeter)亦称pH计，是通过测量原电池的电动势，确定被测溶液中氢离子浓度的仪器。它具有结构简单，测量范围宽，速度快，适应性广，易于实现流线自动分析等特点。根据测量要求不同，酸度计分为普通型、精密型和工业型三类，读数值精度最低为0．1，最高为0．001。酸度计使用时要求满足下述条件:①环境温度: 5～40℃;②相对湿度:不大于85%;③供电电源一般为AC(220±22)V，(50±1)Hz;④除地球磁场外无其他磁场干扰;⑤避免接触具有腐蚀性的空气和水蒸气;⑥避免阳光直射。
下面简要介绍pHS-3D型pH计的使用方法。pHS-3D型pH计是一台精密数字显示pH计，它采用大屏幕、带蓝色背光、双排数字显示液晶，可同时显示pH值、温度值或电位(mV)、温度。该仪器适用于大专院校、研究院所、环境监测、工矿企业等部门的化验室取样测定水溶液的pH值和电位(mV)值，配上ORP电极可测量溶液ORP(氧化还原电位)值，其配上离子选择性电极，可测出该电极的电极电位值。该pH计的基本结构如附图6所示。
附图6 pHS-3D型pH计的基本结构
pHS-3D型pH计的操作步骤如下:
1．开机前的准备:将多功能电极架插入多功能电极架插座中，将pH复合电极安装在电极架上，然后将pH复合电极下端的电极保护套拔下，并且拉下电极上端的橡皮套使其露出上端小孔。如不用复合电极，则在测量电极插座处插入玻璃电极插头，参比电极接入参比电极接口处。最后用蒸馏水清洗电极。
2．标定:
(1)自动标定(适用于pH=4、pH=6．86、pH=9．18标准缓冲溶液):
①打开电源开关，仪器进入pH值测量状态，预热30分钟。
②按“模式”键一次，使仪器进入溶液温度显示状态(此时温度单位℃指示灯闪亮)，按“△”键或“▽”键调节温度显示数值上升或下降，使温度显示值和溶液温度一致，然后按“确认”键，仪器确认溶液温度值后回到pH值测量状态。
③把用蒸馏水或去离子水清洗过的电极插入pH=6．86(或pH=4;或pH=9．18)的标准缓冲溶液中，待读数稳定后按“模式”键两次(此时pH指示值全部锁定，液晶显示器下方显示“定位”，表明仪器在定位标定状态)，然后按“确认”键，仪器显示该温度下标准缓冲溶液的pH值。
④把用蒸馏水或去离子水清洗过的电极插入pH=4(或pH= 9．18;或pH=6．86)的标准缓冲溶液中，待读数稳定后按“模式”键三次(此时pH指示值全部锁定，液晶显示器下方显示“斜率”，表明仪器在斜率标定状态)，然后按“确认”键，仪器显示该温度下标准缓冲溶液的标称值，仪器自动进入pH值测量状态。如果误使用同一标准缓冲溶液进行定位、斜率标定，在斜率标定过程中按“确认”键时，液晶显示器下方“斜率”显示会连续闪烁三次，通知斜率标定错误，仪器保持上一次标定结果。
⑤用蒸馏水及被测溶液清洗电极后即可对被测溶液进行测量。
(2)手动标定(适用于pH=0～14的任何标准缓冲溶液):
①打开电源开关，仪器进入pH值测量状态。
②按“模式”键一次，使仪器进入溶液温度状态(此时温度单位℃指示灯闪亮)，按“△”键或“▽”键调节温度显示数值上升或下降，使温度显示值和溶液温度一致，然后按“确认”键，仪器确定溶液温度后回到pH值测量状态。
③把用蒸馏水或去离子水清洗过的电极插入已知标准缓冲溶液l中，待读数稳定后按“模式”键两次(此时pH指示值全部锁定，液晶显示器下方显示“定位”，表明仪器在定位标定状态)，按“△”键或“▽”键调节pH值定位显示数值上升或下降，使之达到要求的标称定位数值，然后按“确认”键，仪器按照要求的定位数值完成定位标定并进入pH值测量状态。
④用蒸馏水或去离子水清洗过的电极插入已知标准缓冲溶液2中，待读数稳定后按“模式”键三次(此时pH指示值全部锁定，液晶显示器下方显示“斜率”，表明仪器在斜率标定状态)，按“△”键或“▽”键调节pH值上升或下降，使之达到要求的标称数值，然后按“确认”键，仪器按照要求完成斜率标定并进入pH值测量状态。如果误使用同一标准缓冲溶液进行定位、斜率标定，在斜率标定过程中按“确认”键时，液晶显示器下方“斜率”显示会连续闪烁三次，通知斜率标定错误，仪器保持上一次标定结果。
⑤用蒸馏水清洗电极后即可对被测溶液进行测量。
3．测量pH值
经标定过的仪器，即可用来测量被测溶液，根据被测溶液与标定溶液温度是否相同，其测量步骤也有所不同。具体操作步骤如下:
(1)被测溶液与标定溶液温度相同:
①用蒸馏水清洗电极头部，再用被测溶液清洗一次。
②把电极浸入被测溶液中，用玻璃棒搅拌溶液，使其均匀，在显示屏上读出溶液的pH值。
(2)被测溶液和标定溶液温度不同:
①用蒸馏水清洗电极头部，再用被测溶液清洗一次。
②用温度计测出被测溶液的温度值。
③按“模式”按钮一次，使仪器进入溶液温度状态(此时℃温度单位指示灯闪亮)，按“△”键或“▽”键调节温度显示数值上升或下降，使温度显示值和被测溶液温度值一致，然后按“确认”键，仪器确定溶液温度后回到pH值测量状态。
④把电极插入被测溶液内，用玻璃棒搅拌均匀后，读出该溶液的pH值。
4．关闭仪器电源，清洗电极。
(四)离心机的使用
离心机是利用离心力对混合液进行分离和沉淀的一种专用仪器。初级阶段的离心机为手摇离心沉淀器，以后根据生产和科学实验的发展需要，发明了水流驱动离心机和蒸汽驱动离心机。1910年出现了小型电动离心机。1924年，制成了油涡轮驱动的分析型离心机。1927年发明了压缩空气驱动离心机。20世纪40年代后，美国开始正式出售各种型号离心机。从此，离心机的制造和应用越来越普及。如1948年由Ivan Sorvall先生创建的索福公司开始研究制造离心机，于1950年推出全球第1台高速冷冻离心机RC-1，以后发展了RC-2、RC-2B、RC-5、RC-5B PLUS和RC-5C PLUS。1963年首次推出低速大容量离心机RC-3系列。目前使用的离心机种类繁多，功能各异。一般分为低速离心机(6000 r/min以下)、高速离心机(25000 r/min以下)和超速离心机(25000 r/min以上)。
1．仪器特性:Eppendorf 5810R离心机是德国Eppendorf公司生产的台式高速大容量冷冻离心机，用户可直接输入转速、相对离心力和半径修正值，并在离心过程中改变参数值;转速从200r/min开始设定到最高转速，以10r/min递增;有可选择的程序记忆功能，最多可储存34个用户程序;对于敏感样品，有10个加速和10个刹车可选;在正常室温条件下和最高转速时，几乎有转子均可达到4℃(除转子F-34-6-38外);涵盖PCR排管、1．5/2．0 mL标准管、大容量的离心管/瓶和滤板系统;自动搜索转子特异性数据，转子自动识别功能防止超速离心。
2．仪器参数(附表11):
附表11 Eppendorf 5810R离心机的参数
3．仪器结构和功能(附图7和附表12):
附图7 Eppendorf5810R离心机的结构和面板
附表12 Eppendorf5810R面板功能
4．仪器使用简易指南(附表13):
附表13 Eppendorf 5810R仪器使用指南
5．装卸转子:
(1)装转子之前，用布擦拭转轴和转子上的离心管孔;
(2)将转子装到转轴上，并用厂家提供的扳手将转子上的螺帽顺时针方向拧紧;
(3)卸下转子时，用扳手将转子上的螺帽逆时针方向拧松;
(4)如果转子被腐蚀或有机械损伤，请勿使用。
6．预先设定转速和离心时间的常规离心:
(1)打开电源开关(位于机器的右侧)，液晶显示屏上显示上次离心的各项参数。对称地装上转子并放入预先经过对称重量平衡的样品，拧紧转子盖，关上离心机门盖，这时“Open”键上的灯会变绿。
(2)按
键激活速度设置，此时显示屏上的速度参数会闪动;
(3)按
或
键修改数值，新设定的数值会显示在显示屏上，如果使用的是rcf，请检查输入的转子半径(rad);
(4)重复按
，可以转换rpm、rcf和rad，如果是rcf，数值前会有一个“*”图标;(5)按
激活时间设置，时间参数闪动，用上下键修改数值;
(6)按
激活温度设置，用上下键修改温度数值(℃);
(7)按
开始运行，显示屏上有一“■”图标闪动;
(8)如果想正在运行时中止离心，按
键;
(9)在离心正在运行的过程中可以修改离心时间、温度、转速等参数。
(五)可调式微量移液器的使用
移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度。移液器的基本使用方法如下:
1．选择适当型号的微量移液器，各种型号的移液器各有其吸取体积范围，请依取用溶液体积取用适当的微量移液器。
2．设定体积:转动移液器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮，可降低取液量。在调整旋钮时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。
3．套上微量移液器头。吸取溶液时，尖端请先套上微量移液器头(tip，吸头)，千万不能用未套吸头的移液器去吸取液体。1000μl的使用蓝色微量移液器头，200μl的使用黄色微量移液器头，10μl的使用白色的微量移液器头。
4．吸取溶液:选择合适吸头放在移液器套筒上，稍加压力使之与套筒之间无空气间隙。把按钮压至第一停点，垂直握持加样器(附图8A)，使吸头浸入液面下3～5mm处(如浸入过深，液压会对吸液的精确度产生一定的影响)，然后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体(附图8B)。释放按钮不可太快，以免溶液冲入吸管柱内而腐蚀活塞。
5．放液:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到第一停点(附图8C)，停一两秒再把按钮压到第二停点以排出剩余液体(附图8D)。压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过。松开按钮，按吸头弹射器除去吸头。
附图8 移液器的使用方法
A—保持微量移液器垂直，将按钮压至第一段;B—微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮;C—保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢慢压下按钮至第一段;D—压至第二段把溶液完全释放出; E—释放按钮回原状。
【注意事项】
1．用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的，长期这样操作，会导致移液器中的零部件因强烈撞击而松散，甚至会导致调节刻度的旋钮卡住(附图9)。
附图9 移液器吸头的安装方法
2．当装上一个新吸头时，先吸入一次液体并将之排回原容器中。当我们安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使整个移液过程具有极高的重现性。其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性液体会在套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让套筒室内的气体达到饱和。负压就会自动消失。
3．卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。
4．使用完毕，可以将移液器竖起挂在移液枪架上，但小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
5．如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
6．勿将微量移液器本体浸入溶液中。
7．吸取黏度高之试液时，请先将微量移液器头尖端以刀片或剪刀将出口切大，并先行预润后再吸取。
8．取酸液或具腐蚀性溶液后，请将微量移液器拆解开，各部位零件以蒸馏水冲洗干净，擦干后再正确组合恢复原状。
9．最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或60%的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。
10．微量移液器的任何部分切勿用火烧烤，亦不可吸取温度高于70℃的溶液，避免蒸汽侵入腐蚀活塞。
11．套有微量移液器头的微量移液器，无论微量移液器头中是否有溶液，均不可平放，需直立架好。
12．若不小心使溶液进入吸管柱内时，应予以拆解，将活塞组件、吸管柱、O-ring、铁氟龙垫等各部位以清水冲洗干净后，再以酒精擦拭，擦干后再正确组合恢复原状。
13．定期自行以天平检查准确度，若有任何问题请送厂维修。校准可以在20～25℃环境中，通过重复几次称量蒸馏水的方法来进行。这是一种对移液器进行快速检查的简单方法，通过检查，可判断移液器是否处于正常的工作状态。
14．使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直几秒钟，看看液面是否下降。如果漏液，原因大致有以下几方面:枪头是否匹配;弹簧活塞是否正常;如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此)，则可能是饱和蒸汽压的问题，可以先吸放几次液体，然后再移液。
七 生物化学实验常用数据及参数
(一)硫酸铵饱和度的计算表
附表14 调整硫酸铵溶液饱和度的计算表(25℃)
*指在25℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
附表16 不同温度下的饱和硫酸铵溶液
(二)常用酸、碱的密度和浓度(附表17)
附表17 常用酸、碱的密度和浓度
(三)氨基酸的主要参数(附表18)
附表18 氨基酸的主要参数
(四)常用蛋白质相对分子质量标准参照物(附表19)
附表19 常用蛋白质相对分子质量标准参照物
(五)核酸、蛋白质换算数据
1．质量换算:1μg=10－6g 1 ng=10－9g 1 pg=10－12g
1 fg=10－15g
2．分光光度换算:
1A260双链DNA=50μg/ml 1A260单链DNA=33μg/ml
1A260单链RNA=40μg/ml
3．DNA的摩尔换算:
1μg 1000 bp DNA=1．52pmol=3．03pmol末端
1μg pBR322 DNA=0．36 pmol
1 pmol 1000 bp DNA=0．66μg
1 pmol pBR322 DNA=2．8μg
1 kb双链DNA(钠盐)=6．6×105U
1 kb单链DNA(钠盐)=3．3×105U
1 kb单链RNA(钠盐)=3．4×105U
脱氧核糖核苷的平均相对分子质量=3245U
4．蛋白质摩尔换算:
100 pmol相对分子质量1000000蛋白质=10μg;
100 pmol相对分子质量50000蛋白质=5μg
100 pmol相对分子质量10000蛋白质=1μg;
氨基酸的平均相对分子质量=126．7U
5．蛋白质/DNA换算:
1 kb DNA=333个氨基酸编码容量=3．7×104MW蛋白质;
10000 MW蛋白质=270 bp DNA;
30000 MW蛋白质=810 bp DNA;
50000 MW蛋白质=1．35 kb DNA;
100000 MW蛋白质=2．7 kb DNA。
八 缓冲液的配制
由一定物质所组成的溶液，在加入少量的酸或碱时，其氢离子浓度改变甚微或几乎不改变，此溶液称为缓冲溶液，这种作用称为缓冲作用。其溶液内所含物质称为缓冲剂。缓冲剂的组成，多为弱酸及这种弱酸与强碱所组成的盐，或弱碱及这种弱碱与强酸所组成的盐，调节两者的比例可以配制成各种pH值的缓冲液。
(一)常用缓冲溶液的配制
储存液和缓冲液应该用去除CO2的蒸馏水配制，附表20～附表27为常用缓冲溶液的配制表。
附表20 磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液(0．2mol/L)
Na2HPO4·2H2O相对分子质量178．05;0．2mol/L溶液含35．61g/L。
Na2HPO4·12H2O相对分子质量358．22;0．2mol/L溶液含71．64g/L。
NaH2PO4·H2O相对分子质量138．01;0．2mol/L溶液含27．601g/L。
NaH2PO4·2H2O相对分子质量156．03;0．2mol/L溶液含31．211g/L。
附表21 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15mol/L)
Na2HPO4·2H2O相对分子质量=178．05;1/15mol/L溶液含11．876 g/L。
KH2PO4相对分子质量=136．09;1/15mol/L溶液含9．078 g/L。
附表22 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
Na2HPO4Mr=141．98，0．2mol/L溶液为28．40g/L;Na2HPO4·2H2OMr= 178．05，0．2 mol/L溶液为35．61g/L，C6H8O7·H2OMr=210．14，0．1 mol/L溶液为21．01 g/L。
附表23 Tris-盐酸缓冲液(0．05mol/L，25℃)
50 ml0．1 mol/L Tris溶液与xml0．1mol/L盐酸混匀后，加水稀释到100 ml
Tris［三羟甲基氨基甲烷］，(CH2OH)3CNH2Mr=121．14，0．1 mol/L溶液为
12．114 g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
附表24 巴比妥盐-盐酸缓冲液(18℃)
巴比妥钠Mr=206．18，0．04 mol/L溶液为8．25g/L。
附表25 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
*使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH值有变化，用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，置冰箱保存。
附表26柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0．1mol/L)
柠檬酸C6H8O7·H2O，Mr=210．14，0．1mol/L溶液为21．0lg/L;柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O，Mr=294．12，0．1mol/L溶液为29．4lg/L。
附表27 醋酸-醋酸钠缓冲液
NaAc·3H2O相对分子质量136．09;0．2mol溶液含27．22g/L
(二)酸度计用的标准缓冲液的配制
酸度计用的标准缓冲液要求有较大的稳定性，较小的温度依赖性，其试剂易于提纯。常用标准缓冲液(表)的配制方法如下:
1．pH=4(10～20℃):将邻苯二甲酸氢钾在105℃干燥1小时后，称取5．07 g加重蒸水溶解至500 ml。
2．pH=6．88(20℃):取在130℃干燥2小时的3．40l g磷酸二氢钾(KH2PO4)，8．95 g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)或3．549 g无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)，加重蒸水溶解至500 ml。
3．pH=9．18(25℃):取3．8144 g四硼酸钠(Na2B4O4·10H2O)或2．02 g无水四硼酸钠(Na2B4O7)，加重蒸水溶解至100 ml。
九 常用酸碱指示剂(附表28)
附表28 常用酸碱指示剂
续表
指示剂通常用0．1 mol/L NaOH或0．1 mol/L HCl调节至中间色调。
十 层析技术有关介质性质及数据
(一)离子交换纤维素(附表29)
附表29 常见离子交换剂的活性基团
续表
(二)常见离子交换树脂的有关性质(附表30)
附表30 常见离子交换树脂的性质
续表
(三)葡聚糖凝胶的有关技术数据(附表31)
附表31 葡聚糖凝胶的技术数据
(四)聚丙烯酰胺凝胶的有关技术数据(附表32)
附表32 聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在不和缓冲溶液中很容易膨胀。生产厂家为Bio-Rad Laboratories，Richmond，California，USA．
(五)琼脂糖凝胶的有关技术数据(附表33)
附表33 琼脂糖凝胶的技术数据
续表
琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0～40℃，pH4～9范围内是稳定的。
(六)各种凝胶所允许的最大操作压(附表34)
附表34 各种凝胶所允许的最大操作压
