项目十七　抗凝血药物的体外抗凝血作用

实验目的

观察抗凝血药物的体外抗凝血作用。

实验材料

动物：家兔。

器材：试管，试管架，移液管（1mL），恒温水浴锅，注射器（1mL、5mL），针头，记号笔，秒表等。

药品：4%枸橼酸钠溶液，10U／mL肝素溶液，3%氯化钙溶液，0．5%双香豆素混悬液，生理盐水等。

实验步骤

1．试管标记并加药

取清洁、干燥试管4支标记，并分别加入0．1mL的生理盐水、10U／mL肝素溶液、4%枸橼酸钠溶液和0．5%双香豆素混悬液。

2．取血准备

用9号注射针头从家兔心脏穿刺取血约5mL，并迅速向每支试管中加入兔血0．9mL，充分混匀。（取血方法也可采用颈总动脉取血法：取家兔1只，耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠1mL／kg，麻醉后固定于兔手术台上，颈部正中切口，分离出一侧颈总动脉，结扎远心端，近心端用动脉夹阻断血流后沿向心方向插入一细塑料管或动脉套管，结扎插管，松开动脉夹即可取血。）

3．加血样并观察

迅速将血样分别向上述试管中各加入0．9mL，充分混匀后即刻（尽量同时）放入恒温水浴锅中（37．5℃），记录时间。然后，每隔30s将试管轻轻倾斜，观察一次血液的流动性，直至将试管缓慢倒置至血流不动为止，比较4支试管的凝血时间。

4．加入氯化钙

在未凝固的试管中加入3%氯化钙溶液0．1mL，混匀后依上述方法继续观察凝血时间并记录。

实验结果

将记录结果填入表2－17－1中。

表2－17－1　药物的体外抗凝作用比较

注意事项

（1）试管口径应大小均匀适当，一般试管口径越小血液凝固时间越短，试管口径越大凝血时间越长；此外，试管和注射器均需保持干燥和洁净，否则会加速凝血或发生溶血而影响药物的作用。

（2）家兔心脏穿刺采血时要迅速、准确，以避免血液在注射器内凝固，并尽量减少杂质和气泡的混入。

（3）从实验动物取血到试管放入恒温水浴锅的间隔时间应尽量短，并且水浴温度一定要控制好，水浴温度过高或过低均可导致凝血时间延长。

（4）在倾斜试管时，动作要轻，倾斜度尽量小，以减少血液与管壁的接触。

讨论

根据以上结果比较肝素、双香豆素及枸橼酸钠的抗凝血作用特点及作用机制有何不同。

李　申