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医学寄生虫学
1.8.3 第二十二章 粪便内蠕虫及其虫卵的固定与保存

第二十二章 粪便内蠕虫及其虫卵的固定与保存

一、粪便内蠕虫的固定与保存

(一)吸虫

首先用清水洗去虫体上黏附的污物,再置生理盐水中。固定前应将虫体压平,或用薄荷脑酒精(薄荷脑24g,95%酒精10ml)麻醉虫体,使虫体组织松弛自然死亡后再固定。大型吸虫固定时将虫体夹于两张载玻片之间,平放于容器内,待虫体压扁至适当厚度后浸入10%福尔马林溶液,以浸没载玻片为宜。固定2~3天,此间应掀开玻片数次,使固定液浸入虫体,之后保存于5%福尔马林溶液中。血吸虫等细长柔软的虫体应置于载玻片上,加一滴鲍氏液,立即覆上盖玻片,再由盖玻片边缘加足固定液过夜。随后将玻片浸泡于清水中,待玻片分开将虫体依次置于30%、40%、50%、60%酒精溶液中各30分钟,然后保存于70%酒精溶液中。吸虫标本也可直接用70%酒精固定,时间为0.5~3小时,视虫体大小而定,固定后仍保存于70%酒精溶液中。

(二)绦虫

小型绦虫如短膜壳绦虫,可按吸虫固定法处理。大型绦虫如猪、牛带绦虫,用清水洗去其体表的污物,再浸泡于清水中8~12小时或更长时间,待虫体完全伸展后,将虫体置于5%福尔马林溶液中,或将其缠绕于玻板或玻璃圆筒上,再加入5%福尔马林溶液。固定1~2天后,保存于5%的福尔马林溶液中。绦虫头节应在清水中浸泡充分松弛,置于载玻片上,摆好姿势,再覆以载玻片,用线扎牢,投入5%福尔马林溶液中固定,24小时后取出头节,保存在5%福尔马林溶液中。囊尾蚴、裂头蚴等从组织中剥离后应立即或待虫体伸展后置于5%福尔马林溶液中固定与保存。也可将囊尾蚴头节翻出后固定。如制作玻片标本,则将虫体夹于两张载玻片之间,浸于70%酒精中固定1~2天,保存于70%酒精中。棘球蚴砂可从棘球蚴中抽出囊液而获得,离心沉淀后,将沉渣固定保存于5%福尔马林溶液中。

(三)线虫与棘头虫

采集到的线虫应立即用生理盐水或2%盐水振荡洗净后固定。水洗时间不宜过长,否则线虫体表皮在水中易膨胀而裂开。洗净后的虫体用加热至60℃~80℃的70%酒精、巴氏液、5%福尔马林溶液固定,待虫体自行伸直冷却后保存于70%酒精、巴氏液、5%福尔马林溶液中。为防止虫体破裂,可于固定液中加少许氯化钠。小型线虫宜用甘油酒精(甘油5ml,70%酒精95ml)加热固定,保存于70%酒精中,也可用冰乙酸固定约半小时后移入70%酒精或甘油酒精中保存。微丝蚴可制成玻片染色标本封片保存。

二、粪便内蠕虫卵的固定与保存

将经水洗沉淀后的含卵粪便沉渣,倒入盛有10%福尔马林溶液的广口瓶内固定,并可长期保存于此液中。为避免蛔虫受精卵等在固定液中发育和变性,应在加热至70℃的5%~10%福尔马林溶液中固定为宜。冷却后,再加入少量甘油(具有透明作用),便于实验教学使用。

三、粪便内原虫的固定与保存

(一)包囊

将含包囊较多的粪便,用5%福尔马林溶液调成混悬液,经60~80目/吋铜筛过滤于量杯内,静置3~4小时,倾去上层液,再换至5%福尔马林溶液中保存。也可将粪便经水洗沉淀后,在沉渣中加等量或多一倍的5%福尔马林溶液(加热至90℃),摇匀,瓶口密封保存。

(二)滋养体

常采用汞碘醛液保存法。取粪便1g加10m l汞碘醛液,充分搅拌混合均匀,瓶口密封。此法也适用于包囊的固定和保存。