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医学寄生虫学
1.8.2 第二十一章 寄生虫标本常用固定液和保存液

第二十一章 寄生虫标本常用固定液和保存液

一、福尔马林

含37%~40%甲醛的液体称为福尔马林,5%~10%福尔马林溶液(10份40%甲醛加90份蒸馏水即为10%福尔马林溶液)是最为常用的寄生虫标本固定保存液。如用生理盐水或磷酸缓冲液配制,则效果会更好。福尔马林溶液穿透力强,固定后标本中的细胞核着色甚好。小型寄生虫和小块组织,浸入5%~10%福尔马林溶液中数小时即可被固定好;但大型虫体和大块组织的固定,则需要1~2天才能完成。

二、乙醇

乙醇(酒精)具有固定、保存和脱水作用。但由于吸收水分,易使标本收缩,使标本表面变硬,不易渗入组织深部,故不宜固定大块标本。固定和保存标本时,常使用70%~75%的酒精溶液。

三、甲醇

固定作用与乙醇相似。常用于固定血液、组织等涂片或印片标本。固定时间一般为1~3分钟,但固定薄血膜仅需几秒钟。甲醇固定的标本可直接染色。

四、乙酸

纯乙酸(醋酸)在16.7℃以下就可凝结成冰块状固体,故又名冰醋酸。固定标本速度快(1小时),因其能沉淀核蛋白,所以是很好的染色质固定剂,对染色体的固定保存效果尤佳。

五、升汞(氯化汞)

采用升汞(氯化汞)固定保存标本时,常用其饱和溶液(7.5%~8%升汞溶液)或接近饱和的溶液(5%升汞溶液)。它能充分地固定细胞质和细胞核,具有助染作用,可增强细胞对酸性染料的亲和力,使标本能较好地被伊红苏木精等染料着色。适用于固定小型虫体。

六、鲍氏(Bouin)液

苦味酸饱和溶液(将1g苦味酸晶体溶于75ml蒸馏水中,配时应先将苦味酸溶于水中,以防爆炸)75份,福尔马林25份,冰醋酸5份。因苦味酸为氧化剂,故宜在临用时配制,不宜久藏。此液渗透力强,适于固定任何种类和不同大小的标本。小型虫体固定4~16小时,较大者固定12~24小时。此外,它有助染作用,所以固定后的标本在染色前需用70%的酒精浸洗10小时以上,以脱去黄色的苦味酸。

七、聚乙烯醇

聚乙烯醇(PVA)的配制:95%酒精62.5ml,升汞饱和液125ml,冰醋酸10ml,甘油3ml,混合后加入聚乙烯醇粉10g。不必搅拌,塞紧瓶盖过夜,然后缓缓加热至75℃,并搅拌成乳状匀浆,通常只需30秒。本液适用于固定粪便中的原虫滋养体、包囊及部分蠕虫卵。

八、肖氏固定液

肖氏(Schaudin's)固定液的配制:饱和氯化高汞水溶液66ml,95%酒精33ml,冰乙酸5ml。适用于固定肠道原虫。