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医学寄生虫学
1.7.3.1 第一节 DNA探针技术

第一节 DNA探针技术

DNA探针(DNA probe)技术又称核酸分子杂交技术。目前,在寄生虫学领域的应用主要有两个方面:①利用特异性探针进行种、株鉴定等分类学研究。②用于寄生虫病的诊断及流行病学研究。该探针可检出0.01~0.1ng疟原虫DNA;采用PCR扩增kDNA后,可检出0.1pg杜氏利什曼原虫DNA;斑点杂交弓形虫病诊断技术为弓形虫病检测提供了特异、敏感和快速的新方法。从曼氏血吸虫基因文库中筛选到的重复DNA序列探针具有种的特异性,用于诊断和流行病学调查均已取得初步结果。采用NC膜斑点杂交,敏感度可达1条马来微丝蚴DNA量水平。溶组织内阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫重组克隆DNA探针均具有种特异性,后者可检测病人粪便中105个滋养体或104个包囊,或纯化10ngDNA。细粒棘球绦虫、旋毛虫和并殖吸虫等DNA克隆探针,均具有高度特异性与敏感性。由于DNA探针直接检测DNA片段,客观上不像检测抗体和抗原那样受宿主及寄生虫各发育阶段抗原变异的影响,比免疫血清学方法可靠、稳定,所以日益受到重视。