第四节　活组织检查

一、注意事项

1.寄生在组织内的寄生虫种类很多，应从寄生部位取材检查。

2.根据虫体的形态特点，在必要时应作染色镜检。

二、皮肤及皮下包块检查

(一)皮下包块或皮肤结节检查

1.囊尾蚴、裂头蚴和并殖吸虫童虫检查。

通过手术取出结节或包块，剥去虫体外的纤维被膜，根据虫体形态特征鉴定。必要时，可经压片、固定、染色后镜检;也可作组织切片检查。

2.皮肤型黑热病病原体(利杜体)检查。

选择皮肤结节或丘疹等皮损部位，局部消毒;用干燥灭菌注射器刺破皮损处，抽取组织液作涂片。或用无菌手术刀将损部切一小口，刮取皮肤组织作涂片，作瑞氏或吉姆萨染色镜检。还可手术切除丘疹或结节作切片，作染色、镜检。

(二)疥螨检查

1.针挑法。

用消毒注射器针头，沿“隧道”从外向内挑破皮肤。在“隧道”中可找到疥螨卵;在“隧道”末端还可检获疥螨成虫，用针挑出后置载玻片上，加1滴甘油或乳酸，加盖玻片镜检。亦可用解剖镜直接检查皮损部位，直接用手术刀片尖部挑出疥螨镜检。

2.刮片法。

用消毒刀片刮破血痂或丘疹，将刮出物按针挑法处理，可查到疥螨和卵。刮检丘疹应是新发未经搔抓、无结痂的炎性丘疹。

(三)蠕形螨检查

1.挤压涂片法。

用痤疮压迫器或用手挤压皮损部位，将挤出物用消毒刀片轻轻刮下，涂于载玻片上并加1滴甘油，加盖玻片后轻压，使挤出物均匀摊平，置镜下检查。

2.透明胶纸粘贴法。

取长约5～6cm的透明胶纸，睡前贴于患处皮肤，次日晨揭下胶纸贴在载玻片上，镜检。此法无痛、简便，易被患者接受，检出率高，并可定量计数，具有一定的治疗作用。

三、肌肉组织检查

在肌肉内可查见猪囊尾蚴、裂头蚴、并殖吸虫等，手术摘除肌内肿物后，以下述方法(基本同皮肤组织检查法)检查。在肌肉组织中还可检获旋毛虫囊包蚴，具体检查方法如下。

(一)压片法

【操作方法】

用手术方法在腓肠肌、肱二头肌或肱三头肌近肌腱处，取米粒大小肌肉组织1块置载玻片上，加50%甘油1滴，再加盖玻片，用力压紧或边压边用尼龙线扎紧载玻片两端，镜检。如观察幼龄囊包蚴需作美蓝(0.5ml饱和美蓝酒精溶液，加10ml蒸馏水)染色，镜检。

【注意事项】

摘取的肌肉必须立即进行检查，否则幼虫会变得模糊不清而不易观察。但刚形成的囊包蚴可能看不清，须染色镜检。

(二)人工消化法

将摘取的肌肉组织剪碎，加入人工消化液(胃蛋白酶2.5g、盐酸0.4ml、蒸馏水100ml)，置37℃温箱内并不时搅拌，取沉渣镜检。

(三)切片法

取肌肉组织直接作组织切片检查。

四、淋巴结检查

(一)丝虫检查

1.抽取法。

消毒患处皮肤，用灭菌10ml注射器刺入可疑的淋巴结深部，抽吸或边退针边吸，抽出的成虫放入固定透明液(10%福尔马林15ml、甘油20ml、冰乙酸5ml、95%酒精24ml、蒸馏水36ml)中保存，备检。

2.解剖法。

手术摘除病变的淋巴结及淋巴管，置于装有生理盐水的平皿内，用肉眼或在解剖镜下用解剖针小心剥离、撕碎组织，即可检获成虫。然后，将获得的虫体置于上述保存液中观察、鉴定。

3.切片法。

将手术摘除的可疑结节作组织切片检查。在丝虫结节中可见中心已钙化或有新鲜成虫，其周围为典型的丝虫病性改变。

(二)杜氏利什曼原虫和弓形虫检查

1.穿刺法。

消毒皮肤，用干燥灭菌的注射器刺入淋巴结，抽取淋巴组织液作涂片，作瑞氏或吉姆萨染色镜检。阳性率为46%～87%。

2.涂片法。

将手术摘除的淋巴结，用刀片切开，将切面在干净的载玻片上涂成薄膜。涂抹时只能一个方向，也不能重叠，经瑞氏或吉姆萨染剂染色、镜检。

3.切片法。

将手术摘除的淋巴结作组织切片检查。

五、结肠黏膜检查

(一)血吸虫卵检查

从病变部位钳取米粒大小的肠黏膜1块，水洗后置2张载玻片间，作压片检查。肠黏膜内虫卵死活及变性程度的鉴别，可作为粪便检查和体检的辅助诊断，以提高检出率。如有活卵或近期变性卵，表明受检者体内有寄生虫;若是远期变性卵或死卵(钙化卵)，则表明受检者曾有过血吸虫感染，但现在可能已无成虫寄生。死、活血吸虫卵的鉴别多用以下几种方法。

1.未染色血吸虫卵的鉴别。

在新鲜肠黏膜压片中，血吸虫活卵呈淡黄色，卵壳薄，胚膜清楚，卵内含卵黄细胞、胚团或毛蚴;近期变性卵呈黄色，壳薄或不均匀，胚膜清楚，内含浅灰色或黑色小点或折光均匀的颗粒或萎缩的毛蚴;死卵呈灰褐或黄褐色，壳厚而不均匀，胚膜不清楚，卵内含网状结构或块状物，其两极可有密集的黑点。

2.染色血吸虫卵的鉴别。

(1)氯化三苯基四氮唑(TTC)—茚三酮复染法。

血吸虫活卵含琥珀酸脱氢酶，而死卵中该酶的活力已消失。因此，用反映酶活力的试剂TTC与之产生蓝紫色化学物质，来鉴别虫卵死活或变性程度:近期变性卵含有少量蛋白质，故颜色很浅;而远期变性卵不含蛋白质，故不着色。染色方法:将含虫卵的肠黏膜片置于含有0.2%TTC液、2.7%琥珀酸钠溶液和0.1mol/L pH7.6磷酸缓冲液各3滴的小试管中，置37℃温箱内，45～90分钟后吸去染液，滴加0.2%茚三酮溶液数滴，置50℃水浴中20～30分钟。取出组织片摊平在载玻片上，滴加1∶1二甲苯和无水乙醇混合液，待肉眼看不见红色为止。再滴加95%乙醇以除去残留的二甲苯，待组织稍干后，加1滴20%甘油，加盖玻片，镜检。结果判定:活卵可见紫红色、紫色至蓝紫色晶体颗粒或晶体;近期变性卵呈深蓝灰色;远期变性卵不着色。

(2)吖啶橙染色法。

活卵中的核糖核酸能与吖啶橙结合，在激发荧光下，显示红色荧光，故此光可作为虫卵具有活性的标志。从而鉴别虫卵的死活。染色方法:将含有虫卵的肠黏膜片置于离心管中，加入0.5～1.0ml1∶10 000吖啶橙染液(先以pH7.2磷酸缓冲液配成1∶500吖啶橙原液，保存于4℃冰箱内，临用时再用台氏液稀释至所需浓度)。振荡后置37℃下染色2小时。然后用磷酸缓冲液离心洗涤1～2次，将组织片摊平在载玻片上，加盖玻片，在荧光显微镜下镜检。结果判定:活卵呈橘红色或红绿色;近期变性卵淡黄色，卵内尚有模糊的红色头腺;远期变性卵淡橙黄色、黄绿色、蓝色或绿色颗粒中嵌有橙黄色颗粒。本法对虫卵死活有一定的参考价值。但必须备荧光显微镜和荧光光源，所以使用受到限制。

(二)溶组织内阿米巴检查

在直肠及其临近的结肠病变处，从溃疡边缘或深层刮取病变组织，作生理盐水涂片或压片检查。必要时，还可作活组织切片检查。在阳性标本内，可查见溶组织内阿米巴大滋养体。但滋养体无色透明，如不染色，则须在保温条件下检查，以便于确认活动的滋养体。

六、肝组织检查

在肝脏活组织中，可查见血吸虫卵、杜氏利什曼原虫、溶组织内阿米巴大滋养体及蠕虫幼虫等，故可通过肝穿刺、取活组织，或手术切取一小块肝组织，作涂片、印片、压片或切片检查。

七、肺组织检查

在肺脏活组织中，可查见肺吸虫成虫、卡氏肺孢子虫、溶组织内阿米巴大滋养体、棘球蚴等。一般可通过手术切取肺组织，作涂片、印片、压片或切片检查，以明确诊断。