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医学寄生虫学
1.7.1.3 第三节 痰及其他分泌物检查

第三节 痰及其他分泌物检查

一、注意事项

1.根据寄生虫的寄生部位不同、排离方式不同,采用不同的检测方法。

2.标本要新鲜。

3.根据部分虫种的生活特性,检查标本时应注意保温。

二、痰液检查

痰中可能查见肺吸虫卵、溶组织内阿米巴滋养体、细粒棘球蚴的原头节或小钩以及粪类圆线虫幼虫、蛔蚴、钩蚴、尘螨、粉螨、虫卵。卡氏肺孢子虫的包囊也可出现于痰中,但检出率很低。

嘱病人早上起床后,用力咳出气管深部的痰液,不应混有唾液,置于洁净的容器内送检。如痰不易咳出,可让患者吸入水蒸气数分钟,以利于痰液咳出。

(一)吸虫卵检查

1.直接涂片法。

【操作方法】

滴1~2滴生理盐水于洁净的载玻片上,挑取少许痰液,最好选带脓血的部分,涂匀后加盖玻片镜检。如未发现肺吸虫卵,但在痰液中见到较多的嗜酸性粒细胞和夏科雷登氏晶体,提示很可能有肺吸虫感染,应再多次涂片,仔细查找虫卵,或改用浓集法,以提高检出率。

【注意事项】

送检标本应为咳出的痰液。

2.消化离心沉淀法。

【操作方法】

嘱病人留取清晨或24小时痰液于清洁容器中,加等量10%氢氧化钠,充分搅拌后置37℃温箱或水浴箱内,经2小时消化成稀液状,分装于离心管中,以1 500r/min离心5~10分钟,吸沉渣作涂片检查,此法检出率较高。如虫卵需计数,则计量24小时痰液,从经消化、摇匀的稀液中吸取0.1ml,作涂片计数虫卵数,乘以20,再乘以24小时痰液量,即为痰内所含虫卵数。

【注意事项】

在不能排除呼吸道其他感染时,须戴口罩。

(二)溶组织内阿米巴大滋养体检查

采用生理盐水直接涂片法,检查时盛痰容器应干燥、无药品,痰液要新鲜,最好立即检查,室温低时,注意保温,使用有恒温装置的显微镜效果更好。高倍镜下可见滋养体作伪足运动,容易与痰中上皮细胞、白细胞、脓细胞等鉴别。因未染色滋养体是无色透明的,故死后很难识别。

(三)棘球蚴砂、钩蚴、蛔蚴、粪类圆线虫幼虫、尘螨、粉螨及螨卵检查

常采用消化沉淀法检查,基本要求与肺吸虫卵的检查相同。

三、支气管肺泡灌洗物检查

按常规方法用纤维支气管镜收取灌洗液40~50ml,3 000r/min离心10分钟,取沉渣涂片染色。此法检出率在85%以上,是诊断卡氏肺孢子虫病的一种安全、快速、高效的检查方法。

(一)吉姆萨染色法

【操作方法】

将涂片标本用甲醇固定3分钟,干后滴加1∶20吉姆萨染液染20~30分钟,流水冲洗,吹干,先后在高倍镜及油镜下检查。若为阳性,则可见包囊的囊内小体染成紫红色,多排列成一圈或呈团状。

【注意事项】

气温低时,应适当延长染色时间。

(二)果氏六亚甲基四胺银染色法

此亦为检查卡氏肺孢子虫包囊的一种方法。

【操作方法】

先将涂片置甲醇内固定3分钟,5%铬酸酸化1小时,流水洗数秒;1%酸性硫酸钠中1分钟,流水洗5~10分钟,蒸馏水中洗3~4次。然后置四胺银工作液中,58℃~60℃烤箱中染30~90分钟,至标本呈黄褐色,在蒸馏水中荡洗5分钟(换水5~6次)。再置入0.1%氯化金中2~5分钟,蒸馏水洗数次;2%硫代硫酸钠中5分钟,流水轻轻冲洗至少10分钟,吹干后镜检。在镜下,包囊呈棕色或褐色,呈圆形、椭圆形或月牙形,部分包囊可见括弧样结构,此为卡氏肺孢子虫的特征性标志。

【注意事项】

镜检时,应留心与其他类似物(无特征性结构)相鉴别。

四、尿液及鞘膜积液检查

尿液中寄生虫主要有阴道毛滴虫和丝虫微丝蚴,螨类、棘球蚴砂、弓形虫等则很少见。常用的检查方法为离心沉淀法:取尿液3~5m l,置于离心管内,以2 000r/min离心3~5分钟,吸沉渣涂片检查。从乳糜尿中检查微丝蚴时,在离心管中加与乳糜尿等量的乙醚,用力振荡使脂肪溶解;然后吸去上层脂肪,加10倍蒸馏水,以2 000r/min离心3~5分钟,取沉渣镜检。若乳糜尿中蛋白质含量高,不易沉淀,可先加抗凝剂,再加水稀释,经离心沉淀后,取沉渣镜检。检查弓形虫时,以2 500r/min离心10分钟,取沉渣作涂片,干后以甲醇固定,再用瑞氏或吉姆萨染色法镜检。

鞘膜积液检查主要是寻找班氏丝虫微丝蚴。阴囊皮肤经消毒及局部麻醉后,用注射器抽取积液,如抽出乳糜液,则参照乳糜尿检查方法处理;若抽出液呈胶状,可加抗凝剂后再加水稀释、离心沉淀,取沉渣作涂片或涂片染色镜检。

五、阴道分泌物检查

主要用于检查阴道毛滴虫,偶尔可查到雌蛲虫或蛲虫卵。

(一)悬滴法

用消毒的棉拭子于阴道后穹隆、子宫颈及阴道壁拭取分泌物,置含有1~2ml温暖生理盐水的小试管内送检。检查时,取一洁净盖玻片,并在其周缘涂一薄层凡士林,然后用棉拭子蘸取管内液体1滴,加在盖玻片中央。翻转盖玻片,并将其覆盖在一凹玻片孔上,稍稍加压,使两片黏合,再行镜检。室温较低时,最好在装有保温设备的显微镜下或在空调室内进行检查。

(二)生理盐水直接涂片法

将1~2滴生理盐水滴在洁净的载玻片上,再将棉拭子拭取的分泌物置于生理盐水中(向一个方向,勿来回或重叠涂抹)制成涂片。亦可将拭取阴道分泌物的棉拭子,在盛有生理盐水的离心管中荡洗;然后,2 000r/min离心2~3分钟,吸沉渣作涂片染色(瑞氏或吉姆萨)检查。室温较低时,可将载玻片在酒精灯火焰上迅速来回数次,略加温后在镜下观察活动的滋养体,以提高检出效果。

六、前列腺液检查

前列腺液检查主要用于阴道毛滴虫的检查。

【操作方法】

在取前列腺液作检查之前,可先用指腹从前列腺两侧(各按摩两三次)慢慢地压向中间沟,以便将前列腺液挤入后尿道;再由膀胱颈压向后尿道,并推过外括约肌,前列腺液即可从尿道口排出。

【注意事项】

作前列腺直肠指检时,应嘱患者排空膀胱。

七、十二指肠液检查

用于检查十二指肠引流物和肝、胆系统内寄生虫病原体,如蓝氏贾第鞭毛虫、华支睾吸虫卵及肝片形吸虫卵等。有时也可发现蛔虫卵、姜片虫卵、粪类圆线虫成虫或幼虫。在急性阿米巴肝脓肿患者的胆汁中,还可发现溶组织内阿米巴大滋养体。本法一般用于多次粪检阴性而临床症状可疑者。

(一)十二指肠引流物检查

从送检的4管十二指肠引流液(甲管为胆总管液,乙管为胆囊液,丙管为肝胆管液,丁管为十二指肠液)标本中,用吸管从底部吸出少许引流物,滴于载玻片上,加盖玻片镜检。抑或将各部分引流液加生理盐水稀释,充分搅拌后分装离心管内,以2 000r/min离心5~10分钟,吸沉渣作涂片镜检。如果引流液过于黏稠,可加10%氢氧化钠消化后离心沉淀。在检查肝胆系统寄生虫感染时,一般认为以检查乙液的效果为好。

在引流液中,蓝氏贾第鞭毛虫滋养体常附着在黏液小块上,间或虫体聚集成小絮片状物。肝片形吸虫卵和姜片吸虫卵不易鉴别,但前者可出现在胆汁中,而后者只见于十二指肠液(丁管)中。当蛔虫侵入胆管时,则可在胆汁中检查到蛔虫卵。

(二)肠检胶囊法

嘱患者禁食,次晨缓缓吞下装有尼龙线的胶囊,并将线的游离端固定在口外侧皮肤上(可用胶布贴牢)。吞下的胶囊在十二指肠内溶解,因而尼龙线散出;经3~8小时(或过夜),含蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的肠液即黏附在线上。将线缓缓拉出,用戴有塑料(或胶皮)手套(或指套)的手指,将线上的黏液捋在载玻片上;也可将尼龙线置盛有生理盐水的离心管内洗下线上的肠液,经离心后取沉淀物作涂片、镜检。本法为十二指肠引流术的替代方法,较为简便。

八、口腔内物检查

用于检查口腔内寄生原虫,如齿龈内阿米巴和口腔毛滴虫等。以干净的牙签在齿龈、齿龈炎症部位或正常牙齿缝隙间,刮取牙垢作生理盐水涂片、镜检。室温较低时,可稍稍加温,以便观察虫体活动情况。必要时,亦可作涂片,用苏木精染色法镜检,作进一步鉴定。

在口腔黏膜或黏膜下,偶尔可查到美丽筒线虫,这时可用针挑破虫体寄生部位的黏膜,取出虫体镜检。

九、脑脊液检查

虽然多种寄生虫可寄生于脑组织内,但只有当虫体进入脑室系统或蛛网膜下腔时,才可能出现于脑脊液内。可在脑脊液中查见的寄生虫有溶组织内阿米巴和致病性自生生活阿米巴滋养体、肺吸虫卵、棘球蚴砂,也可能查获血吸虫卵、弓形虫滋养体以及广州管圆线虫和粪类圆线虫的幼虫等,但检出率通常都很低。

【操作方法】

检查时可取抽出2~3ml脑脊液,置离心管内以2 000r/min离心5~10分钟,然后吸取沉渣作直接涂片或涂片染色、镜检。

【注意事项】

弓形虫脑膜炎患者脑脊液中细胞增多,但主要是单核细胞。如检查阿米巴滋养体,脑脊液不必离心沉淀,以免因虫体活动力降低,不易辨认;应待自然沉淀后,取沉渣作涂片镜检,并注意保温。