第五节 隐孢子虫
隐孢子虫[Cryptosporidium(Tyzzer,1907)]广泛寄生于哺乳动物、鸟类、爬行类及鱼类的胃肠道上皮细胞的刷状缘,是一种机会致病寄生虫,也是一种重要的腹泻病原,1982年被确认为HIV感染者、儿童和老年人腹泻的重要病因之一,已逐渐引起人们的注意。
【形态】
隐孢子虫在生活史中包括无性生殖(裂体增殖、孢子增殖)和有性生殖(配子生殖)阶段。经过子孢子、滋养体、裂殖子、雌/雄配子体、合子和卵囊等虫期。其中随宿主粪便排出的卵囊具有感染性。
卵囊(Oocyst)呈圆形或椭圆形,直径为4~6μm,成熟卵囊内含有4个子孢子(Sporozoite)和由颗粒物组成的残留体(Residual body),子孢子为月牙形(图12-11)。粪便中的卵囊若不经染色,难以辨认。用改良抗酸染色后,呈玫瑰红色,背景为蓝绿色。由于标本中卵囊所处的位置不同,在显微镜下观察时,囊内子孢子呈不规则排列,残留体为暗黑色或棕色的颗粒状。

图12-11 隐孢子虫卵囊形态结构模式图
【生活史】
隐孢子虫的生活史简单,在同一宿主体内即可完成无性生殖和有性生殖两种方式,虫体主要寄生在宿主的胃、肠道上皮细胞的刷状缘纳虫空泡内,严重时可扩散到整个消化道。人和易感动物食入成熟卵囊后,经消化液的消化作用,4个子孢子从卵囊内逸出,先附着于肠上皮细胞,再进入细胞,在纳虫空泡内进行无性繁殖,先发育为滋养体。然后,再经三次核分裂发育为含8个裂殖子的Ⅰ型裂殖体。成熟裂殖子被释出并侵入其他上皮细胞,发育为第二代滋养体,再经二次核分裂发育为含4个裂殖子的Ⅱ型裂殖体。Ⅱ型裂殖体释放出的裂殖子侵入细胞发育为雌/雄配子体,雌配子体进一步发育为雌配子,雄配子体发育成雄配子。雌、雄配子结合形成合子,合子发育成卵囊,成熟的卵囊有薄壁卵囊和厚壁卵囊两种类型。薄壁卵囊只有一层单位膜,含4个裸露的子孢子,子孢子逸出后,侵入肠上皮细胞,行裂体增殖,而导致宿主体内的重复感染。厚壁卵囊在肠腔内形成4个子孢子后,随宿主粪便排出体外,厚壁卵囊具有感染性。完成整个生活史约需5~11天(图12-12)。
【致病】
(一)致病机理
隐孢子虫主要寄生于小肠上皮细胞的刷状缘形成的纳虫空泡内,空肠近端是感染虫数最多、最严重的部位,严重者可扩散到整个消化道,甚至累及肺、扁桃体、胰腺和胆囊等器官。
由于隐孢子虫寄生于肠黏膜,损伤肠黏膜,使黏膜表面出现凹陷,或呈火山口状,肠绒毛萎缩,变短变粗,或融合、移位和脱落,上皮细胞老化和脱落速度加快,轻度感染者肠黏膜的变化不明显。由于虫体的寄生,肠绒毛失去了正常功能,影响消化吸收,导致消化不良和吸收障碍而发生腹泻。
(二)临床表现
临床症状的严重程度取决于宿主的免疫功能与营养状况。

图12-12 隐孢子虫生活史示意图
免疫功能正常者感染后,主要表现为急性水样腹泻,无脓血,量大,日排便2~20余次,可有腹痛、腹胀、恶心、呕吐、食欲减退、厌食、发热等全身不适症状。严重感染的幼儿可出现喷射性水样泻,排便量多。病程长短不一,一般持续1~2周,由急性转为慢性而反复发作者并不少见。症状平稳后,粪便中卵囊的排出仍可持续数周。
免疫功能缺陷者感染后,症状明显,腹泻较重,表现为持续性霍乱样水泻,一日数次至数十次。常伴有剧烈腹痛,水、电解质紊乱,酸中毒,同时并发肠外器官寄生,如呼吸道、胆道等。1993年美国疾控中心(CDC)报告该病是美国三个重要暴发性疾病之一,易致患者尤其是婴幼儿和免疫功能缺陷者长期腹泻,甚至危及生命。隐孢子虫病是艾滋病患者主要致死病因之一,国外已将隐孢子虫列为艾滋病病人的常规检查项目。
【实验诊断】
(一)病原学诊断
查出卵囊为确诊依据。
1.直接涂片染色法:在粪便、呕吐物或痰中查找卵囊。但由于未染色的卵囊无色透明,易与标本中的非特异性颗粒相混淆,需采用染色方法进行确诊。
2.金胺-酚染色法:染色后在荧光显微镜下可见卵囊为圆形,发出乳白色略带绿色的荧光,中央淡染,似环状。本法简便、敏感,适用于大量标本的筛选检查,但因需要荧光显微镜,在基层卫生机构的应用受到限制。
3.改良抗酸染色法:染色后卵囊呈圆形,玫瑰红色,背景为蓝绿色,内部结构清晰,可见子孢子和残留体。但须与标本中的红色抗酸颗粒相区别。
4.金胺酚-改良抗酸染色法:本法克服了上述染色法的缺点。先用金胺-酚染色后,再用改良抗酸染色法复染,染后用光学显微镜检查,其卵囊同抗酸染色,而非特异性颗粒呈蓝黑色,两种颜色截然不同,有利于卵囊的检查,大大提高了检出率和准确性。
(二)免疫学诊断
用于辅助诊断和流行病学调查。方法有酶联免疫吸附试验、酶联免疫印迹试验、间接荧光抗体试验、荧光标记单克隆抗体法,其中荧光标记单克隆抗体法较敏感特异。
(三)基因检测
采用PCR技术和DNA探针检测隐孢子虫特异DNA。
【流行】
(一)流行情况
隐孢子虫病的流行情况呈世界性分布,迄今已在74个国家发现了隐孢子虫病。各地区的腹泻患者中,隐孢子虫的检出率不同,从0.6%~10.2%不等,在寄生虫性腹泻中占第二位。暴发流行多发生于与病人或病牛接触后的人群,或幼儿园和托儿所等集体单位。同性恋并发艾滋病患者近半数感染隐孢子虫。
我国于1987年在南京市首先发现了人体隐孢子虫病病例。随后在全国19个省(区、市)都报道了一些病例。在我国腹泻儿童中,隐孢子虫的检出率为1.36%~13.3%,其中福建的感染率最高。隐孢子虫病多见于5岁以下的婴幼儿,男女间无明显差异,温暖潮湿季节发病率高,农村比城市多,沿海港口城市比内地多,经济落后、卫生状况差的地区比发达地区多,畜牧区比非畜牧区多。
(二)流行因素
1.传染源:隐孢子虫病人、健康带虫者、恢复期带虫者是该病重要的传染源。交叉试验证实,牛、羊、猫、犬和兔等动物的隐孢子虫卵囊亦可感染人,成为畜牧地区和农村的重要动物源性传染源。
2.传播途径:食用含隐孢子虫污染的食物和水。水源污染是造成隐孢子虫病在人群中暴发流行的主要原因。同性恋者可通过性接触传播。人与动物可互相传播。
3.易感人群:人对隐孢子虫普遍易感。婴幼儿、艾滋病患者、接受免疫抑制剂治疗的病人以及先天或后天的免疫功能低下者易感染隐孢子虫。
【防治】
隐孢子虫病为人畜共患寄生虫病,预防该病应防止病人、病畜及带虫者的粪便污染食物和水源,注意个人卫生、饮食卫生,保护免疫功能缺陷或低下的人,避免与病人病畜接触。
卵囊对外界的抵抗力强,常用的消毒剂不能将其杀死,10%福尔马林、5%氨水加热至65℃-70℃30分钟,可杀死卵囊。
治疗隐孢子虫病至今尚无特效药物。国外有用螺旋霉素、巴龙霉素治疗者;国内用大蒜素胶囊治疗,有一定效果。
(张 莉)