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牛肉膏　　　　　　　　　　3～5 g　　　　　蛋白胨　　　　　　　　　10 g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，校正pH 7.4～7.6，煮沸3～5 min，用滤纸或脱脂棉过滤，分装于三角烧瓶或试管内，103.43 kPa 20 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］供一般细菌培养用，并可作为无糖基础液。

肉汤　　　　　　　　　　　1000 mL　　　　琼脂粉　　　　　　　　　20～25 g

［制法］取已制备好的肉汤1000 mL，置于三角烧瓶中，加20～25 g琼脂粉，加热溶解，分装于三角烧瓶或试管内，103.43 kPa 20 min，按要求分装于试管或平皿中制成斜面培养基或普通营养琼脂平板。4℃冰箱储存备用。

［用途］供一般细菌分离培养或增菌等。

肉汤　　　　　　　　　　　1000 mL　　　　琼脂粉　　　　　　　　　2～5 g

［制法］取已制备好的肉汤1000 mL，置于三角烧瓶中，加2～5 g琼脂粉，加热溶解，校正pH 7.4～7.6，分装于小试管内，每管约2 mL，103.43 kPa 20 min，灭菌后将试管直立，待凝固后即成半固体培养基，4℃冰箱储存备用。

［用途］主要供细菌动力观察、菌种保存、H抗原位相变异实验等用。

胰蛋白胨　　　　　　　　　15 g　　　　　　豆蛋白胨　　　　　　　　　5g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　18 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，校正pH 7.2～7.4，103.43 kPa 20 min，并冷却至50℃左右；以无菌操作加入5%～10%预热至37℃的脱纤维绵羊血后轻轻摇动使其混合均匀（勿产生气泡），倾注于灭菌平皿内，每皿以盖满皿底为宜，或分装于试管制成斜面，凝固后4℃冰箱保存备用。

［用途］供营养要求较高的病原菌分离培养、溶血鉴别以及保存菌种用。

普通营养琼脂　　　　　　1000 mL　　　　无菌脱纤维羊（或兔）血　　8～10 mL

［制法］按血液琼脂培养基配制方法将血液加入普通营养琼脂中，将盛血液琼脂的容器置于85℃水浴中加热10～15 min（并不停摇动），直至培养基颜色变成巧克力色，取出并冷却至50℃左右，倾注于灭菌平皿内，凝固后4℃冰箱保存备用。

［用途］供分离脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等用。

（1）可在培养基冷却至50℃左右时加入一支双抗巧克力琼脂添加剂（含万古霉素0.66 mg，多黏菌素B 0.84 mg），混匀，倾入无菌平皿制成双抗巧克力琼脂。

（2）可用市售巧克力琼脂（酪蛋白胨胰酶消化物10 g，肉胃蛋白酶消化物5g，心胰酶消化物3g，酵母浸出粉5g，玉米淀粉1g，氯化钠5g，琼脂粉12 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.2～7.4），制法同上。

牛肉浸液　　　　　　　　1000 mL　　　　蛋白胨　　　　　　　　　　8 g

明胶　　　　　　　　　　　30 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　40 g

琼脂粉　　　　　　　　　　8g

［制法］将上述成分（除明胶外）加入牛肉浸液（或肉汤），加热溶解，调pH 7.6，加入明胶后103.43 kPa 15 min灭菌，冷却至50～60℃倾注平板，4℃冰箱保存备用。

［用途］用于L型细菌的分离培养。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　牛肉浸粉　　　　　　　　1g

氯化钠　　　　　　　　　　75 g　　　　　　　甘露醇　　　　　　　　　　10 g

琼脂粉　　　　　　　　　18 g　　　　　　0.1%酚红溶液　　　　　25 mL

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠加入水中，加热溶解，校正pH 7.4，加入甘露醇、0.1%酚红溶液和琼脂粉，68.95 kPa 15 min，无菌分装，制成平板，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

肉膏汤　　　　　　　　　1000 mL　　　　氯化钠　　　　　　　　　65 g

［制法］将上述成分加热溶解，装于三角烧瓶或试管内，103.43 kPa 20 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］供鉴定肠球菌用。

胰蛋白胨　　　　　　　　　17 g　　　　　　　牛肉浸粉　　　　　　　　　3g

酵母浸粉　　　　　　　　5g　　　　　　　牛胆粉　　　　　　　　　　10 g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　枸橼酸钠　　　　　　　　1g

七叶苷　　　　　　　　　　1 g　　　　　　　枸橼酸铁铵　　　　　　　0.5 g

琼脂粉　　　　　　　　　　15 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，调pH 6.6，分装于试管，每管5 mL，103.43 kPa 20 min，制成斜面，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于肠球菌的鉴定。

肉膏汤　　　　　　　　　　1000 mL　　　　马尿酸钠　　　　　　　　10 g

［制法］将马尿酸钠溶解于肉膏汤内，分装于小试管内，并于管壁画一横线，103.43 kPa 20 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］主要用于B群链球菌的鉴定。

脱氧核糖核酸（DNA）　　　5 g　　　　　　　氯化钙　　　　　　　　　0.0011 g

氯化钠　　　　　　　　　　10 g　　　　　　甲苯胺蓝　　　　　　　　0.083 g

三羟甲基甲烷　　　　　　6.1 g　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　10 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分搅拌加热煮沸至完全溶解，调pH 8.8～9.2，分装于三角烧瓶内，68.95 kPa 15 min，4℃冰箱储存备用。如配制好后即用，可不灭菌。

［用途］主要用于致病性葡萄球菌的鉴定。

蛋白胨　　　　　　　　　5g　　　　　　　牛肉膏　　　　　　　　　　5g

三号胆盐　　　　　　　　3.5 g　　　　　　乳糖　　　　　　　　　　10 g

枸橼酸钠　　　　　　　　8.5 g　　　　　　硫代硫酸钠　　　　　　　8.5 g

枸橼酸铁　　　　　　　　0.5 g　　　　　　0.5%中性红溶液　　　　5 mL

0.1%煌绿溶液　　　　　　0.33 mL　　　　琼脂粉　　　　　　　　　18 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、中性红、煌绿外）先混合加热溶解，校正pH 7.2，然后加入琼脂粉、中性红和煌绿，再加热溶解，待冷却至55℃左右，倾注无菌平皿，凝固后即可。

［用途］主要用于肠道致病菌的选择性分离。

（1）本培养基切忌高压蒸汽灭菌或加热过久，宜当日使用，或保存于4℃冰箱48 h内使用。

（2）配好的煌绿溶液应在10天内使用。

蛋白胨　　　　　　　　　10 g　　　　　　乳糖　　　　　　　　　　10 g

胆盐　　　　　　　　　　　5g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

0.5%中性红溶液　　　　5 mL　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　18 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、中性红外）先混合加热溶解，校正pH 7.2，然后加入琼脂粉、中性红，再加热溶解，68.95 kPa 15 min，待冷却至55℃左右，倾注无菌平皿，凝固后即可。

［用途］为弱选择性培养基，主要用于肠道致病菌的选择性分离。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　乳糖　　　　　　　　　　　10 g

磷酸氢二钾　　　　　　　2g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　18 g

蒸馏水　　　　　　　　　1000 mL　　　　　2%无菌伊红溶液　　　　20 mL

0.5%无菌美蓝溶液　　　10 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、伊红、美蓝外）先混合加热溶解，校正pH 7.2～7.4，然后加入琼脂，68.95 kPa 15 min，待冷却至55℃左右，加入伊红和美蓝溶液（也可以灭菌前加），摇匀，倾注平板。

［用途］为弱选择性培养基，主要用于分离肠道杆菌。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　牛肉粉　　　　　　　　　　3g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　乳糖　　　　　　　　　　　10 g

琼脂粉　　　　　　　　　18 g　　　　　　1%中国蓝溶液　　　　　5 mL

1%玫红酸醇溶液　　　　10 mL　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、中国蓝、玫红酸外）先混合加热溶解，校正pH 7.2，然后加入琼脂粉、中国蓝、玫红酸醇溶液，再加热溶解，68.95 kPa 15 min，待冷却至55℃左右，倾注无菌平皿，凝固后即可。

［用途］为弱选择性培养基，主要用于肠道致病菌的选择性分离。

牛肉膏　　　　　　　　　　5g　　　　　　　蛋白胨　　　　　　　　　　10 g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　硫代硫酸钠　　　　　　　0.5 g

硫酸亚铁铵　　　　　　　0.5 g　　　　　　葡萄糖　　　　　　　　　1g

乳糖　　　　　　　　　　　10 g　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　15 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL　　　　　0.4%酚红溶液　　　　　　6 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、酚红外）先混合加热溶解，调pH 7.4±0.2，加入琼脂粉和酚红，再加热至琼脂溶解，分装于试管中，每管约4 mL，68.95 kPa 15 min，摆放成斜面及高层冷凝，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于肠杆菌的初步鉴定，也可用于鉴定非发酵菌。

蛋白胨　　　　　　　　　　10～20 g　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，调pH 7.4，分装于三角烧瓶或试管内，103.43 kPa 15 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］供靛基质实验用，也可作为糖发酵管的基础液。

蛋白胨　　　　　　　　　　5g　　　　　　　葡萄糖　　　　　　　　　5g

磷酸氢二钾　　　　　　　5g　　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，调pH 7.0，分装于三角烧瓶或试管内，68.95 kPa 15 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］供甲基红和V-P实验用。

蛋白胨　　　　　　　　　5 g　　　　　　　硝酸钾（不含 pagenumber_ebook=165,pagenumber_book=158

）0.2 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，调pH 7.4，分装于三角烧瓶或试管内，103.43 kPa 15 min。4℃冰箱储存备用。

［用途］供硝酸盐还原实验或霍乱红反应用。

蛋白胨水或肉膏汤　　　　1000 mL　　　　糖　　　　　　　　　　　　5～10 g

1.6%溴甲酚紫溶液　　　　1 mL

［制法］将上述成分溶解后，分装于三角烧瓶或试管内，68.95 kPa 15 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］主要用于检测一般细菌对各种糖的发酵能力。

［注］如需观察产气情况，可将培养基分装于试管内，试管内加一倒置小管，再高压蒸汽灭菌；或将培养基制成半固体；厌氧菌培养时需加入维生素C 0.1 g、硫乙醇酸钠0.5 g和L-半胱氨酸0.25 g。

硫酸镁　　　　　　　　　0.2 g　　　　　　磷酸二氢铵　　　　　　　1g

磷酸氢二钾　　　　　　　1g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　5g

枸橼酸钠　　　　　　　　5g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　20 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL　　　　　1.0%溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL

［制法］先将上述各种盐类成分溶解于蒸馏水中，调pH 6.0，然后加入琼脂粉和指示剂，加热使琼脂溶解，分装于试管，每管约3 mL，103.43 kPa 20 min，制成斜面备用。

［用途］用于枸橼酸盐利用实验。

蛋白胨　　　　　　　　　1 g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

葡萄糖　　　　　　　　　1g　　　　　　　20%尿素溶液　　　　　　100 mL

磷酸二氢钾　　　　　　　2 g　　　　　　0.2%酚红溶液　　　　　6 mL

蒸馏水　　　　　　　　　　900 mL

［制法］先将上述各成分（除尿素外）溶解于蒸馏水中，调pH 6.8，68.95 kPa 15 min，以无菌操作加入已过滤除菌的尿素溶液，混匀后分装于无菌试管，4℃冰箱保存备用。

［用途］供尿素分解实验用。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

葡萄糖　　　　　　　　　　1g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　2g

磷酸二氢钾　　　　　　　2 g　　　　　　　0.4%酚红溶液　　　　　　2 mL

20%尿素溶液　　　　　　100 mL　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　900 mL

［制法］先将上述各成分（除尿素、酚红外）加热溶解于蒸馏水中，调pH 7.0，再加入酚红指示剂，68.95 kPa 15 min，待冷却至80～90℃时，以无菌操作加入已过滤除菌的尿素溶液，混匀后分装于无菌试管，每管3 mL，直立放置待凝固，4℃冰箱保存备用。

［用途］用于细菌的复合生化实验。

蛋白胨　　　　　　　　　5g　　　　　　　酵母浸粉　　　　　　　　3g

葡萄糖　　　　　　　　　1g　　　　　　　1.6%溴甲酚紫溶液　　　1 mL

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］先将上述各成分（除溴甲酚紫外）加热溶解于蒸馏水中，调pH 6.8，再加入溴甲酚紫；分成四份，前三份按0.5%分别加入L-赖氨酸、L-精氨酸、L-鸟氨酸，另一份为对照，不加氨基酸。加入氨基酸后校正pH 6.8，分装于试管，每管0.5～1 mL，每管再加入一薄层无菌液体石蜡，68.95 kPa 15 min备用。

［用途］用于氨基酸脱羧酶实验，鉴定肠杆菌科、弧菌科细菌用。

D-苯丙氨酸　　　　　　　2g　　　　　　　酵母浸粉　　　　　　　　　3g

磷酸氢二钠　　　　　　　1g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　5g

琼脂粉　　　　　　　　　12 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述各成分加热溶解于蒸馏水中，调pH 7.4，分装于试管内，每管2 mL，103.43 kPa 15 min，制成斜面备用。

［用途］用于苯丙氨酸脱氨酶实验，鉴定变形杆菌用。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

牛肉膏　　　　　　　　　　3g　　　　　　　明胶　　　　　　　　　　　120 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述各成分在水浴锅内加热溶解，不断搅拌，调pH 7.2～7.4，分装于试管，每管约3 mL，55.16 kPa 15 min，4℃冰箱保存备用。

［用途］供明胶液化实验用。

［注］加热灭菌时间不宜过长，加热次数也不宜过多，否则明胶将失去凝固能力。

蛋白胨　　　　　　　　　10 g　　　　　　酵母浸粉　　　　　　　　5g

氯化钠　　　　　　　　　　10 g　　　　　　硫代硫酸钠　　　　　　　10 g

枸橼酸钠　　　　　　　　10 g　　　　　　牛胆粉　　　　　　　　　5g

牛胆酸钠　　　　　　　　3g　　　　　　　蔗糖　　　　　　　　　　　20 g

枸橼酸铁　　　　　　　　　1g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　15 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

1%溴麝香草酚蓝乙醇液　4 mL

［制法］先将上述各种成分（除琼脂粉、指示剂外）加热溶解于蒸馏水中，调pH 8.6±0.1，然后加入琼脂粉和指示剂，煮沸，冷却至60℃左右倾注平板，无须高压蒸汽灭菌，室温保存备用。

［用途］用于霍乱、副溶血性弧菌的分离培养。

蛋白胨　　　　　　　　　10 g　　　　　　牛肉浸粉　　　　　　　　3g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　枸橼酸钠　　　　　　　　10 g

十二烷基硫酸钠　　　　　0.5 g　　　　　　无水亚硫酸钠　　　　　　3g

猪胆汁粉　　　　　　　　5g　　　　　　　或鲜猪胆汁　　　　　　　30 mL

1%雷佛奴尔　　　　　　3 mL　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　20 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］先将上述各种成分（除琼脂粉、指示剂外）加热溶解于蒸馏水中，调pH 8.5±0.2，然后加入琼脂粉和指示剂，煮沸溶解，待冷却至60℃左右加入1%亚碲酸钾1 mL及500 U/mL的庆大霉素1 mL，混匀倾注平皿。

［用途］用于霍乱弧菌的选择性分离培养。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　牛肉浸粉　　　　　　　　3g

氯化钠　　　　　　　　　　5 g　　　　　　　枸橼酸钠　　　　　　　　10 g

蔗糖　　　　　　　　　　10 g　　　　　　无水亚硫酸钠　　　　　　3g

琼脂粉　　　　　　　　　15 g　　　　　　庆大霉素　　　　　　　　500 U

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］先将上述各成分（除琼脂粉、庆大霉素外）加热溶解于蒸馏水中，调pH 8.5±0.2，然后加入琼脂粉，煮沸溶解，待冷却至60℃左右加入1%亚碲酸钾1 mL及500 U/mL的庆大霉素1 mL，混匀倾注平皿。

［用途］用于霍乱弧菌的选择性分离培养。

蛋白胨　　　　　　　　　　10 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分加热溶解，调pH 8.4，分装于三角烧瓶或试管内，塞好棉塞，103.43 kPa 15 min，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于霍乱弧菌的增菌培养。

pH 8.4肉膏汤　　　　　　1000 mL　　　　琼脂粉　　　　　　　　　20 g

［制法］将琼脂粉加于肉膏汤中加热溶解，调pH 8.4，煮沸过滤，分装于三角烧瓶内，103.43 kPa 15 min，待冷却至50℃左右倾注无菌平皿，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于霍乱弧菌的分离或增菌培养。

蛋白胨　　　　　　　　　20 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　40 g

琼脂粉　　　　　　　　　　17 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

0.01%结晶紫溶液　　　　0.5 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、结晶紫外）加热溶解，调pH 8.7（加30%氢氧化钾溶液约0.4 mL），煮沸过滤后加入结晶紫、琼脂粉，103.43 kPa 15 min，待冷却至50℃左右倾注无菌平皿，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于副溶血性弧菌的选择性分离培养。

蛋白胨　　　　　　　　　10g　　　　　　酵母浸膏　　　　　　　　3g

甘露醇　　　　　　　　　5g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　70 g

磷酸氢二钾　　　　　　　5 g　　　　　　　0.1%结晶紫溶液　　　　1 mL

琼脂粉　　　　　　　　　15 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、结晶紫外）加热溶解，调pH 7.6，煮沸过滤后加入结晶紫、琼脂粉，68.95 kPa 10 min，待冷却至50℃左右加入脱纤维羊血5 mL，混匀，倾注至已凝固的营养琼脂平板内，制成重层平板，供当天使用。

［用途］用于副溶血性弧菌的溶血实验（Kanagawa现象）。

胰蛋白胨　　　　　　　　2.5 g　　　　　　酵母浸膏　　　　　　　　5g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　15 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL　　　　甲氧苄啶（TMP）　　　　5 mg

万古霉素　　　　　　　　10 mg　　　　　多黏菌素B　　　　　　　2500 U

冻融脱纤维马血　　　　　50～70 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、TMP、万古霉素、多黏菌素B、冻融脱纤维马血外）加热溶解，调pH 7.4，加入琼脂粉，103.43 kPa 20 min，待冷却至50℃左右加入其他成分，倾注无菌平皿，4℃冰箱储存备用。

［用途］用于空肠弯曲菌的分离培养。

（1）TMP、抗生素混合液配法：先配成乳酸TMP溶液，以乳酸62 mg（1～2滴）混合于100 mL灭菌蒸馏水中，然后再加入TMP溶液。

（2）取乳酸TMP溶液5 mL，再加入万古霉素及多黏菌素B，摇匀后，即成TMP抗生素混合液。

胰蛋白胨　　　　　　　　10 g　　　　　　蛋白胨　　　　　　　　　　10 g

葡萄糖　　　　　　　　　　1g　　　　　　　酵母浸膏　　　　　　　　2g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　焦亚硫酸钠　　　　　　　0.1 g

琼脂粉　　　　　　　　　　15 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

甲氧苄啶（TMP）　　　　5 mg　　　　　　万古霉素　　　　　　　　10 mg

多黏菌素B　　　　　　　2500 U　　　　　两性霉素B　　　　　　　2 mg

头孢菌素　　　　　　　　15 mg　　　　　脱纤维羊血　　　　　　　50～70 mL

［制法］将上述成分（除琼脂粉、抗生素、羊血外）加热溶解，调pH 7.0±0.2，加入琼脂粉，此为布氏琼脂基础培养基。103.43 kPa 20 min，待冷却至50℃左右加入其他成分，倾注无菌平皿，冰箱储存备用。

［用途］用于空肠弯曲菌的分离培养。

［注］两性霉素B、头孢菌素混合液配法：称取两性霉素B 2 mg和头孢霉素15 mg与无菌蒸馏水5 mL混合即成。

马铃薯　　　　　　　　　125 g　　　　　　甘油　　　　　　　　　　10 mL

氯化钠　　　　　　　　　　5.6 g　　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　　22.5 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

（1）先将马铃薯去皮切碎，浸入500 mL已加入甘油的水中，煮沸至马铃薯变软为止，用纱布过滤，补足水分至原量。

（2）将马铃薯浸汁加入氯化钠、琼脂粉，再加入蒸馏水500 mL，溶解后调pH 7.0，过滤分装，每瓶100 mL，103.43 kPa 15 min，备用。

（3）临用时取该培养基1瓶，加热溶解，冷却至50℃左右，加入无菌脱纤维羊血35 mL及100 U/mL的青霉素0.5 mL，摇匀倾注平板，4℃冰箱保存备用。

［用途］用于百日咳鲍特菌的分离培养。

1%葡萄糖肉汤（pH 7.6）　　　100 mL

无菌动物（牛、羊、猪等）血清　300 mL

［制法］将肉汤与动物血清按比例混合，分装于试管内，每管5 mL，在血清凝固器或流通蒸汽灭菌器内制成斜面，间歇灭菌。

［用途］用于白喉杆菌的分离培养。

［注］间歇灭菌方法：第一天，80℃1 h后于37℃过夜；第二天，85℃1 h后于37℃过夜，有污染者弃之不要；第三天，90℃1 h后于37℃过夜。

pH 7.6营养琼脂　　　　1000 mL　　　10%葡萄糖液　　　　　　2 mL

1%亚碲酸钾液　　　　　　4.5 mL　　　　　0.5%胱氨酸液　　　　　　1 mL

脱纤维羊血　　　　　　　50～100 mL

［制法］先将灭菌营养琼脂溶化，冷却至50℃左右，加入无菌脱纤维羊血、葡萄糖液、亚碲酸钾液和胱氨酸液，混匀后倾注平板，冰箱保存备用。

［用途］用于百日咳鲍特菌的分离培养和鉴别。

牛肉渣　　　　　　　　　　1g　　　　　　　牛肉汤　　　　　　　　　　10 mL

［制法］将做肉浸液剩下的肉渣，用自来水冲洗搓捏，除去浮屑和杂质，冲洗至无混浊现象为止，再以蒸馏水冲洗数次，校正pH 7.8～8.0，置于冰箱过夜；第二天取出，先用自来水冲洗，再用蒸馏水冲洗数次，沥干后，68.95 kPa 10 min，置于70～80℃烘箱内烘干；取肉渣装试管，每管约1 g，再加入牛肉汤约10 mL，103.43 kPa 20 min，备用。

［用途］供厌氧菌培养用。

［注］肉渣含不饱和脂肪酸，能吸收氧，其中的氨基酸有还原作用，故培养基内氧化还原电势低。

硫乙醇酸钠　　　　　　　0.5 g　　　　　　胰酶消化酪蛋白　　　　　17 g

植物胨或大豆胨　　　　　3g　　　　　　　葡萄糖　　　　　　　　　6g

氯化钠　　　　　　　　　　2.5 g　　　　　　L-胱氨酸　　　　　　　　　0.5 g

亚硫酸钠　　　　　　　　0.1 g　　　　　　刃天青（Resazurin）　　　0.001 g

琼脂粉　　　　　　　　　0.7 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述各成分加热至完全溶解，煮沸1～2 min，冷却后调pH 7.2～7.4，分装于试管，每管10 mL，103.43 kPa 15 min，4℃冰箱保存备用。

［用途］此培养基厌氧菌和需氧菌均可生长，需氧菌生长在上部，厌氧菌（包括兼性厌氧菌）生长在下部。

胰酪胨　　　　　　　　　40g　　　　　　葡萄糖　　　　　　　　　2g

磷酸氢二钾　　　　　　　5g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　2g

50%硫酸镁　　　　　　　0.2 mL　　　　　琼脂粉　　　　　　　　　20 g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将以上成分加热溶解，调pH 7.3～7.4，103.43 kPa 15 min，冷却至60℃加入50%蛋黄盐水100 mL，混匀倾注平板，4℃冰箱保存备用。

［用途］用于厌氧菌（如产气荚膜梭菌）的分离培养。

［注］50%蛋黄盐水的配制同卵黄双抗琼脂培养基。

新鲜牛乳（脱脂）　　　　1000 mL　　　　　1.6%溴甲酚紫溶液　　　1 mL

［制法］取新鲜生牛乳置于锥形瓶中，隔水煮沸30 min，自然冷却，再置于冰箱内2～4 h，让脂肪上浮，然后吸取下层乳汁100 mL，加入指示剂；混匀后分装于试管，每管约5 mL，于表面加已溶化的凡士林，厚约5 mm；55.16 kPa 20 min后经37℃24～48 h，若无细菌生长即可使用。

［用途］检测厌氧菌对牛乳的凝固和发酵作用，常用于检测产气荚膜梭菌。

胰酶解酪蛋白　　　　　　15 g　　　　　　植物胨或木瓜酶消化豆粉　5g

氯化钠　　　　　　　　　　5g　　　　　　　半胱氨酸　　　　　　　　　0.4 g

酵母浸出粉　　　　　　　5g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　5g

0.5%氯化血红素　　　　　1 mL　　　　　　1%维生素K溶液　　　　1 mL

琼脂粉　　　　　　　　　20 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

脱纤维羊血或兔血　　　　50 mL

［制法］将上述成分（除氯化血红素、维生素K、血液、琼脂粉外）混合，加热溶解，冷却后调pH 7.4，加入琼脂粉，103.43 kPa 15 min，冷却至50℃，加入无菌脱纤维羊血或兔血50 mL，混匀后倾注平板（临用前以无菌操作方式加入氯化血红素和维生素K溶液）。

［用途］用于营养要求较高的厌氧菌的培养。

䏡胨2号　　　　　　　　40 g　　　　　　磷酸氢二钠　　　　　　　5g

磷酸二氢钾　　　　　　　1g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　2g

无水硫酸镁　　　　　　　0.1 g　　　　　　果糖　　　　　　　　　　6g

环丝氨酸　　　　　　　　0.5 g　　　　　　头孢甲氧噻吩　　　　　　0.016 g

琼脂粉　　　　　　　　　20 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

1%中性红乙醇溶液　　　3 mL　　　　　　50%蛋黄盐水溶液　　　　50 mL

［制法］将上述成分（除环丝氨酸、头孢甲氧噻吩、蛋黄盐水溶液、琼脂粉外）混合，加热溶解，冷却后调pH 7.6，加入琼脂粉，103.43 kPa 15 min，冷却至50℃，以无菌操作方式加入环丝氨酸、头孢甲氧噻吩、50%蛋黄盐水溶液，混匀后倾注平板。

［用途］用于艰难梭菌的选择性分离。

枸橼酸铁铵　　　　　　　0.5 g　　　　　　植物胨　　　　　　　　　5 g

胰酪胨　　　　　　　　　　5g　　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　　5g

七叶灵　　　　　　　　　　1g　　　　　　　牛胆粉　　　　　　　　　　20 g

0.5%氯化血红素　　　　2 mL　　　　　　0.4%庆大霉素溶液　　　2.5 mL

琼脂粉　　　　　　　　　　15 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将上述成分（除氯化血红素、庆大霉素溶液、琼脂粉外）混合，加热溶解，冷却后调pH 7.0，加入琼脂粉，103.43 kPa 15 min，冷却至50℃，以无菌操作方式加入氯化血红素、庆大霉素溶液，混匀后倾注平板。

［用途］用于类杆菌的选择性分离。

CCD厌氧血琼脂　　　　　1000 mL　　　　卡那霉素　　　　　　　　100 mg

万古霉素　　　　　　　　7.5 mg

［制法］将CCD厌氧琼脂经高压蒸汽灭菌后冷却至50℃，加入无菌脱纤维羊血或兔血50 mL，再加入卡那霉素、万古霉素，混匀后倾注平板。

［用途］用于厌氧菌的分离培养。

磷酸二氢钾（无水）　　　　2.4 g　　　　　　硫酸镁　　　　　　　　　0.24 g

枸橼酸镁　　　　　　　　0.6 g　　　　　　L-谷氨酸钠　　　　　　　7.2 g

甘油　　　　　　　　　　　12 mL　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　600 mL

马铃薯粉　　　　　　　　30 g　　　　　　新鲜鸡蛋液　　　　　　　1000 mL

2%孔雀绿　　　　　　　　20 mL

［制法］将上述成分（除马铃薯粉、新鲜鸡蛋液、孔雀绿外）加入600 mL蒸馏水中混合，置于水浴中加热溶解，加入马铃薯粉，继续加热30 min，并不时搅拌，冷却至65℃左右；按“卵黄双抗琼脂”配制方法消毒鸡蛋外壳，收集全蛋液于带玻璃珠的无菌瓶内打碎，加入上述溶液，并加入孔雀绿；分装于无菌试管内，每管8～10 mL，制成斜面，间隙灭菌。

［用途］用于结核分枝杆菌的培养。

［注］染料最好先配成溶液。

优质蛋白胨　　　　　　　0.8 g　　　　　　氯化钠　　　　　　　　　1.4 g

氯化钾　　　　　　　　　　0.4 g　　　　　　碳酸氢钠　　　　　　　　　0.02 g

磷酸二氢钾　　　　　　　0.18 g　　　　　磷酸氢二钠　　　　　　　0.08 g

蒸馏水　　　　　　　　　　920 mL　　　　　无菌兔血清　　　　　　　　80 mL

［制法］除兔血清外，其他各成分混合，加热溶解，调pH 7.2，高压蒸汽灭菌（103.43 kPa）20 min，冷却后，以无菌操作加入兔血清，制成8%血清溶液，分装入无菌试管中，并在56℃水浴中灭活1 h，4℃冰箱保存备用。

［用途］供钩端螺旋体培养用。

蛋白胨　　　　　　　　　10g　　　　　　葡萄糖　　　　　　　　　40 g

琼脂粉　　　　　　　　　20 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］上述成分混合加热溶解（pH一般可不矫正），103.43 kPa 15 min，4℃冰箱保存备用。

［用途］供真菌培养用。

［注］如不加琼脂粉即为沙保弱液体培养基；在分装前可加入氯霉素5～125 mg及放线菌酮100～150 mg，前者可抑制细菌生长，后者可抑制霉菌及隐球菌生长，而有利于其他病原真菌的生长。

黄玉米粉　　　　　　　　40 g　　　　　　吐温-80　　　　　　　　　10 mL

琼脂粉　　　　　　　　　　15 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将黄玉米粉加入500 mL蒸馏水中，60℃加热30 min，用纱布过滤；将琼脂粉加入另外500 mL蒸馏水中，加热溶解；混合上述两种物质，趁热用纱布过滤后加1 mL吐温-80，混匀后高压蒸汽灭菌（103.43 kPa）15 min，4℃冰箱保存备用。

［用途］供白假丝酵母菌小培养用，可观察其厚膜孢子和假菌丝。

大米　　　　　　　　　　　20 g　　　　　　吐温-80　　　　　　　　　5 mL

琼脂粉　　　　　　　　　　25 g　　　　　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000 mL

［制法］将20 g大米加入1000 mL蒸馏水中煮沸，维持45 min，用4层纱布过滤取滤液，补足水分至1000 mL，加入吐温-80和琼脂粉，103.43 kPa 15 min，4℃冰箱保存备用。

［用途］供白假丝酵母菌小培养用。

1.0.4%酚红溶液　酚红（phenlo red）0.4 g于研钵中磨匀，边磨边加入0.01 mol/L氢氧化钠约12 mL，使其全溶解，加蒸馏水至100 mL，充分混匀，盛入玻璃瓶中备用（此时浓度为0.4%）。

2.1%中性红溶液　中性红（neutrel red）1 g于研钵中，加入少许95%乙醇，研磨使其全部溶解，然后用95%乙醇润洗量筒中，加至70 mL，最后加蒸馏水至100 mL，盛入棕色严密玻璃瓶中备用。

3.0.1%的煌绿溶液　称取0.1 g煌绿于研钵中磨匀，边磨边加入蒸馏水，使其全部溶解，加蒸馏水至100 mL。

4.2%伊红溶液　伊红（eosin）2 g，蒸馏水100 mL，使其自溶即可。

5.0.5%美蓝溶液　美蓝（methylene blue）0.5 g，蒸馏水100 mL，使其自溶即可。

6.1%中国蓝溶液　中国蓝（China blue）1 g，蒸馏水100 mL，煮沸使其全部溶解，置于室温下过夜，次日用滤纸过滤，68.95 kPa高压蒸汽灭菌15 min，4℃冰箱保存备用（制作培养基用，否则无须灭菌）。

7.1%玫红酸　1.0 g玫红酸溶于100 mL乙醇（50%V/V）中。

8.1.6%甲酚紫乙醇溶液　溴甲酚紫（brom cresol purple）1.6 g置研钵中，加入少许95%乙醇，研磨使其全部溶解，然后用95%乙醇润洗量筒中，加至100 mL，盛入棕色严密玻璃瓶中备用。用95%的乙醇稀释4倍，即为0.4%溴甲酚紫乙醇溶液。

9.1.0%溴麝香草酚蓝乙醇溶液　溴麝香草酚蓝（brom thymol blue）1.0 g置于研钵中，加入95%乙醇少许，研磨使其全溶解，然后用95%的乙醇润洗量筒中，加至100 mL，盛入棕色严密玻璃瓶中备用。

1.靛基质试剂　将对二甲氨基苯甲醛5g溶于75 mL纯戊醇中，再一滴一滴慢慢加入浓盐酸25 mL，避免温度升高试剂颜色变深。瓶口要严密，以免挥发。

2.V-P实验试剂　甲液：α-萘酚6 g，95%乙醇100 mL。乙液：KOH16g，蒸馏水100 mL。

3.甲基红试剂　甲基红0.04 g，95%乙醇60 mL，蒸馏水40 mL，先将甲基红溶于乙醇中，再加入蒸馏水，混合摇匀即可。

4.硝酸盐还原实验试剂　甲液：对氨基苯磺酸0.4 g，5 mol/L冰醋酸50 mL。乙液：1-萘胺0.25 g，5 mol/L冰醋酸50 mL。

5.苯丙氨酸脱氨酶试剂　FeCl310 g溶于100 mL蒸馏水，可在蒸馏水中加少量盐酸抑制FeCl3的水解。

6.霍乱红实验试剂　浓硫酸（化学纯）。

7.氧化酶试剂　1%盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四甲基对苯二胺溶液。临用时新鲜配制。

8.触酶实验试剂　3%过氧化氢溶液，市售30%的过氧化氢溶液用蒸馏水稀释10倍。

9.黏丝实验试剂　0.5%去氧胆酸钠溶液。

10.胆汁溶菌实验试剂　10%去氧胆酸钠溶液。

1）结晶紫溶液　溶解2g结晶紫于20 mL95%乙醇中，溶解0.8 g草酸铵于80 mL蒸馏水中，混合上述两种溶液，放置24 h后过滤即可。

2）卢戈碘液　2g碘化钾和1g碘（先共同研为细末）溶解于不超过20 mL的蒸馏水中（碘在碘化钾的低浓度溶液中不溶解），再加蒸馏水至300 mL。

3）稀释石炭酸复红染液　将石炭酸复红染液用蒸馏水稀释10倍。

2.碱性美蓝染液

美蓝乙醇饱和溶液（95%乙醇100 mL，美蓝5 g）　30 mL

10%KOH溶液　　　　　　　　　　　　　　　　0.1 mL

蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　100 mL

将上述各液混合摇匀，滤纸过滤后备用。在美蓝中加入KOH，其作用是中和美蓝染料所含的酸性物质，陈旧美蓝溶液效果尤佳。

3.萋-纳抗酸染液

1）石炭酸复红染液　取碱性复红1g和结晶石炭酸5g于研钵中，加入10 mL 95%的乙醇研磨使其溶解，然后加蒸馏水至100 mL，储存于染液瓶中，使用前过滤。

2）3%盐酸-乙醇溶液　量取95%乙醇97 mL，加入浓盐酸3 mL，混匀即成（亦可用5%的盐酸-乙醇溶液）。

3）1%碱性美蓝染液　配制方法同2所述。

4.冯泰钠（Fontana）镀银染液

1）固定液　冰醋酸1 mL，甲醛2 mL，蒸馏水100 mL。

2）媒染剂　鞣酸5g，石炭酸1g，溶于100 mL蒸馏水。

3）硝酸银溶液　硝酸银1g溶于50 mL蒸馏水，待硝酸银溶解后滴加10%氨水，产生褐色沉淀，继续滴加氨水到沉淀溶解，以微现乳白色为度。若液体变清，可再加少许10%硝酸银溶液以校正之，此溶液必须于临用前现配，不宜长期保存。

1）初染剂金胺O0.1 g溶于95%的乙醇10 mL，加5%石炭酸至100 mL。

2）脱色剂量取95%乙醇97 mL，加入浓盐酸3 mL，混匀即成。

3）复染剂将0.5 g高锰酸钾溶于100 mL蒸馏水中即可。

6.鞭毛染液　明矾饱和溶液2 mL，5%石炭酸液5 mL，20%鞣酸液2 mL相混合。临用时加碱性复红乙醇饱和溶液（95%乙醇100 mL，碱性复红10 g）1 mL，混合后过夜，次日过滤后使用，此染液以3日内效果最好。

7.棉兰染液　石炭酸（结晶）20 g，乳酸20 mL，甘油40 mL，棉兰0.05 g，蒸馏水20 mL；将石炭酸、乳酸、甘油溶于蒸馏水中（可微加热），再加入棉兰，摇匀，滤纸过滤。

8.阿伯特（Albert）异染颗粒染液　甲液：甲苯胺蓝0.15 g，孔雀绿0.2 g，冰醋酸1 mL，95%乙醇2 mL，蒸馏水100 mL；先将甲苯胺蓝与孔雀绿溶于95%乙醇，然后加水与冰醋酸充分混匀，静置24 h，滤纸过滤后备用。乙液：碘2g，碘化钾3g，蒸馏水300 mL；将碘与碘化钾用少许蒸馏水完全溶解后，再加蒸馏水至300 mL。

9.黑斯（Hiss）荚膜染液　结晶紫染液：结晶紫饱和乙醇溶液（95%乙醇100 mL，结晶紫5 g）5 mL，加蒸馏水95 mL混合；20%硫酸铜溶液。将涂片在空气中自然干燥，无须加热固定，滴加结晶紫染液，在火焰上加热，使其冒出蒸汽为止，不要水洗，用20%硫酸铜溶液冲洗，不经水洗，干后镜检。

10.芽孢染液（复红美蓝法）石炭酸复红染液（同3），95%乙醇，碱性美蓝染液（同2）。将涂片在空气中自然干燥，无须加热固定，滴加石炭酸复红染液，在火焰上加热，使染液冒出蒸汽，维持4～5 min，冷却后用95%乙醇洗至无红色染液脱出为止，碱性美蓝染液复染2～3 min，水洗。

1.清洁液的配制（清洁液分强液和弱液两种，根据用途不同可自由选择）

重铬酸钾　　　　　　　　120 g

浓硫酸　　　　　　　　　　160 mL

自来水　　　　　　　　　　1000 mL

重铬酸钾　　　　　　　　　50 g

浓硫酸　　　　　　　　　　90 mL

自来水　　　　　　　　　　1000 mL

1）配制时应注意安全，必要时戴上耐酸手套、穿上耐酸围裙，并注意保护面部和身体裸露部位。

2）先将重铬酸钾溶解于自来水中（可稍为加热），待冷却至室温后，徐徐加入浓硫酸，否则容易暴沸及造成意外事故。

3）清洁液有很强的酸性和氧化能力，当玻璃器皿内残留大量有机物时，清洁液中的铬酸盐将迅速破坏而失效，因此，各类玻璃器皿需用肥皂水或洗洁精擦洗、自来水冲洗晾干后方可浸入清洁液中。

4）当附有Hg2+、Pb2+、Ba2+的玻璃器皿浸于清洁液时，会形成不溶的沉淀物附着在玻璃器皿壁上难以除去，因此若玻璃器皿内壁附有上述离子，应先用稀盐酸或稀硝酸处理后方可浸入硫酸清洁液。

5）新配制的清洁液为红褐色，反复多次使用后逐渐变成绿色，表明清洁液已失效，应弃去重新配制。

2.麦氏（Mc Farland）比浊管

1.方法　用穿刺接种法将细菌接种于半固体培养基内（对于一些营养要求高的细菌可以加入新鲜全血），置于温箱培养18～24 h后，在表面加上一层无菌液体石蜡，约1 cm，4℃冰箱保存。传代时应先将试管倾斜，使液体石蜡流至一边，再用接种环取菌接种于新鲜培养基上。

2.保存时间　一般细菌可保存3～6个月。

1.方法　将细菌接种于琼脂斜面培养基上（如普通琼脂斜面、血液琼脂斜面、鸡蛋琼脂斜面等），置于温箱18～24 h培养后，用灭菌固体石蜡熔封（试管塞应为橡胶塞），移至4℃或-20℃冰箱保存。

2.保存时间　4℃冰箱保存，一般细菌可保存1个月；-20℃冰箱保存，一般可保存半年至一年。

1.方法　将细菌接种于生长良好的培养基上，37℃孵箱孵育18 h后用无菌新鲜脱脂牛奶洗下菌苔，然后用无菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部，每管球部约有一半的菌液，之后火焰封口，-20℃冰箱保存。

2.保存时间　一般细菌可保存三年以上，比较脆弱的细菌也可保存两年以上。

1.方法　取清洁的海沙，用1 mol/L氢氧化钠溶液清洗，然后再用1 mol/L盐酸溶液清洗，最后用流水冲洗。分装于试管，2～3 cm深，干热灭菌，加入细菌肉汤幼龄培养液1 mL左右与沙土混匀，置于真空干燥管内干燥，待完全干燥后熔封保存。

2.保存时间　此法多用于梭状芽孢杆菌和部分霉菌的保存。可以保存数年。

1.方法　将培养18～24 h的菌苔洗下，置于无菌脱脂牛奶中，制成菌悬浊液，按湿牛奶保存法分装于无菌安培瓶。用喷灯封安培瓶口，并将封口后的安培瓶浸入4℃有色液体中浸泡30 min，明确熔封后再冷冻。冷冻时先将安培瓶放入4℃冰箱中1 h，再置于-30～-20℃低温冰箱中冻30 min，然后置于-196℃液氮中保存。菌种使用时，先将从液氮中取出的菌种管浸入30～40℃水浴中迅速解冻，再打开安培瓶，取出菌液接种。在液氮中取放安培瓶时，小心取放，小心爆炸。

2.保存时间　一般细菌可以保存数年。

1.方法　将细菌接种于生长良好的培养基上，37℃孵箱孵育18 h后用无菌新鲜脱脂牛奶洗下菌苔，然后用无菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部，每管球部约有一半的菌液，盖好塞子，放入-40℃冰箱速冻40 min，再放入准备好的混有盐的冰中，接上真空泵，真空抽干至粉末状，火焰封口，保存于-40℃冰箱。

2.保存时间　一般细菌可以保存十年以上。

1.方法　将细菌接种于斜面培养基，37℃孵箱孵育18 h后，取灭菌蒸馏水6～7 mL加于试管斜面上，用吸管研磨，洗下菌苔充分混匀，将此菌液分装于灭菌的螺旋小瓶中，或用胶塞密封，置于4℃冰箱保存。

2.保存时间　一般细菌可存活数年。

1.方法　将细菌接种于肉汤或血清肉汤培养基，37℃孵箱孵育18 h后，取5份培养物加入2份菌种保存液（甘油（分析纯）80 mL，生理盐水20 mL，混匀后于103.43 kPa灭菌15～20 min。或K2HPO412.6 g，枸橼酸钠0.98 g，MgSO4·7 H2O 0.18 g，KH2PO43.6 g，甘油88 g，加蒸馏水至1000 mL，混匀后于103.43 kPa灭菌15～20 min）。后者作为保存液时菌液与保存液的比例为1∶1，混匀，装入带螺旋盖的菌种保存管，每管0.2 mL，-70℃冰箱保存。

2.保存时间　一般细菌可存活数年。

1.方法　将新华定性滤纸剪成4 mm×4 mm大小，与1.5mL带盖离心管于消毒灭菌后备用。将需保存的菌种在血琼脂平板上分纯后，用消毒小钳子钳夹上述灭菌后的滤纸片于平板上刮取细菌，每片刮取2～3个菌落，放于离心管内，盖好盖子，再用封口胶布将盖边缘封好，-30℃或-70℃冰箱保存。

2.保存时间　一般细菌可存活一年以上。

1.方法　每只保存管中含20～25个小珠以及缓冲液，使用时将菌落挑入缓冲液中，混匀，将缓冲液吸去，置于-20℃或-70℃冰箱保存。

2.保存时间　一般细菌-20℃保存可存活2～3年，-70℃冰箱保存可存活十年以上。

1.方法　本法适用于使用VITEK全自动微生物鉴定仪的实验室。方法是将鉴定卡标注后直接置于-20℃冰箱保存。复苏时将鉴定卡直接从-20℃移至35℃，待小孔液体完全融化后，以无菌操作用注射器抽出阳性生长孔内的液体点种于合适平板，置于35℃孵箱内24～48 h即可。该法鉴定卡内的细菌反复冻融5次，分离出的细菌效果相同。

2.保存时间　葡萄球菌属、肠杆菌属、念珠菌属细菌存活时间不少于29个月；肠球菌属、黄杆菌属、不动杆菌属细菌存活时间不少于21个月；链球菌属细菌和假单胞菌存活时间不少于10个月。