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临床微生物学检验技术实验指导
1.7.5.2 二、阴道加特纳菌
二、阴道加特纳菌

(一)临床意义

阴道加德纳菌可存在于健康男女及儿童的肛门及直肠中,它也是怀孕妇女阴道内菌群的一部分。阴道加德纳菌是细菌性阴道病(BV)的病原菌之一。该菌与孕妇产前、产后的一系列感染有相关性,但与男性疾病的相关性尚不确定。在患细菌性阴道病妇女的性伴侣的尿道中也可发现此菌。

(二)阴道加特纳菌检验程序

阴道加特纳菌检验程序见图9-2。

(三)目的要求

(1)掌握阴道加特纳菌的生物学特点和检验方法。

(2)熟悉阴道加特纳菌的鉴定要点。

(3)了解细菌性阴道病(BV)的特点。

(四)器材与试剂

1.菌种 阴道加特纳菌。

2.培养基 5%人血琼脂平板,5%兔血琼脂平板,5%羊血琼脂平板,葡萄糖发酵管,麦芽糖发酵管,甘露醇发酵管,棉籽糖发酵管,硝酸盐,葡萄糖蛋白胨水、尿素、明胶、醋酸铅等培养基。

图9-2 阴道加特纳菌检验程序

3.试剂 3%过氧化氢溶液,V-P试剂,10%KOH溶液等。

4.其他 生理盐水,载玻片,盖玻片,pH试纸等。

(五)步骤与方法

1.形态观察

(1)线索细胞检查(湿片法):线索细胞为阴道鳞状上皮细胞,表面覆盖着许多球杆菌(主要是加特纳菌,有时合并厌氧菌),使细胞呈斑点状、颗粒状外观,细胞边缘模糊不清呈锯齿状。当线索细胞占全部上皮细胞的20%以上时,一般认为BV阳性。

(2)革兰染色:正常阴道菌群以乳酸杆菌占优势,可能有少量的链球菌和棒状杆菌。乳酸杆菌为大的革兰阳性杆菌,末端钝圆或平齐,呈单根、链状或栅状排列。细菌阴道病时乳酸杆菌减少或者消失,而其他细菌增多,呈混合菌群。阴道加特纳菌为小的革兰阴性杆菌。革兰染色镜检观察阴道上皮细胞中线索细胞的特异性高于湿片法。

2.培养和菌落观察 在5%人血琼脂平板、兔血琼脂平板上形成0.3~0.5 mm针尖大小的圆形、光滑、不透明的菌落,可见β溶血环;羊血琼脂平板上不溶血。

3.生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖,不分解甘露醇、棉籽糖;水解马尿酸盐、淀粉;肌醇、靛基质、明胶液化、硫化氢、V-P实验阴性;不还原硝酸盐;触酶、氧化酶实验阴性。

4.pH测定 正常成人阴道分泌物呈酸性,pH 4.0左右。在细菌性阴道病时pH通常大于4.5。

5.胺实验 阴道加特纳菌感染时胺实验阳性。

(六)注意事项

(1)pH测定时,pH试纸不要接触到宫颈黏液,因为宫颈黏液的pH(pH 7.0)高于阴道。pH测定的敏感度较高,但特异性低。阴道分泌物污染了月经血、宫颈黏液及患者有滴虫感染时,pH亦可增高。

(2)一般不推荐将分离与BV相关的细菌作为常规方法,因为阴道加特纳菌、厌氧菌及人型支原体的培养结果并不能诊断BV。

(七)思考题

(1)何谓细菌性阴道病?

(2)阴道加特纳菌的鉴定要点主要有哪些?

(王秀青)