1
临床微生物学检验技术实验指导
1.7.3.3 三、鲍曼不动杆菌
三、鲍曼不动杆菌

(一)临床意义

鲍曼不动杆菌广泛分布于自然界、医院环境和健康人的皮肤,易黏附在各类医用材料上,污染的医疗器械及医护人员的手是重要的传播媒介,危重患者及ICU中的患者易感,是医院感染的重要病原菌。主要引起肺炎、尿路感染、皮肤和伤口感染、心内膜炎、脑膜炎和腹膜炎等。

(二)检验程序

鲍曼不动杆菌的检验程序见图7-3。

(三)目的要求

(1)掌握鲍曼不动杆菌的镜下形态、菌落特征和主要生化反应。

(2)熟悉鲍曼不动杆菌的检验程序。

(四)器材与试剂

1.标本 鲍曼不动杆菌或鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌(或其他菌)制成的模拟标本。

图7-3 鲍曼不动杆菌检验程序

2.培养基 血琼脂平板、MAC琼脂平板、KIA培养基、非发酵细菌编码鉴定系列生化管(或MIU、O/F(葡萄糖、麦芽糖、木糖)、硝酸盐、精氨酸双水解酶、枸橼酸盐、赖氨酸脱羧酶微量生化管)等。

3.试剂 革兰染液、氧化酶试剂或纸片、3%过氧化氢溶液、硝酸盐还原试剂、吲哚试剂等。

4.其他 无菌生理盐水、无菌液体石蜡、玻片、恒温孵育箱等。

(五)步骤与方法

1.分离培养 将模拟痰标本分区划线接种于血琼脂平板和MAC琼脂平板,35℃培养18~24 h,观察菌落特征。鲍曼不动杆菌在血琼脂平板上形成光滑、湿润、边缘整齐、灰白色菌落;在MAC琼脂平板上形成无色或淡粉色菌落。

2.涂片染色镜检 挑取疑似鲍曼不动杆菌的菌落,制片、革兰染色,在显微镜下观察,可见革兰阴性球杆菌,常成双排列。

(1)挑取疑似菌落接种于KIA培养基,35℃培养18~24 h。观察生长现象,结果应为K/K--。此步骤既可作为标本的纯培养,也可作为细菌的生化鉴定。

(2)从KIA斜面上取菌,做氧化酶实验,同时接种于O/F、硝酸盐等系列生化培养基,35℃培养18~24 h观察结果,见表7-3。最终根据全面生化反应鉴定。

(3)根据实验室条件可以用全自动微生物鉴定仪鉴定,也可接种于非发酵细菌编码鉴定系列生化管中,35℃培养18~24 h,观察判断生化反应结果。根据实验结果的数码组合,查编码表,即可得到鉴定结果。

表7-3 鲍曼不动杆菌主要生化反应结果

注:O表示氧化型。

(六)注意事项与小结

(1)鲍曼不动杆菌进行革兰染色时不易被脱色,易染成革兰阳性,常被误认为革兰阳性球菌,实验时应注意鉴别。

(2)某些鲍曼不动杆菌在MAC琼脂平板上也会形成粉红色菌落,注意和肠杆菌科形成的乳糖发酵菌落相鉴别。

(七)思考题

(1)鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌均为氧化酶阴性,二者的主要鉴定特征是什么?

(2)显微镜下鲍曼不动杆菌和莫拉菌非常相似,二者如何鉴别?

(张玉妥)