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临床微生物学检验技术实验指导
1.7.3.2 二、嗜麦芽窄食单胞菌
二、嗜麦芽窄食单胞菌

(一)临床意义

嗜麦芽窄食单胞菌广泛分布于自然界,并可定植于人体呼吸道、消化道、泌尿道等部位,当机体有基础性疾病或免疫功能低下时,容易引起医院感染,为条件致病菌。所致感染以肺炎最为常见,还可引起尿道感染、伤口感染、脑膜炎、心内膜炎等。

(二)检验程序

嗜麦芽窄食单胞菌的检验程序见图7-2。

图7-2 嗜麦芽窄食单胞菌检验程序

(三)目的要求

(1)掌握嗜麦芽窄食单胞菌的镜下形态、菌落特征和主要生化反应。

(2)熟悉嗜麦芽窄食单胞菌的检验程序。

(四)器材与试剂

1.标本 嗜麦芽窄食单胞菌或嗜麦芽窄食单胞菌和大肠埃希菌(或其他细菌)制成的模拟标本。

2.培养基 血琼脂平板、MAC琼脂平板、KIA培养基、非发酵细菌编码鉴定系列生化管(或MIU、O/F(葡萄糖、麦芽糖、木糖)、硝酸盐、精氨酸双水解酶、枸橼酸盐、赖氨酸脱羧酶微量生化管)等。

3.试剂 革兰染液、氧化酶试剂或纸片、3%过氧化氢溶液、硝酸盐还原试剂、吲哚试剂等。

4.其他 无菌生理盐水、无菌液体石蜡、玻片、恒温孵育箱等。

(五)步骤与方法

1.分离培养 将模拟痰标本分区划线接种于血琼脂平板和MAC琼脂平板,35℃培养18~24 h,观察菌落特征。嗜麦芽窄食单胞菌在血琼脂平板上形成光滑、湿润、边缘不规则、浅黄绿色菌落。在MAC琼脂平板上呈淡黄色、透明菌落。

2.涂片染色镜检 挑取疑似嗜麦芽窄食单胞菌的菌落,制片、革兰染色,在显微镜下观察,可见革兰阴性杆菌。

3.生化反应

(1)挑取疑似菌落接种于KIA培养基,35℃培养18~24 h。观察生长现象,结果应为K/K--。此步骤既可作为标本的纯培养,也可作为细菌的生化鉴定。

(2)从KIA斜面上取菌,做氧化酶实验,同时接种于O/F、硝酸盐等系列生化培养基,35℃培养18~24 h观察结果,见表7-2。最终根据全面生化反应鉴定。

(3)根据实验室条件可以用全自动微生物鉴定仪鉴定,也可接种于非发酵细菌编码鉴定系列生化管中,35℃培养18~24 h,观察判断生化反应结果。根据实验结果的数码组合,查编码表,即可得到鉴定结果。

表7-2 嗜麦芽窄食单胞菌主要生化反应结果

注:O表示氧化型。

(六)注意事项

(1)嗜麦芽窄食单胞菌O/F实验葡萄糖为氧化型,但反应缓慢,需延长培养时间至48 h。

(2)有些菌株不产生黄色色素,少数菌株也会形成黏液型菌落。

(七)思考题

(1)嗜麦芽窄食单胞菌的主要鉴定特征是什么?

(2)嗜麦芽窄食单胞菌和荧光假单胞菌的主要鉴别依据是什么?