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临床微生物学检验技术实验指导
1.7.2.3 三、奇异变形杆菌
三、奇异变形杆菌

(一)临床意义

变形杆菌属的细菌是肠道的正常菌群,广泛分布于自然界,为条件致病菌。临床分离率最高的是奇异变形杆菌,多引起泌尿系感染,也可引起软组织、血流及呼吸道等部位感染。

(二)奇异变形杆菌的检验程序

奇异变形杆菌的检验程序见图6-3。

图6-3 奇异变形杆菌的检验程序

(三)目的要求

(1)掌握变形杆菌属细菌的生物学特性及其培养特性。

(2)熟悉奇异变形杆菌生化反应及鉴定依据。

(四)器材与试剂

1.示教片 变形杆菌鞭毛染色片。

2.菌种 普通变形杆菌、奇异变形杆菌。

3.培养基 普通平板、血琼脂平板、SS琼脂平板、MAC琼脂平板、KIA及MIU培养基、蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水、枸橼酸盐、尿素培养基等。

4.试剂 革兰染液、鞭毛染液、V-P试剂(甲液、乙液)、10%三氯化铁溶液。

5.其他 载玻片、接种环、酒精灯、显微镜等。

(五)步骤与方法

1.分离培养 将奇异变形杆菌分别接种于MAC琼脂平板、SS琼脂平板、血琼脂平板、普通平板,在血琼脂平板、普通平板上,经35~37℃培养18~24 h,可观察到变形杆菌的迁徙生长现象。在SS琼脂平板上形成中等大小、圆形不发酵乳糖的无色菌落,产硫化氢者菌落中心为黑色;在MAC琼脂平板上形成圆形、扁平、无色半透明菌落。

2.涂片染色镜检

(1)革兰染色:奇异变形杆菌为革兰阴性杆菌,两端钝圆,有明显多形性,在一定条件下可形成球杆状或丝状,无芽孢和荚膜。

(2)取奇异变形杆菌进行鞭毛染色,油镜下观察可见有周身鞭毛。

3.生化反应 将普通变形杆菌和奇异变形杆菌分别接种于KIA培养基、MIU培养基、血琼脂平板、苯丙氨酸培养基、鸟氨酸培养基、七叶苷培养基、葡萄糖蛋白胨水中,经35~37℃培养18~24 h,观察实验结果,结果见表6-2。

表6-2 普通变形杆菌和奇异变形杆菌的主要生化反应结果

注:A表示酸;K表示碱。

(六)注意事项

进行苯丙氨酸酶实验时接种细菌量要多,否则易出现假阴性反应。加入三氯化铁后产生的绿色会很快褪去,必须在5 min内做出判断。

(七)思考题

(1)试述变形杆菌的迁徙生长现象。

(2)简述外-斐反应的原理。