五、莫拉菌属

（一）临床意义

莫拉菌属细菌可引起结膜炎、中耳炎、鼻窦炎、支气管炎、心内膜炎、肺炎、脑膜炎、菌血症等，其中最常见的菌种是卡他莫拉菌，卡他莫拉菌可存在于健康人群的上呼吸道，对人体不致病，也可导致中耳炎、鼻窦炎、慢性阻塞性肺炎，在免疫抑制和ICU的患者可导致菌血症，是社区获得性肺炎的主要病原体之一。

（二）莫拉菌属的检验程序

可以从痰、分泌物、鼻咽拭子、脑脊液、血液等标本中找到莫拉菌属，莫拉菌属的检验程序见图5-12。对于不同的临床样本，分别采取相应的处理方式。

图5-12　莫拉菌属的检验程序

（三）目的要求

（1）掌握卡他莫拉菌的鉴定要点。

（2）熟悉莫拉菌属的形态和培养特性。

（四）器材与试剂

（1）菌种：卡他莫拉菌。

（2）培养基：巧克力琼脂平板，血琼脂平板，葡萄糖发酵管，麦芽糖发酵管，蔗糖发酵管，硝酸盐培养基，DNA酶琼脂平板等。

（3）试剂：革兰染液，氧化酶试剂，硝酸盐还原剂，1 mol/L盐酸等。

（4）其他：二氧化碳培养箱、光学显微镜和镜油、载玻片、接种环、接种针、酒精灯、无菌棉拭子、无菌吸管、记号笔等。

（五）步骤与方法

1.分离培养　将上述样本以分区划线方式分别接种于血琼脂平板上、巧克力琼脂平板及中国蓝琼脂平板上，置于35℃、5%～10%二氧化碳培养箱中培养24～48 h，观察、记录细菌生长情况及菌落形态特征。

卡他莫拉菌在血琼脂平板和巧克力琼脂平板上为珍珠色、光滑、圆形、凸起、直径为1～1.5 mm的不透明的偏干燥菌落（图5-13），在中国蓝琼脂平板上不生长。如用接种环从卡他莫拉菌菌落边缘向前推移菌落，整个菌落可在平板表面完整移动，似推桌球样。用接种环从卡他莫拉菌菌落中央向下压菌落，可将菌落压成不规则的几小块，该菌极易乳化。

2.涂片染色镜检　将菌落涂片，革兰染色，油镜下观察细菌的染色性及形态特征并记录。

卡他莫拉菌为革兰阴性双球菌，菌体呈双肾形或咖啡豆形，多成双排列，凹面相对，见图5-14。与淋球菌的菌落形态相似：湿润、透明，但菌落边缘光滑，不像淋球菌似要长“角”样，且较淋球菌菌落稍大。

3.生化反应

1）氧化酶实验　挑取待检菌进行氧化酶实验，具体原理、方法及结果判断见奈瑟菌属中相关内容，莫拉菌属氧化酶阳性。

2）DNA酶实验　挑取待检菌进行DNA酶实验，具体原理、操作方法及结果判断见葡萄球菌属中相关内容。卡他莫拉菌DNA酶实验为阳性，其他莫拉菌属DNA酶实验为阴性。

图5-13　卡他莫拉菌在血琼脂平板上的菌落形态

图5-14　卡他莫拉菌在痰涂片革兰染色中形态

3）硝酸盐还原实验　挑取待检菌进行硝酸盐还原实验，具体原理、操作方法及结果判断见奈瑟菌属中相关内容。卡他莫拉菌硝酸盐还原实验为阳性。

4）葡萄糖、麦芽糖、蔗糖发酵实验

（1）原理：不同细菌含有发酵不同糖类的酶，分解糖的能力各不相同，产生的代谢产物也随细菌种类而异。观察细菌能否分解各类糖，是否产酸而使培养基变色。

（2）方法：挑取可疑菌落做葡萄糖、麦芽糖、蔗糖发酵实验，将葡萄糖、麦芽糖、蔗糖生化发酵微管放入35℃培养箱中培养过夜，第二天观察实验结果并记录。

（3）结果判断：若细菌能分解糖类产酸，则指示剂呈酸性变化，如发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖则使培养基变为黄色者为阳性，不变色者为阴性。莫拉菌属不分解糖类。

卡他莫拉菌和脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的主要生化反应鉴别要点见表5-7。

表5-7　卡他莫拉菌和奈瑟菌的主要生化反应

（六）注意事项与小结

（1）呼吸道标本、鼻咽拭子等标本需要用选择性培养基进行分离培养，并以分区划线方式接种。

（2）挑取待检菌进行氧化酶实验时，其注意事项见奈瑟菌属中相关内容。

（3）所有操作应在超净工作台或生物安全柜中进行。

（七）思考题

（1）卡他莫拉菌的鉴定要点有哪些？

（2）卡他莫拉菌与脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的主要鉴别要点有哪些？

（帅丽华）