1.空腔器官切开探查 胆管、胃肠道内肿瘤为了确定其性质，可切开腔道直接探查，如肠道内的肿瘤是息肉、腺瘤还是癌肿，切开查明后，可以确定手术切除的范围。胆道的肿瘤，如壶腹部肿瘤，在切开胆总管或十二指肠后才能明确肿瘤性质。这种术中探查方法很易造成手术野污染和肿瘤的扩散，不宜常规应用。

2.肿块穿刺细胞学检查 如为囊性肿块，穿刺囊液一般可以明确性质，如胰腺囊肿、血肿、黏液性囊肿、胆总管囊肿、畸胎瘤等。但诊断为卵巢巧克力囊肿者，穿刺应视为禁忌。实质性器官性质未定时，也可以直视下穿刺做细胞学检查，以供诊断和选择手术术式的参考。但要防止囊液外渗污染手术野和肿瘤细胞扩散。

3.手术中活组织检查

（1）以诊断肿瘤性质为目的：如胰腺肿瘤术前不易确定，是否选择胰十二指肠切除术，很大程度上取决于术中胰头肿块的活检和冷冻切片的结果。此时一般要切得深一些，但需防止切断主胰管。为此需先游离胰头十二指肠，用手在胰头下背部将肿块抵向前方，最好切取标本的方向要和主胰管平行，在肿块的边缘处切取。因胰腺肿块活检并发症多，故常有人用粗针抽吸活组织病检或穿刺细胞学检查来代替术中活检。

（2）以确定切缘癌残留为目的：贲门、胃、十二指肠、小肠、结肠和直肠癌切除时，切除范围是否充分、切缘断端是否有癌浸润备受术者关注，因为它关系到手术疗效，故切除标本的病理检查很必要，有的医院将其列为常规。如用消化道自动吻合器吻合，切下的环状管壁也要做病理检查。

断端癌残留的病理检查，要求快速准确，冷冻切片方法一般在30min内即可完成，但有时不能下肯定的全面诊断。有一种方法是酶联免疫法，可在12min内诊断出胃癌来。

4.区域淋巴结染色 可用微粒活性炭（CH40）作染色剂，术前2d经胃镜黏膜下注射、术中经胃浆膜下注射或淋巴结内注射三种方法注入。一般在15min左右即可看到淋巴结变黑，淋巴结染色。由于能染色的淋巴管和淋巴结都是没有被癌细胞堵塞的，以此作为切除标志尚有疑问，但如属癌转移的淋巴结，即使不被染色肉眼也可区分出来。

5.术中超声波诊断

（1）肝脏手术术中超声应用范围：①发现5cm以下的小肝癌；②显示肝内管道的解剖关系和肿瘤位置关系，指导手术切除；③发现门静脉、肝管内癌栓；④肝癌复发再次手术；⑤其他内脏癌的肝转移；⑥肝肿瘤B超引导术中穿刺；⑦指导微波针刺入，局部栓塞、化疗、乙醇注射等介入治疗。

（2）胆道手术术中超声应用范围：①发现肝内和肝外胆管结石，残余结石；②了解肝内外胆管肿瘤大小、范围及与肝、胰的关系，决定手术方案；③了解胆囊癌的壁内和邻近肝组织的浸润程度、范围；④发现肝内外胆管梗阻的原因及部位；⑤寻找粘连、位置变异的胆管；⑥发现胆道出血的部位。

（3）胰腺手术术中超声应用范围：①胰岛细胞瘤1cm以下者的发现；②检查胰癌的大小、部位、范围，与门静脉、肠系膜静脉、腔静脉的关系；③囊肿定位、厚度、最低位；④指导脓肿的引流；⑤慢性胰腺炎时确认胰管的扩张或狭窄、胰石等。

（4）胃癌术中超声应用范围：①确认肿瘤界线；②确认深度范围；③与周围组织的关系（有无浸润、粘连）；④有无肝转移等。