思考题

1. 原核生物DNA的复制体系有哪些酶及蛋白质成分?各有何作用?
2. 真核生物的DNA复制如何实现高速及保真性?
3. 端粒有何作用?为何有些肿瘤的发生与端粒有关?
4. 冈崎片段合成结束时是如何连接的?
5. DNA聚合酶、拓扑酶和连接酶都催化3′,5′-磷酸二酯键的生成,各有何不同?
6. 阐述逆转录的基本过程和逆转录现象发现的重大研究价值。
A2型题
【题干】
引起AIDS的HIV等逆转录病毒,其遗传信息是以 RNA存储的。逆转录酶可以合成病毒基因组的DNA拷贝。脱氧胸腺嘧啶核苷类似物AZT被用于AIDS的治疗,在其糖基的3′位上有一个叠氮基团可以被磷酸化,与dTTP竞争掺入到逆转录中。一旦被掺入,便会终止链的合成。
【问题与解析】
1. 延伸链被终止的原因是
A. AZT没有游离的3′-OH
B. dTTP无法加入到延伸链中
C. 类似物不能与RNA形成氢键
D. 类似物导致延伸链扭曲,抑制逆转录酶
E. AZT的存在可以抑制逆转录酶的校对功能
答案:A
解析:AZT糖基的3′位上为叠氮基团,不能提供3′-OH进而添加下一个核苷酸。B:AZT竞争性抑制dTTP,并不能消除dTTP。C:叠氮基团的存在不影响氢键形成。D:不存在这种情况。E:逆转录酶没有校对功能。
2. DNA聚合酶的校对功能使AZT干扰细胞DNA复制的几率比干扰病毒复制要低得多,这样就为治疗提供了可能。这种维持DNA合成保真性的校对活性的正确叙述是
A. 仅在合成完成之后出现
B. 存在于原核细胞而真核细胞中没有
C. 在原核细胞中是独立于聚合酶活性之外的
D. 需要一种从DNA聚合酶中分化出来的酶
E. 是DNA聚合酶的3′(5′核酸外切酶功能
答案:E
解析:A:合成完成后的校对活性出现在DNA损伤修复过程。B:真核生物的DNA-polδ和DNA-polε的3′(5′核酸外切酶活性都很强,可以在复制过程中辨认并切除错配的碱基,对复制错误进行校正。C:原核细胞DNA polⅠ具有校对功能。D:大多数DNA pol是多功能的,本身具有校对功能。E:此活性可将新添加的错配碱基移除。