21.2.8 (八)蛋白质相互作用研究技术

(八)蛋白质相互作用研究技术

常用的技术:酵母双杂交、各种亲和分析(亲和色谱、免疫共沉淀等)、荧光共振能量转换效应分析、噬菌体显示系统筛选等。

酵母双杂交技术:

1.原理 如果将酵母转录激活因子GAL4分子的DNA结合区(BD)和促进转录的活性区(AD)分开,两者不能表现出对下游基因表达的激活作用。如果BD和AD分别融合了具有配对相互作用的两种蛋白质分子后,就可以依靠所融合的蛋白质分子之间的相互作用而恢复对下游基因的表达激活作用。

2.应用 分析已知蛋白质之间的相互作用。

对蛋白质功能域的分析。

分析未知蛋白质相互作用。

绘制蛋白质相互作用系统图谱。

在药物设计中的应用。