21.2.3 (三)核酸序列分析

(三)核酸序列分析

1.化学裂解法(Maxam-Gilbert法) 某些化学试剂使DNA链在1个/2个碱基处发生专一断裂,精确控制反应强度,不同分子在不同位点断裂,获得一系列大小不同的DNA片段→电泳→放射性核素标记DNA的5′末端→放射自显影→分析序列。

2.DNA链末端合成终止法(Sanger法) 利用4种2′,3′-双脱氧核苷酸代替部分dNTP作为底物进行合成反应,一旦掺入ddNTP,合成反应终止;用ddNTP:dNTP适当,就可得到不同部位终止的不同片段的DNA→分析序列。