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21.2.2 （二）PCR技术

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2．反应体系　模板DNA、特异性引物、DNA聚合酶、dNTP、含Mg2＋的缓冲液。

3．步骤

pagenumber_ebook=83,pagenumber_book=83 变性：95℃，双链打开。

pagenumber_ebook=83,pagenumber_book=83 退火：降低温度，低于Tm5℃，引物与模板结合。

pagenumber_ebook=83,pagenumber_book=83 延伸：温度缓慢升到72℃，新DNA链合成。

pagenumber_ebook=83,pagenumber_book=83 上述3步循环进行。

得到2nDNA片段。

4．PCR的主要用途　目的基因的克隆；基因的体外突变；DNA和RNA的微量分析；DNA序列测定；基因突变分析。

5．重要的PCR衍生技术　反转录PCR技术（RT－PCR）；原位PCR技术（ISP）；实时PCR技术。