21.2.1 (一)分子杂交与印渍(迹)技术

(一)分子杂交与印渍(迹)技术

1.分子杂交 DNA变性→双链解开→复性→不同的DNA/RNA混合→碱基配对→杂化双链。

2.印渍技术 是将凝胶中分离的生物大分子转移(印迹)或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。

印渍(迹)技术的类别及应用:

DNA印渍技术(Southern blotting),常用于基因组DNA分析。

RNA印渍技术(Northern blotting),用于检测已知的特异mRNA的表达水平。

蛋白质的印渍分析(Western blotting):免疫印渍技术用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析等。

斑点印渍(dot blotting)、原位杂交(in situ hybridization)、DNA点阵(DNA array)、DNA芯片(DNA chip)。

3.探针技术(probe) 是将一小段已知序列的多聚核苷酸用放射性核素、生物素或荧光染料标记它的末端或全链就可作为探针。