三、难点解疑

1．为什么从高等生物基因组中克隆的完整基因在大肠杆菌中不能正确表达？

解答：因为真核生物与原核生物不仅在细胞和组织多样性方面有很大的差别，而且在基因结构特点上也有很大的不同，这样导致了真核生物与原核生物在基因表达调控上有很明显的区别。如真核基因启动子不能被原核RNA聚合酶识别，转录不能正确起始；从真核基因组克隆的完整基因含有内含子，大肠杆菌中没有转录后剪接系统，且缺乏适当的翻译后加工机制，表达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰。

2．基因组文库与cDNA文库一样吗？

解答：不一样。前者是天然存在于组织或细胞内的染色体DNA，包括基因编码、非编码序列信息；后者是人工经mRNA反转录而得到的，主要反映基因的编码序列信息，不包括非编码序列信息。