（二）参与DNA复制的酶或蛋白质

1．解螺旋酶

DnaB蛋白：解螺旋。

DnaA蛋白：辨认。E．coli上称为oriC的复制起始点。

DnaC蛋白：辅助解螺旋酶DnaB，使其在起始点上结合并打开双链。

2．DNA拓扑异构酶（作用于全过程）　分为酶Ⅰ、Ⅱ。对DNA分子的作用既能水解，又能连接磷酸二酯键。

酶Ⅰ：切断DNA双链中一股，使DNA解链旋转不致打结，适当时候又把切口封闭，使DNA变为松弛。反应不需ATP。

酶Ⅱ：①无ATP时，切断处于超螺旋状态的DNA分子双链某一部位，使超螺旋松弛，2条链都切断；②有ATP时，断端在拓扑酶催化下恢复连接松弛状态的DNA又进入负超螺旋状态；③复制末期：母链与子链互相缠绕形成打结或连环。

3．SSB　复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整；作用时表现协同效应，即不断地结合、脱离，并非沿模板向前移动。

4．引物酶（primase）　即DnaG蛋白，在模板的复制起始部位催化互补碱基的聚合，形成短片段的RNA。它与DnaB共同起作用。

5．DNA聚合酶（DNA－pol）

原核生物DNA－pol：有3种DNA－polⅠ、Ⅱ、Ⅲ；分子个数比400∶40∶20，Ⅲ的比活性＞Ⅰ的10倍以上。

DNA－polⅢ：在复制延长中催化新链核苷酸的聚合。由10种亚基组成，不对称二聚体。αεθ为核心酶具有聚合及3′→5′外切酶活性；β亚基夹住模板链，使酶滑动。

DNA－polⅡ：在无Ⅰ、Ⅲ时起作用；

DNA－polⅠ：单一肽链大分子，18个α－螺旋组成。只能催化延长20个核苷酸左右，主要是对复制中的错误进行校读，对引物去除后的空白、修复中出现的空隙进行填补。

★★★该酶水解后得到两个片段：

A→F　323个AA，有5′→3′核酸外切酶活性。

G→R及C末端　604个AA，大片段（Klenow fragment）具有DNA聚合酶活性，3′→5′核酸外切酶活性，实验室合成DNA的常用工具酶。

真核生物的DNA－pol：至少5种α、β、γ、δ、ε；其中DNA－polα、δ在复制延长中起作用。

α　只能延长数百个核苷酸→延长随从链

β　只在没有其他DNA－pol时起作用

γ　在线粒体中

δ　延长领头链

ε　与原核生物的DNA－polⅠ相似，校读、修复、填补缺口

6．DNA连接酶　连接碱基互补基础上的双链中的单链缺口，在修复、重组、剪接中起缝合缺口作用。不能连接单独存在的DNA单链或RNA单链。

比较DNA－pol、topo酶、ligase、引物酶的异同点。

相同点：均催化生成3′，5′－磷酸二酯键。

不同点：DNA－pol引物或延长中的新链

topo酶：切断、整理后的两链（改变拓扑状态）

ligase：复制中不连续的两单链（不连续→连续性）

引物酶：2个单核苷酸缩合开始延长链（从头开始）