三、难点解疑

1．核酸复性时是否存在紫外吸收值的变化？

存在。因为DNA变性后双链已解开，碱基完全暴露，这时260nm处的紫外吸收值最大。当DNA复性时，解开的单链又恢复双链结构，碱基配对，隐藏在双链内部，因此260nm处的紫外吸收值逐渐降低，最后降至变性前的水平。

2．DNA中碱基摩尔比规律（A＝T，G＝C）仅适用于双链DNA，而不适用于单链DNA，对吗？

对。因为单链DNA不可能保持A＝T，G＝C。只有DNA双链状态时才遵循Chargaff规则。

3．用1mol／L的KOH溶液分别水解DNA和RNA，得到的产物相同吗？

不同。RNA的磷酯键易被碱水解，产生核苷酸。DNA的磷酯键不易被碱水解。这是因为RNA核糖的C′－2上有羟基，在碱作用下形成磷酸三酯。后者极不稳定，随即水解，产生核苷2′，3′－环磷酸酯，后者再继续水解产生2′－核苷酸和3′－核苷酸。而DNA分子中脱氧核糖的C′－2上没有羟基，不能形成碱水解的中间产物，故对碱有一定的抗性。

4．为什么DNA制品一般应保存在含盐的缓冲液中？

因为一般说离子强度较低的介质中，DNA的融解温度较低，而且融解温度范围较宽。而在较高的离子强度时，DNA的Tm值较高，且融解温度范围较窄。因此DNA制品不应保存在极稀的电解质溶液中。

5．两种浓度相同，但来源不同的DNA，复性时间一样吗？

不一样。因为复性时间的长短不仅与DNA的浓度有关，还与DNA的片段长度有关。所以两种浓度相同，但来源不同的DNA复性时间长短与其基因组的大小有关。

6．DNA的重复序列越多，复性越快，对吗？

对。DNA复性时间长短与其序列的重复性有关。