1.2.4 (四)蛋白质的理化性质

(四)蛋白质的理化性质

1.蛋白质的两性电离

蛋白质的等电点:当蛋白质溶液处于某一pH值时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,净电荷为零,此时溶液的pH即为pI。

溶液的pH>pI,蛋白质带负电荷,反之则带正电荷。体内大多数蛋白质pI为5.0,在体液环境下蛋白质带负电。

2.蛋白质的胶体性质

直径为1~100nm胶粒;

蛋白质分子表面为亲水基团形成一层水化膜——阻断蛋白质颗粒的相互聚集;

蛋白质胶粒表面带电荷——防止沉淀析出。

3.蛋白质的变性、沉淀和凝固

蛋白质的变性(denaturation):在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失。

实质:二硫键和非共价键被破坏,一级结构不改变。

变性后,溶解度降低,黏度增加,结晶能力消失,易被蛋白酶水解。

变性因素有:加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂。

蛋白质沉淀:肽链融汇相互缠绕继而聚集,从溶液中析出。

凝固作用:加热使变性蛋白质由絮状变为坚固的凝块。

变性、沉淀和凝固的关系:变性不一定沉淀,沉淀不一定变性;变性不一定凝固,凝固一定变性。

4.蛋白质的紫外吸收 蛋白质的OD280与其浓度成正比关系,可做蛋白质定量测定。

5.蛋白质的呈色反应

茚三酮反应:与蛋白质水解后产生的氨基酸反应。

双缩脲反应:肽键在稀碱溶液中与CuSO4共热,呈现紫色或红色;氨基酸无此反应,蛋白质水解加强时双缩脲呈色深度下降,故可检测蛋白质水解程度。