4.4 第十四章  RNA的合成

第十四章RNA的合成

(一)教学要求

在知识传授方面,通过本章节的学习,使学生掌握转录、不对称转录、模板链、编码链的概念,原核生物RNA聚合酶全酶,核心酶的组成和作用,掌握真核生物RNA聚合酶的主要类型和产物;掌握原核转录起始,真核基因的断裂基因、内含子、外显子的概念,mRNAtRNA转录后的加工方式;掌握复制与转录的异同。熟悉RNA聚合酶与模板辨认结合、真核转录因子、转录前起始复合物、延长及原核两类转录的终止过程;熟悉内含子剪接机制,rRNA的加工过程。了解核酶结构和作用特点。

在能力培养方面,让学生初步了解根据转录和翻译过程特点设计药物的原理;自主学习能力的培养。

在核心素养方面,在学习转录的知识中,对学生进行实事求是,尊重科学,依靠科学的教育。形成从现象到本质,简单到复杂,感性到理性的认识方法。通过知识和拓展阅读培养学生对知识的批判和求真意识。

(二)知识点提示

细胞中的RNA是以DNA为模板合成的。这种由DNARNA传递信息的过程,称为转录。RNA的转录需要多种成分参与,包括DNA模板,四种三磷酸核糖核苷(NTP),RNA聚合酶及某些蛋白质因子等,总称为转录体系。

RNA合成需要DNA做为模板,根据碱基配对规律,按照DNA模板中脱氧核苷酸的排列顺序,合成相应核苷酸顺序的RNA分子,即模板DNA分子中的AGCT分别对应合成RNA分子中的UCGA。由此,模板DNA的结构决定着转录RNA的结构,从而将遗传信息传递给RNAmRNA)。

细胞内DNA的双链中只有一条链可以作为模板转录合成RNA,此链称为模板链。转录本RNA的核苷酸序列与DNA模板链序列互补。DNA的另一条链无转录功能,称为编码链。因此,与DNA复制不同,转录是不对称的(即只有一条链转录,而不是象复制中两条链均可以用做模板),这是转录的重要特点。需要指出的是,在一个包含多个基因的双链DNA分子中,各个基因的模板链并不是全在同一条链上,在某个基因节段以某一条链为模板转录,而在另一个基因节段则以另一条链为模板。

转录是在DNA模板上的特定部位开始的。转录起始点之前有一段核苷酸序列组成的启动子,是RNA聚合酶的识别和结合部位。启动子在转录的调控中起着重要作用。在DNA模板上,从起始点顺转录方向的区域称为下游,从起始点开始与转录方向相反的区域称为上游。在转录的DNA模板上,除了启动子外,还有停止转录作用的部位,称为终止信号。能转录出mRNA,然后指导蛋白质合成的基因,称为结构基因。可见,转录过程是在模板的一定范围内进行的,称为转录单位。

DNA指导的RNA聚合酶是转录过程中最重要的酶,它催化核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键,合成RNA链。已知大肠杆菌的RNA聚合酶由五个亚基组成,全酶去除σ亚基后,称为核心酶(ααββ')。σ因子的作用是辨认DNA模板上转录的启动子,协助转录的起始。核心酶的作用是延长RNA链。某些药物如利福霉素或利福平能特异抑制细菌的RNA聚合酶,从而发挥药理作用。真核细胞中有三种RNA聚合酶。它们分别催化不同类型RNA的合成。

转录过程大体分为三个阶段,即起始、RNA链的延长和终止。与DNA复制不同的是:转录不需要引物;碱基配对的规律是U代替T。转录时RNA链的合成也有方向性,即从5'→3'端进行,这一点与复制类似。

值得注意的是,转录生成的是RNA初级产物,即RNA的前体。真核细胞转录的前体RNA均要经过一系列酶的作用,进行修饰加工,才能成为具有生物功能的成熟RNA,这个过程称为转录后加工。mRNA的加工具有特别重要的意义,主要包括:⑴剪接:真核生物的结构基因,由若干编码序列和非编码序列相间排列而成,转录编码蛋白质的序列称为外显子,转录非编码蛋白质的序列称为内含子。转录后的hnRNA需经过剪接、去除内含子部分,再将外显子部分连接起来。该过程有多种酶和其他活性物质参与(如snRNA,UsnRNP)。⑵5'端加:真核细胞成熟的mRNA5'末端均有一个m7GpppNmp结构,称为。⑶3'末端加尾:mRNA前体分子3'末端在多聚A聚合酶的催化下,由ATP聚合形成多聚A尾。⑷化学修饰:mRNA中有少量稀有碱基是经转录后化学修饰形成的(如碱基被甲基化)。⑸RNA编辑:某些mRNA转录后还需插入、删除和取代某些核苷酸残基,才具有翻译功能,并改变了原有DNA模板上的遗传信息。虽然mRNA,tRNA rRNA的具体加工过程不同,但不外乎是链的剪切、拼接、末端添加核苷酸和碱基修饰等几种基本方式。

(三)教学内容

第一节  原核生物转录的模板和酶  转录模板(不对称转录、模板链、编码链),RNA聚合酶的组成及功能,RNA聚合酶与模板的辨认结合机制。

第二节  原核生物的转录过程  原核生物的转录过程中RNA聚合酶不同亚基的具体作用及机制。

第三节  真核生物RNA的合成 真核生物RNA聚合酶的种类及功能,真核生物的具体转录过程及与原核生物转录过程的比较。

第四节  真核生物前体RNA的加工和降解 真核生物新生mRNA的剪接、修饰过程和机制,rRNA的转录后加工过程和机制;tRNA的转录后加工过程和机制;核酶和小RNA干扰现象;真核RNA在细胞内的降解有多种途径。

(四)思考题

1. 何谓不对称转录

2. 简述转录的过程

3. 转录后加工修饰的过程包括哪些?

4. 简述掌握复制与转录的异同。