三、DNA复制的条件:
1.底物:dATP,dGTP,dCTP,dTTP。
2.模板(template):以亲代DNA的两股链解开后,分别作为模板进行复制。
3.引发体和RNA引物:引发体由引发前体与引物酶(primase)组装而成。引发前体是由若干蛋白因子聚合而成的复合体;引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP)。
4.DNA聚合酶(DNA dependent DNA polymerase, DDDP):
(1)种类和生理功能:在原核生物中,目前发现的DNA聚合酶有三种
pol Ⅰ主要是去除引物、填补缺口以及修复损伤。
pol Ⅱ参与SOS修复过程。
pol Ⅲ与DNA复制功能有关。
在真核生物中,目前发现的DNA聚合酶有五种。其中,参与染色体DNA复制的是pol α(延长随从链)和pol δ(延长领头链),参与线粒体DNA复制的是pol γ,polε与DNA损伤修复、校读和填补缺口有关,pol β只在其他聚合酶无活性时才发挥作用。
(2)DNA复制的保真性:
①遵守严格的碱基配对规律;
②在复制时对碱基的正确选择;
③对复制过程中出现的错误及时进行校正。
5.DNA连接酶(DNA ligase):DNA连接酶可催化两段DNA片段之间磷酸二酯键的形成,而使两段DNA连接起来。
6.单链DNA结合蛋白(single strand binding protein, SSB):这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作用为:
①稳定单链DNA,便于以其为模板复制子代DNA;
② 保护单链DNA,避免核酸酶的降解。
7.解螺旋酶(unwinding enzyme):是用于解开DNA双链的酶蛋白,每解开一对碱基,需消耗两分子ATP。
8.拓扑异构酶(topoisomerase):拓扑异构酶可将DNA双链中的一条链或两条链切断,松开超螺旋后再将DNA链连接起来,从而避免出现链的缠绕。