不可逆抑制剂与可逆性抑制剂相比，在EGFR的结合位点是相同的，都是作用于EGFR的ATP结合位点，不同点在于不可逆的EGFR抑制剂可与Cys⁷⁹⁷残基发生共价结合，产生不可逆的抑制酪氨酸激酶的活性，使其在细胞内ATP浓度较高时，依然持续与目标靶点结合阻止信号通路。该类药物的结构是在第一代药物4-苯胺基喹唑啉的6位引入类丙烯酰胺基（α,β不饱和基团），使该基团与EGFR的Cys⁷⁹⁷残基的巯基发生Michael加成，从而使其与受体共价结合，不可逆阻止EGFR的磷酸化过程。

第二代药物主要有阿法替尼（afatinib）、来那替尼（neratinib）、卡奈替尼（canertinib）、达可替尼（dacomitinib）、培利替尼（pelitinib）和吡咯替尼（pyrotinib）等。代表药物阿法替尼，是新一代口服小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI），是首个不可逆ErbB家族阻滞剂，可作用于包括EGFR在内的整个ErbB家族。阿法替尼会不可逆地与EGFR结合，从而达到关闭癌细胞信号通路、抑制肿瘤生长的目的。适用于EGFR基因敏感突变的局部晚期或转移性NSCLC，既往未接受过EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗以及含铂化疗期间或化疗后疾病进展的局部晚期或转移性鳞状组织学类型的NSCLC。

拥有Michael受体结构（类丙烯酰胺结构）的第二代EGFR抑制剂很好的解决了第一代可逆性抑制剂导致的耐药突变，能不可逆与Cys⁷⁹⁷残基共价结合，从而对EGFR-T790M突变体依然有较好的抑制作用。但由于第二代抑制剂的不可逆抑制作用未能在突变型与野生型EGFR中表现出选择性，在治疗剂量下对野生型EGFR 抑制作用较强，从而导致皮肤红斑、腹泻等严重不良反应。目前仅阿法替尼作为治疗药物用于临床，其他药物的剂量毒性限制了此类化合物的广泛应用。

                                                     图2 第二代EGFR非可逆性抑制剂及其母核结构