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艾滋病性病防治指南
1.4.4.1.3 三、HIV-1抗原检测
三、HIV-1抗原检测

常规试验为HIV-1P24抗原检测,又分定性和定量检测。样品可采用血清、血浆或病毒培养上清液,方法为ELISA抗体夹心法。

(一)定性检测

1.筛选试验 按照试剂盒说明书提供的标准判断有反应或无反应。

2.确证试验 是P24抗原的中和试验,用于排除筛选试验的假阳性。待检样品先与中和剂(P24抗原的抗体)共同孵育,如果样品中存在P24抗原,中和抗体将与之结合形成复合物,而不能与固相载体上的捕获抗体结合。用这样处理过的样品重复筛选实验的步骤,同时做一孔未中和的原始样品对照,将中和与未中和孔的OD值进行比较,如果中和孔的OD值下降50%以上,认为样品中的P24抗原是真正的阳性;如果中和孔没有出现OD值的下降,认为P24抗原的反应性可能是假阳性,需要做RNA检测或随访做进一步确证。

(二)定量检测

将P24抗原的标准物质稀释成包含0.0和125pg/ml 2个浓度在内的6个不同浓度的系列标准,进行检测。以横坐标为P24抗原的浓度(pg/ml),纵坐标为OD值,绘制出标准曲线。测出未知标本的OD值以后,在标准曲线上查出抗原的浓度。如果未知标本的OD值超出标准曲线上最高抗原浓度的OD值,则需用正常人血清将标本稀释以后再行检测。

(三)结果报告和解释

HIV-1P24抗原筛选试验有反应的标本必须经过中和试验确证以后才能判断阳性或阴性;HIV-1P24抗原阳性仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1P24抗原阴性结果不能排除HIV感染。监测病程进展或抗病毒治疗效果应进行HIV -1P24抗原的定量检测。