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艾滋病性病防治指南
1.4.4.1.1 一、样品采集和处理
一、样品采集和处理

(一)血液

1.抗凝全血 消毒局部皮肤,用含有抗凝剂的真空采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,移至加有抗凝剂的试管中,轻轻颠倒混匀6~8次。

2.末梢全血 消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或示指。1岁以下儿童采用足跟部)。用采血针刺破皮肤,用无菌纱布擦掉第1滴血,然后收集滴出的血液。

3.血浆 将采集的抗凝全血1 500~3 000r/min离心15min,上层即为血浆。

4.血清 用一次性注射器(或真空采血管)抽取5~10ml静脉血,室温下自然放置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用1 500~3 000r/min离心15min,上层即为血清。

5.淋巴细胞富集液 将采集的抗凝全血1 500~3 000r/min离心15min,血浆层下即为淋巴细胞富集液。

6.外周血淋巴细胞(PBMC) 使用淋巴细胞分离液,进行密度梯度离心,吸出PBMC层。

(二)滤纸干血斑(DBS)

(1)将采集的各种血液样品制备成滤纸干血斑,最常用的是用抗凝全血、外周全血和血浆制备滤纸干血斑。

(2)用移液器吸取100μl抗凝全血(或血浆)样品,对准滤纸印圈的中心处,将样品滴在滤纸上,或将穿刺后自皮肤伤口流出的外周全血直接滴加在滤纸印圈的中心处。

(3)在室温下自然干燥至少4h(潮湿气候下至少干燥24h),不要加热或堆叠血斑,切勿与其他界面接触。

(4)血斑充分干燥后,将其放入密封袋中,避免血斑之间的相互污染,同时放入干燥剂及湿度指示卡,密封包装。

(三)尿液和唾液

1.尿液 使用清洁的容器收集尿液。女性应避开月经期。尿液样品可以在2~8℃下存放。

2.唾液 使用试剂盒提供的容器收集唾液样品。

(四)样品的保存

(1)用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品,1周内进行检测的可存放于2~8℃,1周以上应存放于-20℃以下。

(2)用于核酸检测的血浆和血细胞样品4日内进行检测的可存放于4℃,3个月以内应存放于-20℃以下;3个月以上应置于-70℃以下。

(五)样品运输要求

(1)应符合生物安全要求,要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。

(2)采用3层容器对样品进行包装,随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息,放置在洁净区域。

1)第1层容器:通常使用试管,试管上应标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。

2)第2层容器:容纳并保护第1层容器,可以装若干个第1层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒。

3)第3层容器:容纳并保护第2层容器的运输用外层包装箱。

4)用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送;用于CD4T细胞和CD8T细胞测定的样品应在室温下(18~25℃)或4℃(特殊要求时)运送;用于HIV-1载量检测的样品应在-20℃以下运输;DBS样品在室温下(18~25℃)运送。每一件包装的体积不宜超过50ml。

5)特殊情况下经有关部门批准可以用特快专递邮寄样品,但必须按3层包装,严禁使用玻璃器皿。

(六)样品的接收

(1)样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实验室内,由经过培训的工作人员在生物安全柜中打开,用后的包裹应及时消毒。

(2)核对样品与送检单,如发现试管溢漏应立即将尚存留的样品移出,对试管和容器消毒,同时报告实验室负责人。

(3)检查样品有无严重溶血、微生物污染、血脂过多及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受,应将样品安全废弃,并将样品情况立即通知送样人。