微生物学实验

杨毅红

目录

  • 1 课程概述
    • 1.1 课程简介
    • 1.2 授课计划-重要、必看
    • 1.3 成绩构成说明
    • 1.4 实验须知-重要、必看
    • 1.5 微生物培养皿艺术作品欣赏
      • 1.5.1 ①美国微生物学会的微生物培养皿艺术作品欣赏;
      • 1.5.2 ②本校学生微生物培养皿艺术创作作品展示。
        • 1.5.2.1 开放性实验课学生作品
    • 1.6 课程相关资源
    • 1.7 课程版权说明
  • 2 实验一 光学显微镜的操作及微生物个体观察
    • 2.1 实验内容和要求
      • 2.1.1 学习任务单
      • 2.1.2 实验报告模板
      • 2.1.3 课前小测
    • 2.2 实验结果观察与分析
    • 2.3 学生观察结果交流与分享
      • 2.3.1 2021级环工
      • 2.3.2 2022级环工
  • 3 实验二 微生物细胞的计数和大小测量
    • 3.1 学习任务单
      • 3.1.1 实验报告模板
    • 3.2 实验内容和要求
      • 3.2.1 课前小测
    • 3.3 实验结果观察与分析
      • 3.3.1 实验结果图片交流与分享
  • 4 实验三 放线菌、酵母菌和霉菌的制片和简单染色
    • 4.1 学习任务单
      • 4.1.1 实验报告模板
    • 4.2 实验内容和要求
      • 4.2.1 课前小测
    • 4.3 实验结果观察与分析
      • 4.3.1 实验结果图片交流与分享
        • 4.3.1.1 2022级
  • 5 实验四 细菌的革兰氏染色法
    • 5.1 学习任务单
      • 5.1.1 实验报告模板
    • 5.2 实验内容和要求
      • 5.2.1 课前小测
    • 5.3 实验结果观察与分析
      • 5.3.1 实验结果图片交流与分享
  • 6 实验五 操作考试
    • 6.1 操作考试流程和安排
    • 6.2 操作考试评分细则
  • 7 实验六 培养基的配制和灭菌
    • 7.1 学习任务单
      • 7.1.1 实验报告模板
    • 7.2 实验内容和要求
      • 7.2.1 课前小测
    • 7.3 实验结果观察与分析
      • 7.3.1 实验结果图片交流与分享
  • 8 实验七 微生物的纯种分离、培养和接种技术
    • 8.1 学习任务单
      • 8.1.1 实验报告模板
    • 8.2 实验内容和要求
      • 8.2.1 课前小测
    • 8.3 实验结果观察与分析
      • 8.3.1 实验观察结果交流与分享
  • 9 实验八 环境条件对微生物生长的影响
    • 9.1 学习任务单
      • 9.1.1 实验报告模板
    • 9.2 实验内容和要求
      • 9.2.1 课前小测
      • 9.2.2 抑菌实验结果照片展示
    • 9.3 实验结果观察与分析
      • 9.3.1 实验观察结果交流与分享
  • 10 实验九 细菌菌落总数和总大肠菌群的测定
    • 10.1 实验八安排
    • 10.2 学习任务单
      • 10.2.1 实验报告模板
    • 10.3 实验内容和要求
      • 10.3.1 实验注意事项
      • 10.3.2 课前小测
    • 10.4 实验结果观察与分析
      • 10.4.1 15管法-最大可能数表
      • 10.4.2 实验结果图片展示
    • 10.5 课堂小测
    • 10.6 拓展性学习-微生物指标检测的国标方法
    • 10.7 拓展性学习-各类水质标准
  • 11 微生物实验课-课外拓展活动
    • 11.1 显微摄影和培养皿艺术比赛通知
    • 11.2 转载--显微摄影作品
  • 12 竞赛实用实验操作技术
    • 12.1 蛋白质层析纯化-自动收集
实验结果观察与分析

1.实验结果将各水样的细菌总数和大肠菌群测试观测结果进行分别记录。最终对所测水样作出评价。

菌落总数:

  计算不同稀释度的平均菌落数:

  稀释度的选择和菌落总数报告方式:

    首先选择平均菌落在30~300之间者进行计算。 

    计算方法和报告方式如附表2所示。

 

培养24h后观察和记录各试管中产酸产气(产酸的培养液会变为黄色)的情况,产酸产气的即为阳性管,并拍照。观察过程中若只见产酸不见产气的话,可轻轻拍打试管壁,产生的气体可能在小倒管内。拍照并记录初发酵阳性管数据。

                         表1 大肠杆菌群数的结果

 

初发酵出现阳性管数

 
 

例:10-3mL/管

 
 

10-3mL/管

 
 

10-3mL/管

 
 

10-3mL/管

 
 

10-4mL/管

 
 

10-5mL/管

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 
 

产酸(溶液变黄色)、产气

 

 

表2 平板分离和革兰氏染色结果描述                                                

查学习通上附表4 15管法最大可能数(MPN)表,根据复发酵阳性管数计算1L水样中大肠杆菌群数:            。 

完成小组实验结果记录。

3 小组实验水样的细菌总数和大肠菌群测试结果

全班实验水样的检测结果

表4 校园典型水体及自来水水质检测结果

                                                                                                               


若用最新版的《地面水环境质量标准》(
GB3838-2002)中总大肠杆菌群指标判断,校园环境内典型水体的水质属于几类水?


5 思考题

1)从测定的细菌总数和大肠菌群结果来看,自来水是否符合饮用水标准?在不同的地方,这种测定条件能否根据实际情况(诸如培养温度、培养时间等)加以改变?为什么?

2)比较多管发酵法与纸片法测定大肠菌群的结果。它们各有何优缺点?

(3) 伊红美蓝培养基含有哪几种主要成分?在检查大肠菌群时,各起什么作用?

 

(4)为什么大肠菌群的检验要经过复发酵才能证实?

 

(5)所有发酵管均为阴性反应时,检验结果可否报告为“零”?

 

拓展思考题:

(1) 在何种情况下用三倍浓度的乳糖蛋白胨培养基?为什么?

 

(2)用国标的方法测定一个水样的大肠菌群数和粪大肠菌群分别需要多久时间?

 

(3)为什么在新修订《地表水环境质量标准》(GB 3838-2002)中改用粪大肠菌群指标代替总大肠菌群,而且新修订的《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)要增加粪大肠菌群这一微生物指标?

附录1:

附表2 计算菌落总数方法

附表3  一般水源水中菌落总数与水清洁程度的关系

附表4       15管法最大可能数(MPN)表

请查看学习通内提供的15管法最大可能数(MPN)表