生物技术制药(2025春)

沈阳药科大学 夏焕章 倪现朴

目录

  • 1 绪论
    • 1.1 课程介绍
    • 1.2 生物技术制药
  • 2 基因工程制药
    • 2.1 概述
    • 2.2 目的基因的获得
    • 2.3 基因工程工具酶
    • 2.4 基因工程载体
    • 2.5 目的基因与载体链接
    • 2.6 重组载体的转化
    • 2.7 重组子筛选
    • 2.8 PCR技术
    • 2.9 琼脂糖凝胶电泳
    • 2.10 宿主菌的选择
    • 2.11 大肠杆菌中的基因表达
    • 2.12 基因工程菌的不稳定性以及对策
    • 2.13 重组工程菌的培养
    • 2.14 基因工程药物的分离纯化
    • 2.15 变性蛋白的复性
    • 2.16 基因工程药物的质量控制
    • 2.17 基因工程药物的制造实例
  • 3 动物细胞工程制药
    • 3.1 动物细胞制药概述
    • 3.2 动物细胞的形态和生理特性
    • 3.3 生产用动物细胞的要求和获得
    • 3.4 动物细胞的培养条件
    • 3.5 动物培养基的种类和组成
    • 3.6 动物细胞大量培养的方法和操作方式
    • 3.7 动物细胞制药的应用
    • 3.8 动物细胞的核移植技术
  • 4 抗体制药
    • 4.1 抗体制药概述
    • 4.2 单克隆抗体
    • 4.3 抗原与动物免疫
    • 4.4 细胞融合与杂交瘤细胞的选择
    • 4.5 杂交瘤细胞性状鉴定
    • 4.6 基因工程抗体及其制备
    • 4.7 抗体工程
    • 4.8 抗体应用实例
  • 5 酶工程制药
    • 5.1 酶工程简介
    • 5.2 酶的来源
    • 5.3 固定化酶与固定化细胞的制备
    • 5.4 固定化酶与细胞的性质评价指标
    • 5.5 酶的人工模拟
  • 6 发酵工程技术概论
    • 6.1 高密度发酵
    • 6.2 基因工程在提高发酵产量中的应用
    • 6.3 基因工程在改善发酵组分中的应用
    • 6.4 基因工程在改进发酵生产工艺中的应用
    • 6.5 基因工程在产生杂合抗生素中的应用
杂交瘤细胞性状鉴定

抗体研究的发展历史,噬菌体抗体库技术的基本方法及特点。基因工程抗体的表达体系

 

一、选择题

1. 噬菌体抗体库技术的特点不包括( )

A.模拟天然全套抗体库

B.避开了人工免疫和杂交瘤技术

C.可获得高亲和力的人源化抗体

D.不需要经过淘筛
【答案】 D

二、简答题

1. 基因工程抗体主要的表达体系
【答案】

1.原核细胞表达

  抗体表达,又分融合表达和分泌型表达两种。融合表达有利于对抗体文库进行淘筛,且有利于对克隆和抗体活性进行鉴定。分泌型表达则利用琥珀终止密码的终止作用,在无琥珀抑制基因的菌株中进行表达,形成的可溶性抗体就是应用抗体。

2.真核细胞表达

  用于表达基因工程抗体的真核细胞有酵母、昆虫细胞、中国仓鼠卵细胞和真菌等,而且这些细胞的表达都是分泌型表达。真核细胞表达抗体的方式在病毒病的防治和基因治疗上有重要价值。

3.转基因植物表达

  抗体基因能转人植物中表达,这方面研究较多且潜力较大的是烟草叶中的表达,表达的抗体称为植物抗体(plantibody)。目前完整的抗体分子、单链抗体和Fab片段均已在烟草叶和拟南芥菜植物中得到表达,其产量可达植物叶片总蛋白量的 1.3%,其高表达产量使抗体成本大幅度下降,而且转基因植物表达可使抗体大规模农业化生产。

4.转基因动物表达

  即将人的Ig基因组转移到动物体内,让动物产生人源化抗体。目前只在单基因水平上做转基因鼠的实验,大的基因片段的转移难度很大,相信今后能取得进展。


http://baike.baidu.com/view/1381116.htm

http://en.wikipedia.org/wiki/Phage_display