单克隆抗体的概念及制备方法

　

一、选择题

1.制备单克隆抗体时一般采用与（  ）供体同一品系的动物进行免疫。

A 淋巴细胞       B肝细胞      C脾细胞      D骨髓瘤细胞
【答案】 C

二、简答题

1.HAT选择的原理？
【答案】
HAT选择培养基，它是用次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶（T）配制的。其中氨基喋呤（A）能阻断DNA合成的主要途径，瘤－瘤融合细胞和瘤细胞因不能合成DNA而死亡。脾－脾融合细胞和瘤细胞在这样的组织培养条件，几天内亦迅速死亡。由于SP20等骨髓瘤细胞都是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）缺乏株，脾细胞内却有这种酶，因此脾－瘤融合的杂交瘤细胞可利用HGPRT酶，用次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶（T）合成DNA，使杂交瘤细胞得以生长。

2.如何制备杂交瘤细胞？
【答案】
将两个细胞（例如 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）通过诱导融合形成杂交细胞，具体操作时为了提高成功率会用多个细胞同时杂交，然后筛选出目的细胞，再进行细胞培养使其有丝分裂而增值，得到大量目的细胞（杂交瘤细胞）。

哈洛，莱恩编著，沈关心等译.科学出版社, 2005-01-01

（美）霍华德，（美）凯瑟著，张权庚等译. 抗体制备及使用实验指南. 科学出版社. 2010