实验一  显微镜油镜的使用及细菌形态的观察

 

一、实验目的要求

    1．正确掌握显微镜油镜的使用方法。

    2．认识细菌的基本形态并绘图。

二、实验用品  

生物显微镜、二甲苯、擦镜纸、香柏油、细菌标本片。

二、实验方法及步骤

㈠、油镜的使用

    1、油镜的识别  油浸物镜简称油镜，是接物镜中放大倍数最高的镜头。除病毒外，观察细菌等微生物均要用普通生物显微镜的油镜。外形上油镜头最长，镜头的晶片和透光口径最小，一般在镜头下缘刻有一圈红线或黑线，注有100 ×或90×、油或Oil字样。

    2、油镜的使用方法  

  ⑴.调节光源  用油镜检查细菌等染色标本时，光线宜强。为了获得最亮的光线须注意3个要点：光圈开至最大；聚光器升至最高；反光镜用凹面。检查不染色的活菌标本时，宜用较弱光线，此时可将集光器稍稍降低或将光圈缩小。

    ⑵.将标本片放在载物台上，用弹簧夹固定，用移动器将标本调至光斑中间，先用低倍镜找到染色的视野，然后换用高倍镜或油镜。使用油镜时，先加香柏油一滴于标本上，从侧面看着油镜头，小心地转动粗螺旋，使油镜下降，先与油滴接触，再继续下降到几乎与载玻片接触。然后从目镜观察，一面徐徐向上转动粗螺旋直到视野中出现模糊的物象，再转动微动螺旋校准焦距至物象清晰为止。如果镜头已离开油面，仍未见到物象时，则可重复按照上述步骤操作直到看清为止。必须注意油镜头已接触油滴后调焦距时只能让粗螺旋向反时

针转动提升镜头，绝对不能向顺时针转动下降镜头，否则有压碎标本片和损坏透镜的危险。有的显微镜是净桶和油镜固定，转动载物台下面的粗螺旋，上升载物台，使标本表面的香柏油与油镜头接触，然后转动微动螺旋，徐徐下降载物台，调准焦距进行观察的。 

 使用油镜时之所以要加一滴香柏油，是由于油镜头的晶片极小，当镜头与标本片之间被空气层所隔时，因空气的折光指数与玻璃不同，自标本透过的光线往往在空气中折光而不易射入镜头内，使视野黑暗、物象不清。载玻片标本上滴一滴与玻璃的折光指数相近的油类—香柏油等（表实1-1），可避免透过的光线损失（图实1-1），进入油镜头的光量增多，视野亮度增大，菌体观察才清晰。

 ⑶．油镜观察完毕，应提高镜筒或降低载物台，取出标本片，用拭镜纸盖在标本的油滴上并轻轻拖过，以抹去标本上的大部分油渍，利于标本的保存和再次使用。油镜头上的香柏油先用拭镜纸搽拭，再用蘸有少量二甲苯的拭镜纸搽拭，最后再用拭镜纸将二甲苯拭干，以免二甲苯溶化晶片周围的粘胶，使晶片脱落。如油滴已浓稠或干结，则可先用拭镜纸蘸少量二甲苯，溶解并抹去镜头上的油渍，再用拭镜纸抹去残存的二甲苯。

 ⑷．显微镜用毕，将反光镜竖放，下降集光器，转动转换器，将低倍物镜对准载物台中央圆孔或摆成八字形，下降镜筒，再将各部件抹干净，放入镜箱或罩上镜罩。

    3、显微镜的维护

    1．移动显微镜时要轻缓，勿使震动，搬动时右手把持镜臂，左手托住镜座。

    2．显微镜应避免直接在阳光下曝晒，以免高温使粘胶溶解变形，引起透镜脱落或破裂。

    3．勿使显微镜与挥发性药品及腐蚀性酸碱类物品放在一起。

    4．显微镜不能随便拆卸。各镜面避免用手沾抹，以防印上手印和长霉。

    5．显微镜应放在干燥的地方，雨水多的季节应在镜箱内存放硅胶，以吸收水分。如长时间不用，物镜和目镜应卸下放在干燥器中，以免受潮长霉。

㈡、细菌基本形态的观察

    细菌基本形态   在油镜下观察葡萄球菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、猪丹毒杆菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、放线菌等细菌标本片。注意细菌的基本形态、排列、颜色以及各种细菌的相对大小。       

四、作  业

1.如何正确使用油镜?

2.绘出葡萄球菌的形态.