第二节 细菌的生长繁殖
一、细菌生长和繁殖的条件
细菌细胞生长发育,成熟后进行繁殖。细菌必须在有符合要求的营养条件下才能生长繁殖,这些条件包括合适的营养成分、温度、pH,渗透压以及气体条件。按照各种细菌生长与繁殖的条件要求,可以人工制备各种适合的培养基,并安排适宜的环境以培养细菌。
二、细菌的繁殖方式
细菌以二等分裂法(biary fission)进行无性繁殖。细菌细胞生长过程中,染色体复制,生长成熟时细胞体积增大,复制的染色体DNA附着于细胞膜相邻的两个位点上,两个位点间细胞膜增长,推动两个染色体各向细胞两极移动,最后在细胞中部产生环状隔膜将菌体分为两半。有的细菌分裂后便形成两个独立的新细胞。有些细菌的隔膜闭合不全,两个子细胞之间留有原浆带,可连成各种排列。
三、细菌的繁殖速度与生长曲线
细胞新个体的形成即细菌的生长繁殖,分别表现为个体和群体两方面:
细菌个体的生长繁殖:已知大肠杆菌菌体的分裂过程涉及30多个基因的调控。一个菌体分裂为两个菌体所需的时间称为世代时间(generation time)。大肠杆菌及许多其他病原菌在适宜的条件下,分裂一次仅需20min,而细菌染色体DNA的复制约需40min。之所以能如此,是因为在上一轮的复制还未完成时,下一轮的细胞分裂已经启动。此外,染色体DNA存在多个复制叉,可使子代的染色体DNA同时开始部分复制。
某些抗生素可抑制细菌聚合作用及组装,如使用非致死浓度的这些抗生素,可影响细胞的分裂,导致菌体形态异常,如使用抗生素的样本中的大肠杆菌,往往呈长丝状。
细菌群体的生长繁殖:外界环境因素对细菌的生长繁殖有很大的影响和制约,使得细菌不能无限制生长繁殖下去,在特定环境或培养基(特别是液体培养基)内,定时取样检查活菌数,可发现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标,以活菌数的对数为纵坐标,,常呈现一定的生长曲线(growth curve),并可区分为4个时期。在不同时期中,细菌的繁殖速度不同,形态和生理特性也会有变化(包括外形、大小、染色反应、发酵活力、代谢产物、抵抗力等)。了解这些情况,对培养、观察、利用和控制细菌是有意义的。
迟缓期(1ag phase) 是细菌对新环境的适应时期。此时菌体增大,代谢活跃,合成并积累所需酶系统。RNA含量明显增多,但DNA的量无变化,此时细菌数并不增加。这一过程一般约需1-4h。
对数期(logarithmic phase) 此期内菌体繁殖速度最快,细菌数依几何级数增加,生长曲线接近一条斜的直线。其形态、菌体大小、染色特性及生理活性均较典型,对不良理化因素和抗菌药物敏感。该期内病原菌的致病力最强。大肠杆菌的对数期可持续6-10h。
稳定期(stationary phase) 这一时期因营养的消耗、代谢产物的积累等,细菌繁殖速度下降,死亡增多,新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡。该期细菌的形态及生理性状常有改变,革兰氏阳性菌可染成阴性,毒素等代谢产物此时期积累多。大肠杆菌的稳定期持续约8h。
衰亡期(decline phase) 细菌开始大量死亡,死菌数超过活菌数。如不移植到新的培养基,最终可全部死亡。此期细菌的菌体变形或自溶,染色不典型,难以进行鉴定。
细菌的生长曲线是在体外人工培养条件下观察到的,在动物体内因受诸多因素的制约,未必能出现此种典型的曲线,但对细菌的生长规律的研究及实践有重要的参考价值。

