一 普通光学显微镜

1. 构成：    照明系统——包括光源和聚光灯，有时加各种滤光片以控制光的波长范围。

                   光学放大系统——目镜和物镜。

                   机械装置——镜架及样品调节系统。

  2. 性能参数：分辨率

      分辨率——区分开两个质点间的最小距离，取决于光源波长λ、物镜镜口角α和介质折射率N

    通常α最大值可达140°，空气中N = 1，最短的可见光波长λ= 450 nm，此时D = 292 nm，约0.3μm。若在油 镜下，N 可提高到1.5，D 可达0.2μm。因此，普通光镜的最大分辨率是0.2μm

3. 显微镜的光学特点

    制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。

    Sinα/2的最大值必然小于1，介质为空气时镜口率(N·Sinα/2)一般为0.05~0.95；油镜头以香柏油为介质，镜口率可接近1.5。

    普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜的分辨率值不会小于0.2μm，人眼分辨率为0.2mm，所以一般显微镜最大放大倍数通常为1000×。

二 暗视野显微镜（darkfield microscope）

    原理：聚光镜中央有档光片，照明光线不直接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。

    可观察4~200 nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜提高50倍。

三 相差显微镜（phasecontrast microscope）

    将透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高各种结构间的对比度，构造上的特殊之处：
    －环形光阑（condenserannulus）
    －相位板（annularphaseplate）

    最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞

四 偏振光显微镜 （polarizingmicroscope）

    用于检测具有双折射性的物质，如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等。

    其光源前有偏振片（起偏器），使进入显微镜的光线为偏振光，镜筒中有检偏器（一个偏振方向与起偏器垂直的偏振片）。

五 微分干涉差显微镜

    1952年，Nomarski在相差显微镜原理的基础上，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。与相差显微镜相比，其标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强

六 荧光显微镜

核心部件：

  1  滤光片系统

  2 专用物镜镜头

滤光片由激发滤光片和阻断滤光片。

制备技术：免疫荧光技术和荧光素直接标记技术

七 激光共聚焦扫描显微镜

用激光作光源逐点、逐行、逐面快速扫描成像

扫描激光与荧光收集共用一个物镜，物镜焦点即扫描激光的聚焦点，也是瞬时成像的物点——共聚焦

分辨力为普通光镜3倍

能显示样品的立体结构

八 透射电子显微镜

鲁斯卡(1906～1988) ，德国物理学家，1932年研制成功世界上第一台电子显微镜，1986年获诺贝尔物理奖。

用电子束作光源，用电磁场作透镜；

电子束的波长短，与加速电压（通常50～120KV）的平方根成反比，电压越高波长越短；

由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成；

分辨率可达0.2 nm，放大倍数可达近百万倍；

用于观察小于0.2µm的细微结构，称为亚显微结构（submicroscopic structures）或超微结构（ultramicroscopic structures；ultrastructures）。

九 扫描电子显微镜

20世纪60年代问世，用来观察标本的表面结构。

用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子(多少与样品的表面结构有关)，由探测体收集后转变为电信号，显示出扫描图像。

标本在固定、脱水后，要喷涂上一层重金属微粒，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。

目前扫描电镜的分辨力为6~10 nm，人眼能够区别荧光屏上两个相距0.2 mm 的光点，则扫描电镜的有效放大倍率为0.2 mm / 10 nm = 20000 X。

十 显微操作技术

在高倍复式显微镜下，利用显微操作器(micromanipulator) 控制显微注射针进行操作。

包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。

Gordon等1962年对非洲爪蟾进行核移植获得成功，我国学者童第周等在鱼类核移植方面获得许多成果。