生物技术制药(2024春)

沈阳药科大学 夏焕章 倪现朴

目录

  • 1 绪论
    • 1.1 课程介绍
    • 1.2 生物技术制药
  • 2 基因工程制药
    • 2.1 概述
    • 2.2 目的基因的获得
    • 2.3 基因工程工具酶
    • 2.4 基因工程载体
    • 2.5 目的基因与载体链接
    • 2.6 重组载体的转化
    • 2.7 重组子筛选
    • 2.8 PCR技术
    • 2.9 琼脂糖凝胶电泳
    • 2.10 宿主菌的选择
    • 2.11 大肠杆菌中的基因表达
    • 2.12 基因工程菌的不稳定性以及对策
    • 2.13 重组工程菌的培养
    • 2.14 基因工程药物的分离纯化
    • 2.15 变性蛋白的复性
    • 2.16 基因工程药物的质量控制
    • 2.17 基因工程药物的制造实例
  • 3 动物细胞工程制药
    • 3.1 动物细胞制药概述
    • 3.2 动物细胞的形态和生理特性
    • 3.3 生产用动物细胞的要求和获得
    • 3.4 动物细胞的培养条件
    • 3.5 动物培养基的种类和组成
    • 3.6 动物细胞大量培养的方法和操作方式
    • 3.7 动物细胞制药的应用
    • 3.8 动物细胞的核移植技术
  • 4 抗体制药
    • 4.1 抗体制药概述
    • 4.2 单克隆抗体
    • 4.3 抗原与动物免疫
    • 4.4 细胞融合与杂交瘤细胞的选择
    • 4.5 杂交瘤细胞性状鉴定
    • 4.6 基因工程抗体及其制备
    • 4.7 抗体工程
    • 4.8 抗体应用实例
  • 5 酶工程制药
    • 5.1 酶工程简介
    • 5.2 酶的来源
    • 5.3 固定化酶与固定化细胞的制备
    • 5.4 固定化酶与细胞的性质评价指标
    • 5.5 酶的人工模拟
  • 6 发酵工程技术概论
    • 6.1 高密度发酵
    • 6.2 基因工程在提高发酵产量中的应用
    • 6.3 基因工程在改善发酵组分中的应用
    • 6.4 基因工程在改进发酵生产工艺中的应用
    • 6.5 基因工程在产生杂合抗生素中的应用
酶的人工模拟

通过主链的“切割”、“剪接”和侧链基团的“化学修饰”对酶蛋白进行分子改造,以改变其理化性质及生物活性。这种应用化学方法对酶分子施行种种“手术”的技术称为酶分子的化学修饰。通过酶的分子改造使酶发挥更大的催化功效,以扩大其在科研和生产中的应用范围。酶的化学修饰可分为表面化学修饰,内部化学修饰,结合定点突变的化学修饰。酶分子经过化学修饰后,其特性在一定程度上发生了改变,天然酶的一些不足之处可以得到改善。。化学修饰法是改造酶分子的有效方法,而且已获得了一定的规律性和普遍性,具有广泛的应用前景。

一、选择题

1. 酶化学修饰的目的下列说法错误的是()
A. 提高生物活性
B. 增强在不良环境(非生理条件)中的稳定性
C. 提高生物识别能力
D. 解除酶的抗原性
【答案】 C

2. 酶分子内部修饰包括() 
A. 非催化活性基团的修饰
B. 与辅因子有关的修饰
C. 蛋白主链的修饰
【答案】 ABC

3. 酶化学修饰的方法有()
A. 表面化学修饰 
B. 酶分子内部修饰
C. 结合定点突变的化学修饰 
【答案】 ABC

二、简答题

1.2. 修饰酶的主要特征
【答案】
1.热稳定性提高
2.抗各类失活因子能力提高
3.抗原性消除
4.体内半衰期延长
5.最适pH改变
6.酶学性质变化
7.对组织分布能力改变



2.什么叫酶的化学修饰?为什么要对酶进行化学修饰?
【答案】
通过主链有切割、剪切和侧链基团有化学修饰对酶蛋白进行分子改造,以改变其理化性质和生物活性。
这种应用化学方法对酶分子施行种种“手术”的技术称为酶分子的化学修饰。
化学修饰目的
(1)提高生物活性;
(2)增强在不良环境中的稳定性;
(3)针对异体反应,降低生物识别能力

(德)布赫霍尔茨(Buchholz K.,生物催化剂与酶工程. 科学出版社, 2008

〔德〕比斯瓦根著,刘晓晴译. 酶学实验手册化学工业出版社2009