细胞培养的方法，一般可根据培养细胞的种类分为原代细胞培养和传代细胞培养；又可根据培养基的不同分为液体培养和固体培养；还可根据培养容器和方式不同分为静止培养、旋转培养、搅拌培养、微载体培养、中空纤维培养、固定化培养等。但不管采用那种方法，其基本技术大同小异。本节将先介绍其基本方法。

1．细胞分离

为了进行细胞培养，首先要从生物体取得细胞，目前获取细胞的方法有两种，即离心分离法和消化分离法。

（1）离心分离法

（2）消化分离法

2．细胞计数

一般在细胞分离制成悬液准备接种培养前都要进行细胞计数，然后按需要量接种于培养瓶或反应器。另外在观察细胞增长变化时，以及观察药物对细胞的抑制作用时，也都要反复进行细胞计数。目前常用的计数法有如下几种：

（1） 自动细胞计数器计数

（2） 血球计数板计数

（3）结晶紫染色细胞核计数法

（4）MTT染色计数

3．细胞传代

（1）悬浮细胞的传代

（2）贴壁细胞的传代   

4．细胞的冻存和复苏

（1） 细胞的冻存

（2） 细胞的复苏

一、单项选择题

1. 一般来说，二倍体只能传______。
A.40～50代
B.20～30代
C.80～100代
D.无限制地进行传代
【答案】 A

2. 一般来说，异倍体细胞可传______。
A.40～50代
B.20～30代
C.80～100代
D.无限制地进行传代
【答案】 D

二、多项选择题

1. 细胞培养的方法中，根据培养细胞的种类分为______。
A.原代细胞培养
B.液体培养
C.传代细胞培养
D.固定化培养
【答案】 AC

2. 细胞培养的方法中，根据培养基的不同分为______。
A.原代细胞培养
B.液体培养
C.固体培养
D.旋转培养
【答案】 BC

3. 细胞培养的方法中，根据培养容器和方式不同分为______。
A.静止培养
B.微载体培养
C.中空纤维培养
D.液体培养
【答案】 ABC

4. 细胞分离过程中，常用的消化物有______。
A.胰蛋白酶 
B.二乙烯四乙酸钠
C.胶原酶
D.链霉蛋白酶
【答案】 ABCD

二、简答题

1.目前常用的细胞计数法有哪些？
【答案】
（1）自动细胞计数器计数；
（2）血球计数板计数；
（3）结晶紫染色细胞核计数法；
（4）MTT染色计数；