生物技术制药(2024春)

沈阳药科大学 夏焕章 倪现朴

目录

  • 1 绪论
    • 1.1 课程介绍
    • 1.2 生物技术制药
  • 2 基因工程制药
    • 2.1 概述
    • 2.2 目的基因的获得
    • 2.3 基因工程工具酶
    • 2.4 基因工程载体
    • 2.5 目的基因与载体链接
    • 2.6 重组载体的转化
    • 2.7 重组子筛选
    • 2.8 PCR技术
    • 2.9 琼脂糖凝胶电泳
    • 2.10 宿主菌的选择
    • 2.11 大肠杆菌中的基因表达
    • 2.12 基因工程菌的不稳定性以及对策
    • 2.13 重组工程菌的培养
    • 2.14 基因工程药物的分离纯化
    • 2.15 变性蛋白的复性
    • 2.16 基因工程药物的质量控制
    • 2.17 基因工程药物的制造实例
  • 3 动物细胞工程制药
    • 3.1 动物细胞制药概述
    • 3.2 动物细胞的形态和生理特性
    • 3.3 生产用动物细胞的要求和获得
    • 3.4 动物细胞的培养条件
    • 3.5 动物培养基的种类和组成
    • 3.6 动物细胞大量培养的方法和操作方式
    • 3.7 动物细胞制药的应用
    • 3.8 动物细胞的核移植技术
  • 4 抗体制药
    • 4.1 抗体制药概述
    • 4.2 单克隆抗体
    • 4.3 抗原与动物免疫
    • 4.4 细胞融合与杂交瘤细胞的选择
    • 4.5 杂交瘤细胞性状鉴定
    • 4.6 基因工程抗体及其制备
    • 4.7 抗体工程
    • 4.8 抗体应用实例
  • 5 酶工程制药
    • 5.1 酶工程简介
    • 5.2 酶的来源
    • 5.3 固定化酶与固定化细胞的制备
    • 5.4 固定化酶与细胞的性质评价指标
    • 5.5 酶的人工模拟
  • 6 发酵工程技术概论
    • 6.1 高密度发酵
    • 6.2 基因工程在提高发酵产量中的应用
    • 6.3 基因工程在改善发酵组分中的应用
    • 6.4 基因工程在改进发酵生产工艺中的应用
    • 6.5 基因工程在产生杂合抗生素中的应用
PCR技术

一、基因工程菌的培养方式
1.补料分批培养
(1)DO-Stat 方法
(2)Balanced DO-Stat 方法
(3)控制菌体比生长速率方法
2.连续培养
3.透析培养
4.固定化培养
二、基因工程菌的培养工艺
1.培养基的影响
2.接种量的影响
3.温度的影响
4.溶解氧的影响
5.诱导表达程序的影响
6.诱导时机的影响
7.pH的影响
三、基因工程菌的培养设备



发酵罐简示图
1.去水去油空压机系统;2.转子流量计;3.空气过滤系统;4.溶解氧电极;5.溶解氧控制系统; 6.搅拌转速器;7.pH电极;8.pH控制系统;9.酸碱补加装置;10.热敏电极;11.温度控制系统; 12.加热器;13.冷冻水浴系统;14.消沫装置;15.培养基流加装置;16.培养罐体;17.冷却水排出; 18.排气;19.排气冷凝器;20.取样管

一、填空题

1. 基因工程菌的培养方式有_______、_______、_______、_______。
【答案】
补料分批培养
连续培养
透析培养
固定化培养



二、简答题

1. 基因工程菌的培养有哪些影响因素?
【答案】
1.培养基的影响:培养基的组成既要提高工程菌的生长速率,又要保持重组质粒的稳定性,使外源基因能够高效表达。
2.接种量的影响:接种量是指移入的种子液体积和培养液体积的比例,接种量的大小影响发酵的产量和 发酵周期,它的大小取决于生产菌种在发酵中的生长繁殖速度。
3.温度的影响:温度对基因表达的调控作用可发生在复制、转录、翻译或低分子调节分子合成等水平上。
4.溶解氧的影响
5.诱导表达程序的影响
6.诱导时机的影响
7.pH的影响

李寅,高海军,陈坚. 高细胞密度发酵技术. 化学工业出版社, 2006