实验三、真核细胞DNA的制备
-
1 学习指南
-
2 小测验
上一节
下一节
学习重点
掌握浓盐法从动物组织中提取DNA的原理和方法;
了解核酸的组成和分布;
掌握离心技术的原理及离心机的使用;
知识要点
利用各细胞器在一定介质中的沉降速度的差异,可采取离心的方法,将细胞器分离出来。细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒体、溶酶体和其他微体、核糖体和大分子。
浓盐法:核糖核蛋白(DNP)和脱氧核糖核蛋白(RNP)在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别,DNP溶于高盐溶液(0.14mol/L氯化钠溶液),RNP溶于低盐溶液(0.14mol/L氯化钠溶液)。
材料
新鲜猪肝
试剂
1×SSC
0.14M NaCl-0.1M Na2EDTA
15% SDS
5M NaCl
95%乙醇
仪器
匀浆器,离心机
操作

注意事项
规范操作,防止滴管、试剂的污染。
使用离心机注意平衡,转速从低到高;
匀浆时注意旋转用力,动作规范;
离心管,纱布使用完清洗干净摆放于试剂盘上。

