实验三  糖原的显示—PAS反应

一、 实验目的

通过PAS反应的原理和方法；了解糖原显示的基本原理和方法以及糖原在细胞中的分布

二、实验原理

多糖能被过碘酸氧化产生多醛基，当醛基与希夫试剂（Schiff）结合后会生成紫红色反应产物，此即PAS (periodic acid schiff reaction)。

三、实验用材：

盖玻片、载玻片、染色缸等

1%过碘酸溶液；Schiff‘s试剂，亚硫酸，Carnoy试剂，甲醇，苏木精等

鲫鱼（鲫鱼血细胞）

四、实验步骤：

1, 取鲫鱼血制作血涂片，室温晾干；

2，Carnoy（3甲醇:1冰乙酸）固定（15分钟）；

3，蒸馏水温和洗涤一次（1分钟）；

4，0.5% 过碘酸溶液侵泡10-15分钟；

5, 蒸馏水洗涤2分钟；

6， Schiff试剂浸泡15分钟；

7, 取出亚硫酸水溶液冲洗3次，每次1分钟；

8，蒸馏水洗涤一次（1-2分钟）；

9，光学显微镜下镜检。

 

五、应用：

    糖原染色应用的范围广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。

 

六、 作业

1，绘制显微镜下鲫鱼血细胞的PAS反应的染色结果图，并分析，提交实验报告。