实验目的
通过尿量的观察,分析某些因素对尿生成的影响及其机理。验证肾小管有排泄作用。了解尿液的引流方法。
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实验原理
尿的生成过程包括肾小球的滤过,肾小管与集合管的重吸收、分泌与排泄。任何影响肾小球的滤过和肾小管重吸收能力的因素,均可影响尿的生成而改变尿量。
实验对象 家兔
实验步骤
1、家兔的捉拿 捉拿兔子时应一手抓住兔子颈背部皮肤,将其轻轻提起,另一手托住其臀部。不要提耳朵或者单手捉拿。
2、麻醉 动物麻醉前应先称量体重,根据体重计算好麻醉药的用量。一般是25%乌拉坦溶液以4ml/kg计算。麻醉兔子时常用耳缘静脉注射的方法。耳缘静脉在兔子耳朵背面的后缘,注射前先用手拔除皮肤上的毛,使血管尽量显现出来。首次注射时因为没有注射经验,建议用手电筒从兔耳另一侧照射,这样血管会更加的清晰。用左手固定好兔子的耳朵,右手持针筒(注意正确的持针手法),注射针头应斜面朝上,第一次进针点应尽量靠近远心端,以便为以后的进针留有余地。刺入静脉后顺着血管平行方向深入25px左右。将针头与兔耳紧紧固定,然后开始注射。注射时密切观察兔子的肌肉松弛程度、角膜反射、呼吸以及后肢对疼痛的反应等情况。当发现肌肉完全松弛,角膜反射迟钝或消失,呼吸由浅而快变为深而慢,则表明已达到麻醉深度。注射时若发现阻力较大或出现局部肿大以及刺破血管等情况,应立即拔出针头,在原注射点的近心段重新刺入。
3、固定 家兔手术前一般要进行固定,先用布条将四肢拉直固定在手术台上,然后用棉绳勾住兔子的两颗上门齿将头固定在手术台前端的铁柱上。
4、腹部手术 用弯手术剪剪除从耻骨联合往上直径100px范围内腹部的被毛。然后用组织钳提起腹正中的皮肤,再用直手术剪剪开皮肤,接着沿腹白线剪开腹部肌肉,将膀胱移出体外。
5、膀胱插管 在膀胱颈部下方穿一线并结扎。用组织钳提起膀胱底部,然后用眼科剪在膀胱底部作一小切口,插入膀胱插管,接着用细棉绳把膀胱和插管一起结扎。将插管出口放入培养皿中收集尿液。
实验观察
1、静脉注射生理盐水15ml/kg体重,观察尿量的变化。
2、静脉注射速尿5mg/kg体重,观察尿量的变化。
3、用尿糖定性试纸进行尿糖定性试验。
4、静脉注射垂体后叶素2单位,观察尿量的变化。
5、静脉注射20%葡萄糖溶液10ml,观察尿量的变化。当尿量明显增多时再用尿糖定性试纸作尿糖定性试验。
6、静脉注射0.6%酚红溶液1-2ml,使尿液滴入盛有10%NaOH溶液的培养皿中。若尿中有酚红排出,当遇到NaOH则呈现红色,计算从注射酚红起到尿中排出酚红所需要的时间。
7、静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.5ml,观察尿量的变化。
结果与分析
1、静脉注射生理盐水后尿量增加,其原因是:a血浆胶体渗透压降低,有效滤过压增加,从而增加肾小球滤过率;b血容量增加,刺激容量感受器,冲动沿迷走神经传入中枢,抑制下丘脑-垂体后叶系统分泌释放抗利尿激素,使肾小管和集合管对水的重吸收减少;c血容量增加,静脉血流量增加,心输出量增多,动脉血压增加,使肾小球滤过率稍增多而尿量亦有增加。
2、静脉注射速尿后,抑制髓袢升支粗段对氯化钠的重吸收,致使髓质高渗状态下降,尿的浓缩程度下降,尿排出增加。
3、尿糖定性试验为阴性,正常情况下肾小球滤过的葡萄糖100%在近球小管重吸收。
4、静脉注射垂体后叶素,由于垂体后叶素中的抗利尿激素能与远曲小管和集合管上皮细胞膜上的受体结合,增加管腔对水的通透性,从而促进水的重吸收,故尿量减少。
5、静脉注射高渗葡萄糖后,血糖浓度超过肾糖阈,肾小管内糖浓度升高,小管液渗透压增高,妨碍肾小管对水的重吸收,而使尿量增多。肾小管内糖浓度升高,超过了肾脏重吸收的能力,部分葡萄糖随尿排出,故尿糖定性试验为阳性。
6、静脉注射酚红后,大部分和血浆蛋白相合,而小部分处于游离状态,从肾小球滤过后随尿排出。
7、静脉注射去甲肾上腺素后,由于其强烈的缩血管作用,可使肾血管剧烈收缩,肾血流量减少,肾小球滤过率降低,故尿量减少。
结论
1、凡能影响肾小球的滤过和肾小管重吸收作用的因素均能影响尿的生成。
2、酚红排泄实验说明肾脏有排泄功能。

